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酶聯(lián)免疫吸附法2020/03/11: 原理：可用于測(cè)定抗體，也可用于檢測(cè)杭原。其基本原理是采用抗原與抗體的特異反響將待測(cè)物與酶連接，然后通過(guò)酶與底物發(fā)生顏色反響，用于定量測(cè)定。酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定的對(duì)象可所以抗體也可所以抗原。3種必要的試劑：①固相的抗原或抗體（免疫吸附劑）；②酶符號(hào)的抗原或抗體（符號(hào)物）；③酶效果的底物（顯色劑）。ELISA進(jìn)程包括：抗原吸附在固相載體上，這個(gè)進(jìn)程稱為包被，加待測(cè)抗體,再加相應(yīng)酶符號(hào)抗體，生成抗原--待測(cè)抗體--酶符號(hào)抗體的復(fù)合物，再與該酶的底物反響生成有色產(chǎn)品。借助分光光度計(jì)的光吸收核算抗體的量。依

關(guān)于血清的使用與儲(chǔ)存2020/03/03: 準(zhǔn)確的使用及保存血清，才能使血清發(fā)揮應(yīng)有的作用；今天，我司要為您解說(shuō)血清的使用與儲(chǔ)存：1.使用前處理:大部分血清在使用前必需滅活處置，即56°C30分鐘。滅活的目標(biāo)是去除血清中的補(bǔ)體身分，避免補(bǔ)體對(duì)細(xì)胞發(fā)作毒性同化。血清始末滅活也會(huì)喪失一些對(duì)細(xì)胞無(wú)利的成分，如發(fā)展因子，是以也有人提出血清不經(jīng)滅活直接用于造就，這樣做的前提是確認(rèn)血清中不含補(bǔ)體身分。對(duì)付一些品德高的胎牛血清和新牛血清能夠斟酌不經(jīng)滅活直接用于細(xì)胞造就。2.使用濃度:自從有了分化造就基，血清就是作為一種添加身分與分化造就基稠濁使用，使用

胎牛血清入冬的貯存方式2020/01/14: 胎牛血清入冬貯存怎么辦？根據(jù)我司的經(jīng)歷分析，胎牛血清由于其產(chǎn)品的特性，在貯存的時(shí)分需求多加留意，過(guò)錯(cuò)的操作會(huì)使胎牛血清失掉活性在實(shí)際應(yīng)用的時(shí)分應(yīng)留意以下幾點(diǎn)：1、首先在解凍和貯存的時(shí)分應(yīng)該將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。2、因此，推薦在-20℃以下貯存血清，并防止重復(fù)凍融。我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。3、長(zhǎng)時(shí)間貯存在2－8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）或許聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。

試劑盒試驗(yàn)環(huán)境的重要性2020/01/09: 1.為推遲光學(xué)部件的老化，應(yīng)避免陽(yáng)光直射。2.操作環(huán)境溫度應(yīng)在15℃至40℃之間，環(huán)境濕度在15%~85%之間。3.儀器應(yīng)放置在噪音低于40分貝的環(huán)境下。4.操作時(shí)電壓應(yīng)堅(jiān)持穩(wěn)定。5.操作環(huán)境空氣清洗，避免水汽、煙塵。6.堅(jiān)持枯燥、潔凈、水平的作業(yè)臺(tái)面，以及滿足的操作空間。7.儀器應(yīng)放置在無(wú)強(qiáng)磁場(chǎng)和煩擾電壓的方位。ELISA試劑盒運(yùn)用留心：1.不相同廠家出產(chǎn)的試劑盒因出產(chǎn)工藝和操作方法略有不相同，有必要依照所用試劑盒嚴(yán)格操作，否則簡(jiǎn)略發(fā)生查看效果的不確定性.2.若不相同批號(hào)試劑的不相同組分(A液

在細(xì)胞傳代培育過(guò)程中的原則、注意事項(xiàng)2019/12/30: 在生物醫(yī)學(xué)試驗(yàn)中常常會(huì)用到細(xì)胞系，指原代細(xì)胞培育物經(jīng)傳代成功后所繁衍的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培育細(xì)胞。細(xì)胞系是經(jīng)過(guò)細(xì)胞傳代或續(xù)代培育是將細(xì)胞從現(xiàn)有的培育物分隔或分出來(lái)開(kāi)端新的培育，并參加新鮮培育液來(lái)促進(jìn)擴(kuò)增的常用手法?？墒羌?xì)胞系與新分離的或原代細(xì)胞的培育條件相類似，但也有一些根本不同的當(dāng)?shù)兀海?）每個(gè)細(xì)胞系需求其特定的成長(zhǎng)因子混合物（2）與原代細(xì)胞比較，它們的成長(zhǎng)需求更嚴(yán)密的監(jiān)測(cè)，由于使它們無(wú)限成長(zhǎng)的突變同時(shí)也會(huì)形成它們很快到達(dá)過(guò)度成長(zhǎng)。因而，當(dāng)細(xì)胞系成長(zhǎng)到了簡(jiǎn)直覆蓋整個(gè)培育器皿底部，也

