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上海聯(lián)碩生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第17年
你知道抗體是怎么產(chǎn)生的嗎?什么是抗體?2021/02/02
什么是抗體?抗體(antibody,Ab)是B細(xì)胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生的主要存在于血清等體液中的免疫球蛋白(Ig)。免疫球蛋白是具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白。圖1.正常血清電泳分離圖Ig與Ab的區(qū)別:Ig是化學(xué)結(jié)構(gòu)的概念,Ab是生物學(xué)功能的概念。所有的Ab都是Ig,但I(xiàn)g并非都有抗體活性。圖2.Ig與Ab的范圍免疫球蛋白的存在形式分泌型(SecretedIg,sIg):分泌入體液中,介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答;膜型(MembraneIg,mIg):構(gòu)成B細(xì)胞膜上的抗原受體。免疫
如何正確選擇移液器吸頭,移液器吸頭規(guī)格有幾種?2021/02/01
如何正確選擇移液器吸頭及吸頭規(guī)格介紹?移液器是生物研究中*的實(shí)驗(yàn)儀器,其配件吸頭在試驗(yàn)中的使用數(shù)量也非常巨大。目前生產(chǎn)移液器吸頭的廠家非常多,在眾多品牌、型號(hào)的吸頭產(chǎn)品面前如何選擇z適合我們的產(chǎn)品呢?如何選擇移液器吸頭:一、材質(zhì)當(dāng)前,市場(chǎng)上吸頭基本上都是用聚丙烯塑料(化學(xué)惰性高,使用溫度范圍廣的無(wú)色透明塑料)做的。不過(guò),同樣是聚丙烯,品質(zhì)差別也會(huì)很大:高品質(zhì)的吸頭一般都是用天然聚丙烯,而低廉的吸頭則很可能用回收的聚丙烯塑料(這種情況下,我們z多能說(shuō)其主要成份是聚丙烯)。除此之外,多數(shù)吸頭在制造過(guò)
對(duì)羥基苯甲酸酯的自我介紹2021/01/27
對(duì)羥基苯甲酸酯的自我介紹對(duì)羥基苯甲酸酯又稱尼泊金酯,主要用于醬油、果醬、清涼飲料等。它是無(wú)色結(jié)晶或白色結(jié)晶粉末,無(wú)味,無(wú)臭。防腐效果優(yōu)于苯甲酸及其鈉鹽,使用量約為苯甲酸鈉的1/10,使用范圍pH4~8。缺點(diǎn)是使用時(shí)因?qū)αu基苯甲酸酯類水溶性較差,常用醇類先溶解后再使用,同時(shí)價(jià)格也較高。1簡(jiǎn)介對(duì)羥基苯甲酸甲酯,又叫尼泊金甲酯,白色結(jié)晶粉末或無(wú)色結(jié)晶,易溶于醇,醚和丙酮,極微溶于水,沸點(diǎn)270-280℃。主要用作有機(jī)合成、食品、化妝品、醫(yī)藥的殺菌防腐劑,也用作于飼料防腐劑。由于它具有酚羥基結(jié)構(gòu),所以抗
蛋白酶K的使用方法、作用及配制2021/01/26
蛋白酶K是一種從白色念珠菌分離出來(lái)的強(qiáng)力蛋白溶解酶,具有很高的比活性,是DNA提取的關(guān)鍵試劑。該酶在較廣的pH范圍(4?12.5)內(nèi)及高溫(50?70°C)均有活性,用于質(zhì)?;蚧蚪MDNA、RNA的分離。在DNA提取中,主要作用是酶解與核酸結(jié)合的組蛋白,使DNA游離在溶液中,隨后用不同方法進(jìn)行抽提,除去雜質(zhì),收集DNA。EDTA等螯合劑或SDS等去垢劑均不能使之失活。蛋白酶K貯存液一般為10mg/ml或20mg/ml。貯存于一20°C。蛋白酶K溶液為無(wú)色透明,如出現(xiàn)沉淀就不能再使用。蛋白酶K,是
科研實(shí)驗(yàn)須知“三三四”2021/01/25
