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2010
01-26

RNA的保護(hù)
RNA的保護(hù)與DNA提取實(shí)驗(yàn)相比，RNA的提取實(shí)驗(yàn)常常較為困難，這主要是由于RNA非常容易降解。而造成RNA降解的原因來自內(nèi)因和外因兩個(gè)方面。內(nèi)因：RNA核糖殘基的2’和3’位置帶有羥基，易被水解；外因：生物體內(nèi)和外部環(huán)境中存在大量RNase，并且RNase不易失活，高溫后仍然能夠正確折疊恢復(fù)活性。因此，從樣品的儲(chǔ)存、RNA的提取以及RNA提取完成后的保存，我們都需要格外小心，處處防范RNase對RNA的降解作用。下面，我們將介紹RNA提取過程中保護(hù)RNA的措施。1、提取前的RNA保護(hù)材料樣品中
2010
01-18

細(xì)胞從培養(yǎng)皿上的解離
細(xì)胞從培養(yǎng)皿上的解離以下通用步驟可以在保持細(xì)胞完整性的同時(shí)從培養(yǎng)器皿中分離多種細(xì)胞系。但這一步驟不能廣泛適用于所有細(xì)胞系。應(yīng)通過實(shí)驗(yàn)來確定不同體系所需的佳條件和濃度。?在傳代培養(yǎng)時(shí)監(jiān)測細(xì)胞存活率。?細(xì)胞存活率應(yīng)大于90%。?對于無血清培養(yǎng)基，建議降低胰酶用量。1．去除器皿中原有細(xì)胞培養(yǎng)基。2．用不含鈣鎂的平衡鹽溶液或EDTA清洗細(xì)胞。將清洗溶液加到培養(yǎng)瓶中與細(xì)胞相對的一側(cè)。搖動(dòng)培養(yǎng)瓶1-2分鐘以沖洗細(xì)胞層，然后倒掉清洗溶液。3．在培養(yǎng)瓶中與細(xì)胞相對的一側(cè)以2-3ml/25cm2的比例加入選定的解
2010
01-18

原代組織細(xì)胞的解離
原代組織細(xì)胞的解離從原代組織上獲取單個(gè)細(xì)胞懸液的常用方法是利用酶的解聚作用。盡量縮短用酶處理細(xì)胞的時(shí)間，以獲得高的存活率。按下面的方法解聚整個(gè)組織，以獲得大量細(xì)胞。胰酶1．先去除無關(guān)組織，然后用滅菌的解剖刀或剪刀將組織切成3-4mm大小碎塊。通過在不含鈣鎂的平衡鹽溶液進(jìn)行重懸來清洗組織碎塊。待組織碎塊沉降后去掉上清液。重復(fù)清洗2-3次。2．將裝有組織碎塊的容器置于冰上，去掉所有上清液。在不含鈣鎂的平衡鹽溶液中加入0.25%胰酶（每100mg組織大約需要1ml胰酶）。3．在4℃下孵育6-18小時(shí)，
2010
01-18

深低溫保藏細(xì)胞的解凍
深低溫保藏細(xì)胞的解凍深低溫保藏的細(xì)胞十分脆弱，要輕柔操作?？焖俳鈨錾畹蜏乇２氐募?xì)胞，然后直接將其接種到*生長培養(yǎng)基中，如果細(xì)胞對抗凍劑（DMSO或甘油）特別敏感，則離心除去抗凍劑，然后將細(xì)胞接種到*生長培養(yǎng)基中。下面是深低溫保藏細(xì)胞的建議解凍步驟：直接接種法1．從凍存管中取出細(xì)胞，用37℃水浴快速解凍。2．將細(xì)胞直接接種到*生長培養(yǎng)基中。每毫升凍存細(xì)胞需要10-20ml*生長培養(yǎng)基。計(jì)算活細(xì)胞的個(gè)數(shù)。細(xì)胞接種量至少要達(dá)到3X105活細(xì)胞/ml。3．將細(xì)胞培養(yǎng)12-24h。更換新鮮*生長培養(yǎng)基以去
2010
01-18