常見(jiàn)ELISA試劑盒試驗(yàn)技能要點(diǎn)2019/12/26: 1.準(zhǔn)備好所有試驗(yàn)額定所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等；2.依據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確認(rèn)所需試劑的量；3.按闡明書(shū)將所用試劑平衡至室溫，制造所需試劑；4.標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備，盡量分裝做備份。短期內(nèi)無(wú)法試驗(yàn)者，留意低溫保存。試驗(yàn)中為了確認(rèn)信號(hào)和背景應(yīng)將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測(cè)抗體（0.25-2μg/ml）在預(yù)試驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時(shí)，應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的規(guī)范品的系列稀釋。按試劑闡明書(shū)慣例供給的范圍進(jìn)行操作。規(guī)范品的制造：對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔

細(xì)胞呈現(xiàn)黑點(diǎn)怎么處理?2019/12/23: 一旦您在細(xì)胞培育的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀察培育基是否混濁，然后，在鏡下觀察培育細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。假如細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁衍，培育基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包含細(xì)菌污染、支原體污染等。假如在鏡下觀察細(xì)胞，生長(zhǎng)狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)呈現(xiàn)前相比。沒(méi)有任何變化，那么，黑點(diǎn)的呈現(xiàn)可能與以下幾種狀況有關(guān)：1、細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)老，破碎的細(xì)胞殘骸;2、血清質(zhì)量不好，反復(fù)凍融的成果;3、制造培育基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長(zhǎng);4、制造培育基的水質(zhì)、容器不合格?？蓱?yīng)用離心、過(guò)濾的方法去除這些黑

Elisa試劑盒的使用說(shuō)明2019/12/19: 由于elisa辦法的操作簡(jiǎn)單，現(xiàn)在越來(lái)越的科研工作者在做試驗(yàn)時(shí)都會(huì)挑選elisa辦法，一些剛觸摸的elisa辦法的朋友們估量對(duì)elisa試劑盒不怎么了解，今日聯(lián)碩來(lái)說(shuō)明elisa試劑盒的使用說(shuō)明：1.在貯存及孵育過(guò)程中防止將試劑暴露在強(qiáng)光中。一切試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸騰和污染，試劑防止遭到微生物的污染，由于蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的成果。2.小心汲取試劑并嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。請(qǐng)注意在汲取標(biāo)本/規(guī)范品，酶結(jié)合物或底物時(shí)，個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間距離如果太大，將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵

聯(lián)碩講堂：血清的一些主要作用2019/12/19: ●提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等，是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)?！裉峁┘に睾透鞣N生長(zhǎng)因子：胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素（地塞米松）、類固醇激素（雌二醇、睪酮、孕酮）等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等?！裉峁┙Y(jié)合蛋白：結(jié)合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質(zhì)，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等，轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用?！裉峁┐俳佑|和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。●對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用：有一些細(xì)胞，如內(nèi)皮細(xì)胞、骨

ELISA試驗(yàn)操作失敗的主要原因2019/12/16: 我們知道，ELISA測(cè)定中影響要素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在查驗(yàn)中除正常反響外，有時(shí)?？梢?jiàn)到一些過(guò)錯(cuò)結(jié)果(即假陽(yáng)性或假陰性)，那么致使試驗(yàn)不成功的主要原因有哪些咧？一：標(biāo)本的影響：溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測(cè)易發(fā)生假陽(yáng)性?；蛟S是溶血血清中含有過(guò)氧化酶物質(zhì)(紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素)，在洗刷過(guò)程中往往難以*洗脫，它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧(O)，從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì)，即顯藍(lán)色，發(fā)生假陽(yáng)性。所以嚴(yán)峻溶血標(biāo)本禁用。二、標(biāo)本受細(xì)菌污染：因菌體