一、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的“三要素”1、實(shí)驗(yàn)對(duì)象實(shí)驗(yàn)所用的材料即為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。如用小鼠做實(shí)驗(yàn),小鼠就是本次實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)對(duì)象,或稱為受試對(duì)象。實(shí)驗(yàn)對(duì)象選擇的合適與否直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)實(shí)施的難度,以及別人對(duì)實(shí)驗(yàn)新穎性和創(chuàng)新性的評(píng)價(jià)。一個(gè)完整的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中所需實(shí)驗(yàn)材料的總數(shù)稱為樣本含量。根據(jù)特定的設(shè)計(jì)類型估計(jì)出較合適的樣本含量。樣本過(guò)大或過(guò)小都有弊端。2、實(shí)驗(yàn)因素所有影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的條件都稱為影響因素,實(shí)驗(yàn)研究的目的不同,對(duì)實(shí)驗(yàn)的要求也不同。影響因素有客觀與主觀,主要與次要因素之分。研究者希望通過(guò)研究設(shè)計(jì)進(jìn)行有計(jì)劃的安排,從
標(biāo)準(zhǔn)溶液與溶液的區(qū)別?2021/01/22
什么是溶液,什么是標(biāo)準(zhǔn)溶液?事實(shí)上有很多人經(jīng)常將兩者混淆,常規(guī)來(lái)說(shuō),溶液指的是多種或z少兩種物質(zhì)組成的混合物,而標(biāo)準(zhǔn)溶液則是具有準(zhǔn)確已知濃度的試劑溶液,但標(biāo)準(zhǔn)溶液是屬溶液,雖然兩者有著明顯的區(qū)別。下面小編來(lái)給大家詳細(xì)介紹一下標(biāo)準(zhǔn)溶液與溶液的區(qū)別。標(biāo)準(zhǔn)溶液與溶液的區(qū)別:溶液是由至少兩種物質(zhì)組成的均一、穩(wěn)定的混合物,被分散的物質(zhì)(溶質(zhì))以分子或更小的質(zhì)點(diǎn)分散于另一物質(zhì)(溶劑)中。物質(zhì)在常溫時(shí)有固體、液體和氣體三種狀態(tài)。溶液的均一性包含密度,組成,性質(zhì)都一樣,除此外,溶液還分為飽和溶液和不飽和溶液。標(biāo)
血清那些事兒,你都了解嗎?2021/01/21
血清是一種chun天然培養(yǎng)基,含有細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需的多種營(yíng)養(yǎng)成分,如蛋白質(zhì)、多肽等,多用于細(xì)胞培養(yǎng)、生物制品及診斷試劑的生產(chǎn)。血清的主要成分是蛋白質(zhì),如:白蛋白,球蛋白,纖維粘連素(促進(jìn)細(xì)胞附著)、α2巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用),激素,胰島素(可促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸,促細(xì)胞分裂),類胰島素生長(zhǎng)因子(能與細(xì)胞表達(dá)的胰島素受體結(jié)合,從而產(chǎn)生與胰島素相同的作用),促生長(zhǎng)激素(細(xì)胞增殖),胎球蛋白(促細(xì)胞附著),轉(zhuǎn)鐵蛋白(能結(jié)合鐵離子,減少其毒性)。血清的組成成分與含量常常與供血?jiǎng)游镄詣e、年齡
細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題及其解決方法2021/01/12
1.如何正確地保存培養(yǎng)基?普通的培養(yǎng)基放置在2-8℃冰箱避光保存,若已開封建議3周內(nèi)使用。未開封的培養(yǎng)基,一般可穩(wěn)定保存1年。2.培養(yǎng)基中酚紅的作用是什么?導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色變化的原因有哪些?酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為pH值的指示劑:中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。培養(yǎng)基顏色變黃,原因有:培養(yǎng)基中細(xì)胞代謝產(chǎn)物為酸性,培養(yǎng)瓶受污染,細(xì)菌代謝產(chǎn)酸等導(dǎo)致。培養(yǎng)基顏色偏暗紅色,原因有:培養(yǎng)基保存在4℃冰箱中,培養(yǎng)基內(nèi)的二氧化碳逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來(lái)越偏堿性,而培養(yǎng)基中的酸堿指示劑酚紅會(huì)隨著堿性增加