使用抗生素和抗真菌素進(jìn)行去污培養(yǎng)
使用抗生素和抗真菌素進(jìn)行去污培養(yǎng)當(dāng)不可替代的培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生污染時(shí)，研究人員可以嘗試消除或控制污染。首先，確定污染類型是細(xì)菌、真菌、支原體還是酵母。將污染的培養(yǎng)物與其他細(xì)胞系隔離。實(shí)驗(yàn)用消毒劑清洗培養(yǎng)箱和層流通風(fēng)櫥，檢查HEPA（粒子空氣）過濾器。高濃度的抗生素和抗真菌素可能對某些細(xì)胞系有毒害作用。因此，應(yīng)測定劑效關(guān)系以確定抗生素和抗真菌素的毒性劑量。這一點(diǎn)在使用AmphotericinBsolubilized等抗真菌素或泰樂菌素等抗生素時(shí)至關(guān)重要。下面給出了確定毒性劑量和去污培養(yǎng)的推薦步驟。1．解
2010
01-11

DNA產(chǎn)物純化試劑盒簡介
DNA產(chǎn)物純化試劑盒簡介：對于TA克隆、酶切或者直接測序等試驗(yàn)來說，純化PCR產(chǎn)物或酶切產(chǎn)物是非常必要的。以TA克隆為例，其成功率跟目的片段的純度高低具有重要關(guān)系。雖然未經(jīng)過純化的PCR產(chǎn)物也可以跟載體連接，但會(huì)增加篩選陽性克隆的難度，因?yàn)镻CR產(chǎn)物中的dNTP和引物等可能也會(huì)跟載體連接。在進(jìn)行連接試驗(yàn)時(shí)，這些非特異性的產(chǎn)物會(huì)跟特異性產(chǎn)物相互競爭，從而導(dǎo)致連接效率下降。DNA片段純化回收原理在獲得DNA片段后，一般采用吸附材料的方法去除雜質(zhì)和純化DNA片段。目前大多數(shù)生物公司都采用硅基質(zhì)吸附材料
2010
01-11

質(zhì)粒提取試劑盒簡介
質(zhì)粒提取試劑盒簡介：質(zhì)粒（Plasmid）是一種染色體外的穩(wěn)定遺傳因子，大小從1-200kb不等，為雙鏈、閉環(huán)的DNA分子，并以超螺旋狀態(tài)存在于宿主細(xì)胞中。質(zhì)粒主要存在于細(xì)菌、放線菌和真菌細(xì)胞中，它具有自主復(fù)制和轉(zhuǎn)錄能力，能在子代細(xì)胞中保持恒定的拷貝數(shù)，并表達(dá)所攜帶的遺傳信息。質(zhì)粒提取原理及流程：較常用的質(zhì)粒DNA提取方法有3種：堿裂解法、煮沸法和去污劑（如Triton和SDS）裂解法。前兩種方法比較劇烈，適用于較小的質(zhì)粒（15kb）。堿裂解法是一種應(yīng)用為廣泛的制備質(zhì)粒DNA的方法，其原理為：染
2010
01-11

基因組DNA提取試劑盒簡介
基因組DNA提取試劑盒簡介：DNA是遺傳信息的載體，是重要的生物信息分子，是分子生物學(xué)研究的主要對象，為了進(jìn)行測序、雜交、基因表達(dá)、文庫構(gòu)建等試驗(yàn)，獲得高分子量和高純度的基因組DNA是非常重要的前提，因此基因組DNA的提取也是分子生物學(xué)試驗(yàn)技術(shù)中重要、基本的操作之一。Solarbio公司提供各種不同樣品基因組DNA提取試劑盒，如植物、動(dòng)物、細(xì)菌、細(xì)胞、血液、酵母等基因組DNA提取試劑盒。所提取的基因組純度高，片段大小在50kb左右。用戶可根據(jù)需要選用不同的試劑盒來進(jìn)行不同樣品的抽提。一、基因組D
2010
01-04

