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上海研生實業(yè)有限公司
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蛋白質(zhì)生理功能2011/04/18
蛋白質(zhì)生理功能1、構(gòu)造人的身體：蛋白質(zhì)是一切生命的物質(zhì)基礎(chǔ)，是肌體細(xì)胞的重要組成部分，是人體組織更新和修補的主要原料。人體的每個組織：毛發(fā)、皮膚、肌肉、骨骼、內(nèi)臟、大腦、血液、神經(jīng)、內(nèi)分泌等都是由蛋白質(zhì)組成，所以說飲食造就人本身。蛋白質(zhì)對人的生長發(fā)育非常重要。比如大腦發(fā)育的特點是一次性完成細(xì)胞增殖，人的大腦細(xì)胞的增長有二個高峰期。*個是胎兒三個月的時候；第二個是出生后到一歲，特別是0---6個月的嬰兒是大腦細(xì)胞猛烈增長的時期。到一歲大腦細(xì)胞增殖基本完成，其數(shù)量已達(dá)成人的9/10。所以0到1歲兒童
關(guān)于HPLC的常見問題及解答2011/04/14
一、問：用HPLC進(jìn)行分析時保留時間有時發(fā)生漂移，有時發(fā)生快速變化，原因何在？如何解決？答：關(guān)于漂移問題：1.溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定2.流動相發(fā)生變化，解決辦法是防止流動相發(fā)生蒸發(fā)、反應(yīng)等3.柱子未平衡好，需對柱子進(jìn)行更長時間的平衡關(guān)于快速變化問題1.流速發(fā)生變化，解決辦法是重新設(shè)定流速，使之保持穩(wěn)定2.泵中有氣泡，可通過排氣等操作將氣泡趕出。3.流動相不合適，解決辦法為改換流動相或使流動相在控制室內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)混合二、問：液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因是什么？答：
細(xì)胞因子使用說明2011/04/13
細(xì)胞因子（Cytokine）是由免疫細(xì)胞或非免疫細(xì)胞合成和分泌的小分子多肽。細(xì)胞因子由活化的淋巴細(xì)胞（特別是Th1、Th2細(xì)胞）、活化的單核巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等產(chǎn)生，但量極少，所以科研用的細(xì)胞因子絕大多數(shù)都是通過基因工程技術(shù)在工程細(xì)胞重組細(xì)胞因子，而且為了保持其穩(wěn)定性和方便運輸，往往制作成凍干粉狀。國產(chǎn)的重組細(xì)胞因子的說明書一般寫到以下幾點：（1）因為它的作用原理，使用時注意種屬特異性。（2）溶解：建議在啟用前要把裝有凍干粉的小瓶簡單離心一下，使粉末全部集中在小瓶底部，
ELISA標(biāo)準(zhǔn)操作及常見問題分析2011/04/13
一.Elisa標(biāo)準(zhǔn)操作要點的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證Elisa檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。Elisa中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的本公司要求使用的純化水電導(dǎo)率小于1.5μs/cm。1.標(biāo)本的采取和保存大部分Elisa檢測均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會
酶標(biāo)板的具體分類2011/04/12
根據(jù)不同的分類標(biāo)準(zhǔn)，酶標(biāo)板有著不同的分類。一、根據(jù)孔數(shù)，可分為96孔、48孔，其中96孔是現(xiàn)在zui常用的，因為酶標(biāo)板就是配合酶標(biāo)儀用，現(xiàn)在的酶標(biāo)儀做出來的zui多的是96孔，所以客戶在購買時也是要96孔板，也為了適應(yīng)市場基本上做出來的就是96孔的。二、根據(jù)其底部的不同，又分為平底的，U型底、V型底。平底的折射率低，適于在酶標(biāo)儀檢測；U型底的酶標(biāo)板折射率較高，方便加樣、吸樣、混勻等操作，可以不用放在酶標(biāo)儀上，直接通過目測觀察顏色變化情況，從而判定有無相應(yīng)的免疫反應(yīng)。V底的酶標(biāo)板可以的吸取樣品。三
生物培養(yǎng)基2011/04/11
絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液（BSS）基礎(chǔ)上，添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養(yǎng)物質(zhì)。zui廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是Eearle`sMEM的混合物，其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`sF12也包括非必須氨基酸，維生素的范圍亦很廣，另外常規(guī)含有無機(jī)鹽和代謝添加劑MEM/F12這兩種培養(yǎng)基各取1/2，形成神經(jīng)生物學(xué)zui通用的培養(yǎng)基。Dulbecco`s改良培養(yǎng)基——DMEM，現(xiàn)應(yīng)用于快速生長的細(xì)胞，同MEM含有相同的營養(yǎng)成分，但濃度高出2~4倍。選擇某種培養(yǎng)基，應(yīng)仔細(xì)了解
液相色譜常見問題及處理辦法2011/04/02
問:用HPLC進(jìn)行分析時保留時間有時發(fā)生漂移，有時發(fā)生快速變化，原因何在？如何解決？答:關(guān)于漂移問題：1．溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定2．流動相發(fā)生變化，解決辦法是防止流動相發(fā)生蒸發(fā)、反應(yīng)等3．柱子未平衡好，需對柱子進(jìn)行更長時間的平衡關(guān)于快速變化問題1．流速發(fā)生變化，解決辦法是重新設(shè)定流速，使之保持穩(wěn)定2．泵中有氣泡，可通過排氣等操作將氣泡趕出。3．流動相不合適，解決辦法為改換流動相或使流動相在控制室內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)混合問:色質(zhì)聯(lián)用中毛細(xì)柱的選擇應(yīng)注意什么問題？答:1．柱效要高2
生物顯微鏡常見故障的修理2011/03/31
驗教學(xué)中zui常用的儀器，頻繁使用之后會出現(xiàn)一些故障，使顯微鏡無法正常使用。由于顯微鏡是一種精密貴重儀器，不可能隨時添置和更新。因此，及時排除故障，使它經(jīng)常處于完好的工作狀態(tài)就顯得十分重要了。筆者在幾年的生物實驗教學(xué)中，總結(jié)了顯微鏡一些常見故障的修理辦法，供大家參考。一、粗調(diào)失靈故障現(xiàn)象是當(dāng)轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋時，鏡筒不能隨之升降。顯微鏡鏡簡的升降是靠齒輪帶動因條來實現(xiàn)的，而齒輪固定在粗調(diào)旋鈕的轉(zhuǎn)軸上，齒條固定在鏡筒上。當(dāng)轉(zhuǎn)動粗調(diào)旋鈕時，齒輪帶動條使鏡筒升降。如果鏡筒不能隨之升降，說明齒輪與齒條沒有吻
土壤中全氮的測試方法2011/03/25
土壤中全氮的測試方法一、測試過程：1、待測液的制備：稱取土樣1.00克放入凱氏瓶中，加水1ml濕潤，放入加速劑2克，然后放入5ml濃硫酸，放于電爐上溫火加熱15分鐘后，升高爐溫保持溶液微沸，再繼續(xù)消煮不低于1至1個半小時。消煮完后取下冷卻，將消煮好的溶液洗入100ml容量瓶中并定容，將定溶后的溶液過濾。吸取5ml過濾液放入50ml容量瓶中定容，此液為待測液。2、空白液的制備：不加樣品其它與待測液同樣制備。3、標(biāo)準(zhǔn)工作液的制備：吸取100ppm銨態(tài)氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液2毫升、3毫升、4毫升，分別放入50毫
超濾膜在水質(zhì)凈化過程中的應(yīng)用2011/03/23
超濾膜在水質(zhì)凈化過程中的應(yīng)用超濾是介于微濾和納濾之間的一種膜過程，平均孔徑在3-100nm之間。超濾膜技術(shù)是一種能夠?qū)⑷芤哼M(jìn)行凈化、分離、濃縮的膜分離技術(shù)。其截留機(jī)理主要是篩分作用，但有時膜孔徑既比溶劑分子大，又比溶質(zhì)分子大，故膜表面的化學(xué)特性（膜的靜電作用）也起著截留作用。以膜兩側(cè)的壓力差為驅(qū)動力，以超濾膜為過濾介質(zhì)，在一定的壓力下，當(dāng)水流過膜表面時，只允許水及低分子量溶質(zhì)通過，從而達(dá)到溶液的凈化、分離、與濃縮的目的。飲用水處理20世紀(jì)末，由于水環(huán)境污染加劇，以及水質(zhì)檢測技術(shù)的發(fā)展，出現(xiàn)了許多