凍融血清沉淀物是否影響血清品質(zhì)?2021/01/08
做細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)經(jīng)常會(huì)用到血清,當(dāng)血清用不完我們會(huì)凍起來(lái)下次再次使用。但你有沒(méi)有發(fā)現(xiàn)有時(shí)候在融化血清過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)白色的沉淀物質(zhì),出現(xiàn)這種情況是否血清出現(xiàn)問(wèn)題了呢?首先我們要搞清楚血清中絮狀沉淀物是什么,沉淀物其實(shí)包含含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶里(一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以,使用產(chǎn)品
培養(yǎng)基中的添加物、PH值、保存的問(wèn)題2021/01/05
1、細(xì)胞培養(yǎng)用液:除培養(yǎng)基、血清、谷氨酰胺外,其他幾種液體也屬必須,不可省略:(1)雙抗:200倍,(1ml/支)其終濃度為青霉素100U/ml;鏈霉素100ug/ml,-24度保存。(2)L-谷氨酰胺:100倍,(1ml/支),終濃度2mM,-24度保存。(3)丙酮酸鈉:配制濃度50mM,4ml/支,終濃度為1mM/ml,-24度保存。(4)Hepes液:配制濃度1M(5ml/支),一支Hepes加入到200ml*培養(yǎng)基中,終濃度為25mM/ml,常溫保存。2、液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用,及使
移液槍該如何使用,使用移液槍的注意事項(xiàng)2021/01/04
量程的調(diào)節(jié)在我們的日常檢測(cè)中,有很多小的儀器看似不太重要,卻是萬(wàn)萬(wàn)離不得的,比如移液槍。無(wú)論是提取核酸,還是后續(xù)加樣上機(jī),移液槍就像是我們?cè)谖⒂^世界的一雙手,幫我們一次又一次完成真正的手沒(méi)法直接完成的操作。正確的使用移液槍能保證實(shí)驗(yàn)操作的準(zhǔn)確性,而用心的保護(hù)移液槍就像是在保護(hù)我們的手。在調(diào)節(jié)量程時(shí),如果要從大體積調(diào)為小體積,則按照正常的調(diào)節(jié)方法,逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)旋鈕即可;但如果要從小體積調(diào)為大體積時(shí),則可先順時(shí)針旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕至超過(guò)量程的刻度,再回調(diào)至設(shè)定體積,這樣可以保證量取的精度。在該過(guò)程中,千萬(wàn)不
瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)方法及原理2020/12/30
實(shí)驗(yàn)方法原理瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法。其分析原理與其他支持物電泳的主要區(qū)別是:它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),物質(zhì)分子通過(guò)時(shí)會(huì)受到阻力,大分子物質(zhì)在涌動(dòng)時(shí)受到的阻力大,因此在凝膠電泳中,帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質(zhì)和數(shù)量,而且還取決于分子大小,這就大大提高了分辨能力。但由于其孔徑相當(dāng)大,對(duì)大多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)其分子篩效應(yīng)微不足道,現(xiàn)廣泛應(yīng)用于核酸的研究中。蛋白質(zhì)和核酸會(huì)根據(jù)pH不同帶有不同電荷,在電場(chǎng)中受力大小不同,因此跑的速度不同,根據(jù)