TNFα免疫組化染色試劑盒
系列SABC試劑盒使用說明書TNFα免疫組化染色試劑盒產(chǎn)品編號(hào)：SA2041保存：4℃冷藏有效期：一年工作原理：TNFα是腫瘤壞死因子α抗原，該蛋白和誘導(dǎo)細(xì)胞的快速死亡有關(guān)?？贵w：兔抗TNFα抗原，親和純化抗體。適宜種屬：人、大鼠、小鼠組織。標(biāo)本處理：細(xì)胞涂片，冰凍和石蠟切片。染色模式：細(xì)胞漿。試劑盒內(nèi)容：1．5％BSA封閉液2ml或5ml，組織切片的封閉。2．兔抗TNFα抗原2ml或5ml。3．生物素化山羊抗兔IgG，2ml或5ml。4．SABC，2ml或5ml。鏈霉親和素-生物素-過氧化物酶
2010
01-04

活性氧檢測試劑盒
活性氧檢測試劑盒一．產(chǎn)品簡介：活性氧檢測試劑盒（Reactiveoxygenspeciesassaykit）是一種利用熒光探針DCFH-DA進(jìn)行活性氧檢測的試劑盒。DCFH-DA本身沒有熒光，可以自由穿過細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后，可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細(xì)胞膜，從而使探針很容易被裝載到細(xì)胞內(nèi)。細(xì)胞內(nèi)的活性氧可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF。檢測DCF的熒光就可以知道細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平。本試劑盒提供了活性氧陽性對照試劑Rosup以便于活性氧的檢測。Rosup是一
2010
01-04

細(xì)胞凋亡熒光Hoechst 33342 /PI 雙染試劑盒
細(xì)胞凋亡熒光Hoechst33342/PI雙染試劑盒一、原理熒光染料Hoechst33342能少許進(jìn)入正常細(xì)胞膜，使其染上低藍(lán)色，而凋亡細(xì)胞的膜通透性增強(qiáng)，因此進(jìn)入凋亡細(xì)胞中的Hoechst33342比正常細(xì)胞的多，熒光強(qiáng)度要比正常細(xì)胞中要高，此外，凋亡細(xì)胞的染色體DNA的結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變從而使該染料能更有效地與DNA結(jié)合，并且凋亡細(xì)胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到損傷不能有效地將Hoechst33342排出到細(xì)胞外使之在細(xì)胞內(nèi)積累增加等都使凋亡細(xì)胞的藍(lán)色熒光增強(qiáng)。而PI染料是不能進(jìn)入細(xì)胞膜完整的正常
2009
12-31

IgM捕捉ELISA法
IgM捕捉ELISA法（MacELISA）檢測出血熱IgM抗體本試劑盒系采用抗人μ鏈捕獲人血清IgM抗體，加辣根過氧化物酶－病毒抗原標(biāo)記物，用以檢測出血熱特異性IgM抗體。具有較高的敏感性、特異性和重復(fù)性。特別適用于出血熱的早期特異性診斷及其它實(shí)驗(yàn)性研究。本試劑盒為96人份/包裝。試驗(yàn)材料：（1）抗人IgM抗體（μ鏈）：用pH9.5的包被液包被酶標(biāo)板（2）凍干陽性血清/凍干陰性血清1支，0.2ml/支，工作濃度為1：10；（3）凍干辣根過氧化物酶－病毒抗原標(biāo)記物1支，0.5ml/支，工作濃度為1
2009
12-30

熒光定量PCR檢測腺病毒試劑盒
熒光定量PCR檢測腺病毒試劑盒機(jī)型:ABI7000、Lightcycler等探針：Taqman規(guī)格：50人份/盒概述：腺病毒（Adenovirus）是一群分布十分廣泛的DNA病毒。能引起人類呼吸道、胃腸道、泌尿系及眼的疾病。少數(shù)對動(dòng)物有致癌作用。腺病毒顆粒直徑60～90nm，沒有囊膜，20面體立體對稱，衣殼由252個(gè)克微粒組成，其中240個(gè)殼微粒是六鄰體（Hexon），具有組特異性α抗原。位于20面體頂端的12個(gè)克微粒是五鄰體（Penton）。核酸為以股線狀DNA，分子量20～30×106道爾頓
2009
12-30