白細(xì)胞介素的概念以及用途和發(fā)現(xiàn)過程2011/03/21
白細(xì)胞介素的概念以及用途和發(fā)現(xiàn)過程白細(xì)胞介素是由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作用于多種細(xì)胞的一類細(xì)胞因子。由于zui初是由白細(xì)胞產(chǎn)生又在白細(xì)胞間發(fā)揮作用，所以由此得名，現(xiàn)仍一直沿用。白細(xì)胞介素interleukin縮寫為IL。關(guān)于免疫反應(yīng)的表達(dá)和調(diào)節(jié)，有來源于淋巴細(xì)胞或巨噬細(xì)胞等許多因子參與。來源于淋巴細(xì)胞的有淋巴細(xì)胞活素，來源于巨噬細(xì)胞的總稱為monokine，其中的各個因子的生物活性各有不同（例如巨噬細(xì)胞活化，促進(jìn)T細(xì)胞繁殖等），因子自身的物理化學(xué)性質(zhì)多不清楚。1979年這方面的研究團(tuán)體提出了在淋巴細(xì)胞活
化學(xué)試劑的取用2011/03/21
化學(xué)試劑的取用1.固態(tài)試劑的取用固態(tài)試劑一般都用藥匙取用。藥匙的兩端為大小兩個匙，分別取用大量固體和少量固體。試劑一旦取出，就不能再倒回瓶內(nèi)，可將多余的試劑放入容器。2.液態(tài)試劑的取用液態(tài)試劑一般用量筒量取或用滴管吸取。下面分別介紹它們的操作方法。.量筒量取量筒有5，10，50，100和1000mL等規(guī)格。取液時，先取下瓶塞并將它放在桌上。一手拿量筒，一手拿試劑瓶（注意別讓瓶上的標(biāo)簽朝下），然后倒出所需量的試劑。zui后斜瓶口在量筒上靠一下，再使試劑瓶豎直，以免留在瓶口的液滴流到瓶的外壁。.滴管
培養(yǎng)箱二氧化碳無污染控制技術(shù)2011/03/17
培養(yǎng)箱二氧化碳無污染控制技術(shù)二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境如穩(wěn)定的溫度（37°C）、穩(wěn)定的CO2水平（5%）、恒定的酸堿度（pH值：7.2-7.4）、較高的相對濕度（95%），來對細(xì)胞/組織進(jìn)行體外培養(yǎng)的一種裝置。廣泛應(yīng)用于細(xì)胞、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng)，常見于細(xì)胞動力學(xué)研究、哺乳動物細(xì)胞分泌物的收集、各種物理、化學(xué)因素的致癌或毒理效應(yīng)、抗原的研究和、培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞抗體、體外授精（IVF）、干細(xì)胞、組織工程、藥物篩選等研究領(lǐng)域。在生物活體內(nèi)
克隆抗體技術(shù)2011/03/15
克隆抗體技術(shù)利用雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體（McAb）基本原理是根據(jù)三個原則：（1）淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的克隆選擇學(xué)說；（2）雜交瘤細(xì)胞保持雙方親代細(xì)胞特性化；（3）然后大量培養(yǎng)增殖，制備所需的McAb。克隆抗體的產(chǎn)生1.動物體內(nèi)誘生方法：目前McAb治療用或體外診斷用的多數(shù)尚采用這一方法制備。先在小鼠腹腔注射液體石蠟或福氏不*佐劑，一周后將雜交瘤細(xì)胞懸液注射腹腔，1～2周后，無菌抽取腹水，離心取上清液即可。2.體外培養(yǎng)法：這是實驗室制備的方法。將雜交瘤細(xì)胞置培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，待培養(yǎng)液顏色改變或細(xì)胞過多開
關(guān)于真菌的培養(yǎng)技術(shù)2011/03/15
關(guān)于真菌的培養(yǎng)技術(shù)玻片培養(yǎng)又稱小培養(yǎng)，小培養(yǎng)法可以隨時觀察真菌的生長形態(tài)（如大分生孢子、小分生孢子及孢子柄等），還可以隨時觀察其生長發(fā)育的全部情況，有利于菌種的鑒定。1、鋼環(huán)法（1）材料：白假絲酵母菌、沙保弱培養(yǎng)基、無菌玻片、蓋玻片、鋼環(huán)（帶有缺口）、石蠟。（2）方法①用無菌鑷子取無菌小培養(yǎng)鋼環(huán)，環(huán)的兩面分別蘸取熔化的固體石蠟，平置于無菌載玻片上，另取一無菌蓋玻片，在酒精燈火焰上加熱后覆蓋于鋼環(huán)上，待冷后，小培養(yǎng)鋼圈即被固定于載玻片與蓋玻片之間。②用毛細(xì)滴管吸取融化的培養(yǎng)基，從鋼環(huán)上端孔注入，注