試劑快要過(guò)保質(zhì)期了怎么辦?如何處理?2020/12/29
試劑的有效日期是影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的重要因素。化學(xué)試劑不像食品和藥品有嚴(yán)格的保質(zhì)期,化學(xué)試劑一般沒(méi)有保質(zhì)期的具體要求和界限,這與化學(xué)試劑的保質(zhì)期受多方面因素影響有關(guān);要根據(jù)化學(xué)性質(zhì)、保存條件等,再結(jié)合工作的實(shí)際情況判斷試劑是否出現(xiàn)變質(zhì)、能否繼續(xù)使用。●化學(xué)試劑性質(zhì)對(duì)有效期的影響●化學(xué)試劑一般沒(méi)有注明保質(zhì)期,確定試劑是否變質(zhì)主要是憑經(jīng)驗(yàn)和做新舊試劑對(duì)比試驗(yàn)?;瘜W(xué)試劑的有效期隨著化學(xué)品的化學(xué)性質(zhì)的改變,有著很大的區(qū)別。一般情況下,化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定的物質(zhì),保存有效期就越長(zhǎng),保存條件也簡(jiǎn)單。一般遵循以下幾個(gè)
細(xì)胞培養(yǎng)篇,選到無(wú)菌耗材避免細(xì)菌污染2020/12/29
養(yǎng)細(xì)胞的人怕的就是細(xì)胞污染,細(xì)胞一污染,一夜回到解放前,一切都得從頭開始,尤其是新手小白,幾乎都逃不過(guò)細(xì)胞污染,避免細(xì)胞污染,重要的是操作前和操作時(shí)。1.操作前,要保證所有的用品無(wú)菌,移液槍槍頭、離心管、培養(yǎng)瓶、PBS、培養(yǎng)基、血清等。高壓滅菌,一般要提前一天高壓滅菌,滅菌結(jié)束后放烘箱烘干,為確保充分烘干,一般需要過(guò)夜。要確保一定被高壓過(guò),像我們實(shí)驗(yàn)室就發(fā)生過(guò)沒(méi)被高壓的槍頭盒放烘箱里了,從高壓鍋里拿瓶子時(shí)一定要擰緊瓶蓋,否則就白壓了。2.操作前紫外燈照射超凈臺(tái)20min左右。實(shí)驗(yàn)前打開超凈臺(tái)的通
胎牛血清與新生牛血清的三大區(qū)別2020/12/25
胎牛血清和新生牛血清同為牛血清那么為什么人們一定要用胎牛血清而不用新生牛血清呢?想知道兩者之間都有哪些區(qū)別?1、來(lái)源不同胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛,所以胎牛血清的采集工作,便是先從懷孕中的母牛身體里取出胎牛(通常5-8個(gè)月胎齡),之后對(duì)未發(fā)育*的胎牛的心臟穿刺取血,完成采血的工作以后便再通過(guò)一系列的工藝處理獲得胎牛血清。而新生牛血清主要是采集已出生10天內(nèi)的小牛,而且它們的發(fā)育相對(duì)于胎牛而言更加*。國(guó)產(chǎn)血清因?yàn)樵瞎?yīng)等原因,通常會(huì)選8個(gè)月以上,或足月剛出生的小牛取血,把它定義為類胎
如何使用透析袋和透析袋的處理方式2020/12/23
析已成為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室簡(jiǎn)便常用的分離純化技術(shù)之一。在生物大分子的制備過(guò)程中,除鹽、除少量有機(jī)溶劑、除生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品等都要用到透析的技術(shù)。透析只需要使用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi),將此透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi),而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外,直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達(dá)到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液”,袋(膜)外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。透析的動(dòng)力是擴(kuò)散壓,擴(kuò)散壓是由橫