聯(lián)碩淺談:血清熱滅活的問(wèn)題2019/12/03: 血清的熱滅活是很多培養(yǎng)者感興趣的話題，價(jià)格不菲的血清中含有諸如生長(zhǎng)因子，維生素，氨基酸等珍貴物質(zhì)，而將它們置于50℃以上的溫度長(zhǎng)達(dá)30分鐘是*沒(méi)有必要的。盡管如此，在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室之中血清的熱滅活還是作為常規(guī)來(lái)執(zhí)行，多數(shù)實(shí)驗(yàn)者并沒(méi)有考慮熱處理對(duì)血清中的生長(zhǎng)因子，氨基酸等成分帶來(lái)的負(fù)面影響，在我們的技術(shù)熱線中常被提到的就是否該對(duì)血清進(jìn)行熱滅活，下面我們就對(duì)胎牛血清的熱滅活進(jìn)行一些探討和解釋。熱滅活目的是為了去除血清中補(bǔ)體等對(duì)熱敏感的物質(zhì)，但是在胎牛血清中對(duì)補(bǔ)體的滅活則明顯沒(méi)有必要。Triglia和L

聯(lián)碩淺談:血清的首要效果以及鑒別方法有哪些?2019/11/25: 我們大家都知道血清，指血液凝結(jié)后，在血漿中除掉纖維蛋白原別離出的淡黃色通明液體或指纖維蛋白原已被除掉的血漿。那么,我們提取血清的首要目的有哪些呢?又應(yīng)該來(lái)如何鑒別血清呢?聯(lián)碩為您具體解說(shuō):血清的首要效果:1、供給基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等，是細(xì)胞成長(zhǎng)有必要的物質(zhì)。2、供給激素和各種成長(zhǎng)因子：胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素（氫化ke的松、地塞米松）、類固醇激素（雌二醇、睪酮、孕酮）等。成長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞成長(zhǎng)因子、表皮成長(zhǎng)因子、血小板成長(zhǎng)因子等。3、供給結(jié)合蛋白：結(jié)合蛋白

胎牛血清的保存和使用2019/11/20: 胎牛血清的保存方法：需要長(zhǎng)期保存的胎牛血清必須儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會(huì)被破壞，而影響血清質(zhì)量。如果一次無(wú)法用完一瓶,可將40～45ml分裝于無(wú)菌50ml離心管中。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前，必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽?。胎牛血清的使用方法?、瓶裝胎牛血清解凍需采用逐步解凍法：-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1

酵母感受態(tài)細(xì)胞的制備和保存2019/09/20: 酵母，如釀酒酵母、裂殖酵母和畢赤酵母，通常用于生物學(xué)實(shí)驗(yàn)研究。酵母是易于培養(yǎng)的單細(xì)胞真核生物，他們的基因和蛋白質(zhì)與哺乳動(dòng)物具有很好的相似性，所以是的生物模型。酵母細(xì)胞用于研究基因功能，蛋白質(zhì)相互作用，細(xì)胞通路等，也是大規(guī)模異源蛋白表達(dá)和小分子生產(chǎn)的宿主，在發(fā)酵，釀造和制藥行業(yè)等起著*的作用。涉及酵母的常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)有酵母雙/三雜交系統(tǒng)，突變體篩選庫(kù)和同源重組，等等。一、為什么我們需要酵母感受態(tài)細(xì)胞?通常，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需外源DNA引入到酵母細(xì)胞。引入基因片段（線性ssDNA或質(zhì)粒）是通過(guò)酵母細(xì)胞的轉(zhuǎn)化

比色法在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用2019/09/12: 酶聯(lián)免疫方法常見(jiàn)的兩種方法就是酶聯(lián)免疫吸附法和比色法，如何應(yīng)用比色法，測(cè)定樣本呢，今天就讓上海研域與您一起分享一下！elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體，然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。以軟板為載體的試驗(yàn)，需先將板置于標(biāo)準(zhǔn)96孔的座架中，才可進(jìn)行比色。在加底物液顯色前，先將軟板邊緣剪凈，這樣，此板就可*平妥坐入座架中。比色時(shí)應(yīng)先以蒸餾水校零點(diǎn)，測(cè)讀底物孔（未經(jīng)任何反應(yīng)僅加底物液的孔）和空白孔（以生理鹽水或稀釋液代替標(biāo)本作全過(guò)程的孔），以記錄本次試驗(yàn)的試劑狀況。其后