血栓與止血實驗檢查的質(zhì)量控制2011/03/12
血栓與止血實驗檢查的質(zhì)量控制血凝儀的使用，為臨床提供了血栓與止血的眾多參數(shù)，促進(jìn)了血栓與止血實驗診斷水平的提高。為保證給臨床診斷、治療、監(jiān)測病情及預(yù)后評估等提供zui為可靠、zui為準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)?，F(xiàn)就標(biāo)本采集、制備、運輸、抗凝劑的選擇等注意事項即分析前質(zhì)量控制做一綜述。1標(biāo)本的采集1．1防止組織損傷（外源因子進(jìn)入）采血應(yīng)“一針見血”以防止組織損傷和外源性凝血因子進(jìn)入針管［1］。用注射器取血時，如果抽血過慢或不太順利，可能激活凝血系統(tǒng)，實驗結(jié)果將會顯示凝血因子活性增高、血小板數(shù)假性降低等異常結(jié)果，采
抗卵巢抗體透明帶（Zona pellucida，ZP） 抗體檢測2011/03/10
抗卵巢抗體透明帶（Zonapellucida，ZP）抗體檢測透明帶（Zonapellucida，ZP）是圍繞在卵細(xì)胞周圍的一圈嗜酸性、明膠樣結(jié)構(gòu)。ZP有很強(qiáng)的免疫原性，能誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生全身與局部的細(xì)胞與體液免疫，產(chǎn)生抗透明帶抗體（anti-zonapellucidaantibody，AZP）。AZP與女性不孕癥有關(guān)。檢測AZP的方法有免疫沉淀反應(yīng)，間接免疫熒光法，間接血凝，膠乳凝集試驗，RIA及ELISA法等。無論何種檢測方法，均需透明帶抗原。由于豬和人卵透明帶有共同抗原，故可用豬卵透明帶抗原作試
干細(xì)胞存活的情況2011/03/09
干細(xì)胞存活的情況患者在接收骨髓移植時，會接收一批新的造血干細(xì)胞。由于放療或化療治療癌癥，引起患者體內(nèi)紅細(xì)胞或白細(xì)胞數(shù)量偏低，貧血癥患者將需要"新鮮"的干細(xì)胞。然而，移植的干細(xì)胞由于存活周期不長，或是干細(xì)胞增殖太旺盛以至于患上白血病，那么骨髓移植可能就不會成功。為了確定骨髓（干細(xì)胞）移植持續(xù)的時間，醫(yī)學(xué)院研究所的研究者開發(fā)了一個數(shù)學(xué)模型，預(yù)測干細(xì)胞的生存周期，并用小鼠模型做進(jìn)一步測試長期以來一直認(rèn)為干細(xì)胞是不會死亡的，他們持續(xù)自我更新，從而產(chǎn)生更多的干細(xì)胞。但是現(xiàn)在我們發(fā)現(xiàn)每個干細(xì)胞重組以進(jìn)行自我
SNPs檢測方法2011/03/08
SNPs檢測方法定義單核苷酸多態(tài)性（singlenucleotideolymorphisms,SNPs），主要是指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性。SNPs的研究意義遺傳標(biāo)記具有已知性、可遺傳性、可檢測性，用于疾病基因的定位、克隆和鑒定。基因多態(tài)與疾病相關(guān)性研究SNPs本身對機(jī)體的影響，尤其是疾病的易感性、個性化醫(yī)療。SNPs檢測方法的分類1、測序方法：常規(guī)測序，Pyrosequencing（焦磷酸測序），微測序（SNaPshot）2、基于雜交的方法：Taqman探針法，
蛋白質(zhì)新技術(shù)2011/03/07
蛋白質(zhì)新技術(shù)蛋白質(zhì)這一新技術(shù)為科研人員深入了解活細(xì)胞中蛋白質(zhì)組半衰期動力學(xué)開辟了新途徑。清除不必要或有害的蛋白質(zhì)是細(xì)胞進(jìn)行自身調(diào)控的重要途徑之一。在生物體中主要通過兩種機(jī)制來實現(xiàn)：一種是通過蛋白酶體降解蛋白質(zhì)，而另一種則是以細(xì)胞生長的方式對細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)進(jìn)行稀釋。快速分裂的細(xì)胞例如細(xì)菌主要是依賴“稀釋”的方式，而終末分化的哺乳動物細(xì)胞則主要是通過蛋白質(zhì)降解的途徑?！坝捎诘鞍踪|(zhì)的清除途徑通常取決于細(xì)胞的類型，科學(xué)家們常常忽略了降解和稀釋之間存在的平衡關(guān)系脈沖追蹤術(shù)和蛋白質(zhì)合成抑制法來檢測蛋白質(zhì)的降
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