胎牛血清給細(xì)胞提供的益處,有哪六個(gè)方面?2020/12/22
胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用*的添加培養(yǎng)基。它營(yíng)養(yǎng)豐富,大約含有三四百種不同成分,具有基礎(chǔ)培養(yǎng)基所不具備的營(yíng)養(yǎng)因子。它給細(xì)胞提供的益處主要有六個(gè)方面1.提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的天然激素或天然生長(zhǎng)因子,如胰島素、IGFII等。2.提供天然的結(jié)合蛋白如胎球蛋白、白蛋白等,能識(shí)別氨基酸、脂質(zhì)、金屬離子和激素等,能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。胎球蛋白(Fetuin),具有多個(gè)鈣離子結(jié)合位點(diǎn),能調(diào)節(jié)血清中的鈣離子濃度。3.提供細(xì)胞外基質(zhì)成分,便于細(xì)胞粘附、貼壁、鋪展。當(dāng)然,有些細(xì)胞也能分泌部分外基質(zhì)成分,但血清中的更不可
鼻拭子和咽喉拭子取樣對(duì)比2020/12/21
探討新/型/冠/狀病毒肺炎核酸檢測(cè)中相對(duì)方便安全及敏感度高的方法。方法對(duì)武漢市紅十字會(huì)醫(yī)院100例新/型/冠/狀病毒肺炎病例同時(shí)留取咽拭子和鼻拭子。比較兩種方法取樣后樣本核酸檢測(cè)的陽(yáng)性率。結(jié)果咽拭子取樣標(biāo)本新/型/冠/狀病毒核酸陽(yáng)性檢出率54%;而鼻拭子取樣標(biāo)本的病毒核酸陽(yáng)性率89%。結(jié)論新/型/冠/狀病毒肺炎患者取鼻拭子進(jìn)行核酸檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率具有明顯優(yōu)勢(shì)。臨床應(yīng)盡可能使用鼻拭子而非咽拭子作為新/型/冠/狀病毒肺炎患者的優(yōu)選篩檢方式。2019年12月以來(lái),新/型/冠/狀病毒肺炎在武漢爆發(fā)并席卷
化學(xué)試劑常用分類,您知道嗎?2020/12/21
試劑分類的方法較多。如按狀態(tài)可分為固體試劑、液體試劑。按用途可分為通用試劑、試劑。按類別可分為無(wú)機(jī)試劑、有機(jī)試劑。按性能可分為危險(xiǎn)試劑、非危險(xiǎn)試劑等?;瘜W(xué)試劑又叫化學(xué)藥品,簡(jiǎn)稱試劑?;瘜W(xué)試劑是指具有一定純度標(biāo)準(zhǔn)的各種單質(zhì)和化合物(也可以是混合物)。要進(jìn)行任何實(shí)驗(yàn)都離不了試劑,試劑不僅有各種狀態(tài),而且不同的試劑其性能差異很大。有的常溫非常安定、有的通常就很活潑,有的受高溫也不變質(zhì)、有的卻易燃易爆:有的香氣濃烈,有的則劇毒……。只有對(duì)化學(xué)試劑的有關(guān)知識(shí)深入了解,才能安全、順利進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。既可保證達(dá)
PCR實(shí)驗(yàn)中一聽(tīng)到就令人 犯愁的PCR異常曲線2020/12/14
在PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,我們經(jīng)常會(huì)遇到各種奇特的擴(kuò)增曲線,如何正確解讀這些曲線并且做出恰當(dāng)?shù)慕鉀Q方案是我們一線實(shí)驗(yàn)者需要練就的基本功。今兒,將多年累積的功力編成“武功秘籍”奉上,助你PK掉那些令人犯暈的異常曲線。異常曲線1:PCR擴(kuò)增抑制原因分析:H07存在擴(kuò)增抑制解決方案:將樣本稀釋后進(jìn)行擴(kuò)增(抑制物的影響可通過(guò)稀釋樣本消除異常曲線2:自動(dòng)基線設(shè)置問(wèn)題原因分析:自動(dòng)基線問(wèn)題解決方案:手動(dòng)設(shè)置基線。將BaselineEnd設(shè)置為“擴(kuò)增信號(hào)出現(xiàn)的前一個(gè)循環(huán)”即,圖片展原始為26,將其設(shè)置為20,點(diǎn)擊O
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