聯(lián)碩教您一抗/二抗該怎么選?2019/09/06: 我們?cè)谏钪薪?jīng)常會(huì)面臨做選擇這樣的一個(gè)難題，其實(shí)做選擇本身并不是多么困難的事情，關(guān)鍵在于您是否了解自己內(nèi)心真正需要的是什么。就好比我們的實(shí)驗(yàn)者在選擇產(chǎn)品的品牌、質(zhì)量、規(guī)格等，根據(jù)這些信息再去做相關(guān)的判斷。比如zui簡(jiǎn)單的一個(gè)例子，不少的伙伴都對(duì)一抗、二抗的選擇方面甚是苦惱，那如何選擇呢？擇一抗宿主物種通常，當(dāng)使用偶聯(lián)二抗檢測(cè)未偶聯(lián)一抗時(shí)，產(chǎn)生抗體的宿主動(dòng)物物種就顯得非常重要。對(duì)于免疫組織化學(xué)，產(chǎn)生一抗的物種應(yīng)盡可能與樣品物種不同。這是為了避免抗免疫球蛋白的二抗與樣品中的內(nèi)源性免疫球蛋白間發(fā)生潛在

大鼠血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）酶聯(lián)免疫2019/08/23: 大鼠血管緊張素Ⅱ（AngⅡ)酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于雙抗體夾心技術(shù)原理，來(lái)檢測(cè)大鼠血管緊張素Ⅱ（AngⅡ)，只能用于研究用途，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。用途：用于大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中血管緊張素Ⅱ（AngⅡ)測(cè)定。工作原理:本試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定樣品中大鼠血管緊張素Ⅱ（AngⅡ)水平。向預(yù)先包被了大鼠血管緊張素Ⅱ（AngⅡ)單克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入大鼠血管緊張素Ⅱ（AngⅡ)，溫育；溫育后，加入生物素標(biāo)記

實(shí)驗(yàn)一次就成功的技巧2019/08/16: 或許平常一些小習(xí)慣就可以讓您的試驗(yàn)在操作中變得與眾不同，試驗(yàn)中的每個(gè)環(huán)節(jié)都很重要，疏忽任何一個(gè)都可能導(dǎo)致試驗(yàn)的失利，每個(gè)人在試驗(yàn)中都有自己的一些好的細(xì)微的習(xí)氣，而有些好習(xí)慣可以讓您的試驗(yàn)一次就成功！公司技術(shù)人員說(shuō)過(guò)：“好記性不如爛筆頭，這雖然是俗語(yǔ)，但筆的重要性仍是清楚清楚的。不管大小試驗(yàn)，每次試驗(yàn)結(jié)束，都要及時(shí)并且細(xì)心做記載，不要等?！币煌?，技術(shù)員還建議操作員養(yǎng)成這些好習(xí)慣：1.做完試驗(yàn)擦干桌子，悉數(shù)東西歸位，有些東西可以回收的就回收，許多試驗(yàn)室的槍頭是回收的。2.試驗(yàn)前細(xì)心規(guī)劃，作試驗(yàn)時(shí)不胡

冷凍切片原理及其制作方法分析2019/08/09: 冷凍切片是利用物理降溫的方法將新鮮的組織標(biāo)本冷凍使其產(chǎn)生一定的硬度進(jìn)行切片的技術(shù)方法。與石蠟切片相比，由于冷凍切片不需脫水包埋因此制片速度快，是為手術(shù)進(jìn)行中的臨床醫(yī)師提供病理診斷的良好方法。ELISA試劑盒此外由于冷凍切片的標(biāo)本是未經(jīng)固定的新鮮組織，因此冷凍切片也是脂肪染色、酶組織化學(xué)染色以及某些免疫組織化學(xué)染色和原位分子雜交的理想制片方法。冷凍切片的不足是組織細(xì)胞的形態(tài)略遜于石蠟切片。二、冷凍切片的制作方法利用氯乙烷噴灑、二氧化碳噴射、半導(dǎo)體制冷的方法均可制作普通的冷凍切片，用于術(shù)中的病理診斷

ELISA試劑盒分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種2019/08/02: 血清是常用的標(biāo)本，血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本，標(biāo)本引起的假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致，ELISA試劑盒分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種：1．內(nèi)源性物質(zhì)普遍認(rèn)為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì)，可以不同程度影響檢測(cè)結(jié)果。常見(jiàn)的干擾物質(zhì)有：類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig（s）抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。（1）類風(fēng)濕因子人血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子（RF）可以與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標(biāo)記二抗的FC段直接結(jié)合，從而導(dǎo)致假陽(yáng)性

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