超氧化物檢測試劑盒
超氧化物檢測試劑盒規(guī)格：100次產(chǎn)品簡介：?超氧化物檢測試劑盒（SuperoxideAssayKit）是一種用于超氧化物快速高靈敏度檢測的試劑盒。?本試劑盒利用超氧化物可以還原WST-1產(chǎn)生可溶性有色物質(zhì)為基礎(chǔ)來檢測超氧化物。本試劑盒的檢測試劑中添加了Catalase（觸酶）等，可以清除過氧化氫等過氧化物對WST-1顯色的干擾，使測定結(jié)果更加準(zhǔn)確。并且本試劑盒還提供SOD（超氧化物歧化酶），可以驗(yàn)證本試劑盒測定出的結(jié)果是否為超氧化物，以排除檢測體系中所用的一些試劑可能產(chǎn)生的干擾。對于本試劑盒，加
2009
12-23

人甲肝病毒抗體IgG ELISA 檢測試劑盒
人甲肝病毒抗體IgG（HAV-IgG）ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿試驗(yàn)原理：HAV-IgG試劑盒是間接法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知HAV-IgG濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將HAV-IgG和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中HAV-IgG的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）9
2009
12-23

人腮腺炎抗體IgG ELISA 檢測試劑盒
人（Human）腮腺炎抗體IgG（Mumps-IgG）ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿試驗(yàn)原理：Mumps-IgG試劑盒是間接法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知Mumps-IgG濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將Mumps-IgG和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Mumps-IgG的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其
2009
12-23

人CTGF定量EIA試劑盒使用說明
人CTGF定量EIA試劑盒使用說明原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-EIASA法。用抗人CTGF單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的CTGF與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人CTGF，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入酶底物TMB，出現(xiàn)藍(lán)色，加終止液硫酸，顏色變黃，在450nm處測OD值，CTGF濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中的CTGF濃度。試劑盒組成1．96孔微孔板：一塊，已包被抗人CTGF單抗。2．樣品稀釋液：一瓶3．*抗體工
2009
11-30

ELISA KIT組成及試劑配制
ELISAKIT組成及試劑配制1.酶聯(lián)板：一塊（96孔）2.標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為1,600pg/ml，將其稀釋為400pg/ml后，再做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別稀釋成400pg/ml，200pg/ml，100pg/ml，50pg/ml，25pg/ml，12.5pg/ml，6.25pg/ml，樣品稀釋液直接作標(biāo)準(zhǔn)濃度0pg/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制200pg/m
2009
11-30

大鼠β2 微球蛋白ELISA KIT說明書
大鼠（rat）β2微球蛋白本試劑僅供研究使用標(biāo)本：尿液一、試劑組成1.精密度微孔板96孔2-8℃干燥保存；2.酶標(biāo)偶合液1瓶6.0毫升2-8℃冷藏保存；3.生物素標(biāo)記液1瓶1.0毫升2-8℃冷藏保存；4.標(biāo)準(zhǔn)品6瓶各1.0毫升2-8℃冷藏保存；5.呈色劑A1瓶6.0毫升2-8℃避光冷藏保存；6.呈色劑B1瓶6.0毫升2-8℃避光冷藏保存；7.終止液1瓶6.0毫升18-25℃常溫保存；8.濃縮洗滌液1瓶50.0毫升2-8℃冷藏保存；9.英文說明書、中文說明書；二、注意事項(xiàng)1.此試劑為體外檢測試劑，
2009
11-30

人脂聯(lián)素（ADP）ELISA Kit使用說明書
人（human）脂聯(lián)素本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿一、試劑組成1.精密度微孔板96孔2-8℃干燥保存；2.酶標(biāo)偶合液1瓶6.0毫升2-8℃冷藏保存；3.標(biāo)準(zhǔn)品6瓶各1.0毫升2-8℃冷藏保存；4.呈色劑A1瓶6.0毫升2-8℃避光冷藏保存；5.呈色劑B1瓶6.0毫升2-8℃避光冷藏保存；6.終止液1瓶6.0毫升18-25℃常溫保存；7.濃縮洗滌液1瓶50.0毫升2-8℃冷藏保存；8.英文說明書、中文說明書；二、注意事項(xiàng)1.此試劑為體外檢測試劑，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號(hào)的試劑

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