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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年
小鼠β-半乳糖苷酶(β-gal) ELISA 實(shí)驗(yàn)說明2024/11/21
檢測(cè)范圍:3IU/L-150IU/L使用目的本試劑盒用于測(cè)定小鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中β-半乳糖苷酶(β-gal)活性。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠β-半乳糖苷酶(β-gal)水平。用純化的小鼠β-半乳糖苷酶(β-gal)體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入β-半乳糖苷酶(β-gal),再與HRP標(biāo)記的β-半乳糖苷酶(β-gal)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)
蛋白質(zhì)純化的相關(guān)介紹2024/10/23
一、蛋白質(zhì)純化的定義蛋白質(zhì)純化是指利用蛋白質(zhì)之間的相似性和差異性,通過一系列物理化學(xué)手段,從復(fù)雜的生物樣品中分離出目標(biāo)蛋白質(zhì)的過程。這一過程要求去除大部分雜質(zhì),同時(shí)保持蛋白質(zhì)的天然活性和結(jié)構(gòu)完整性。二、蛋白質(zhì)純化的方法蛋白質(zhì)純化方法多種多樣,通常根據(jù)蛋白質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)(如分子量、電荷、疏水性和特異性結(jié)合能力等)來選擇合適的方法。以下是一些常用的蛋白質(zhì)純化方法:?鹽析法?:通過在蛋白質(zhì)溶液中加入高濃度的鹽(如硫酸銨),使蛋白質(zhì)因溶解度降低而沉淀析出。這種方法簡(jiǎn)單有效,但需注意鹽濃度和pH值的控制
人E3泛素連接酶(DTX3L) ELISA實(shí)驗(yàn)說明2024/10/14
檢測(cè)范圍:4pg/ml-220pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中E3泛素連接酶(DTX3L)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人E3泛素連接酶(DTX3L)水平。用純化的人E3泛素連接酶(DTX3L)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入E3泛素連接酶(DTX3L),再與HRP標(biāo)記的E3泛素連接酶(DTX3L)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過充分洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)
常見的支原體檢測(cè)方法2024/10/10
支原體是一類無細(xì)胞壁、高度多形性的最小原核細(xì)胞型微生物,其大小通常在0.1-0.3微米之間。由于它們能形成絲狀與分支形狀,因此得名支原體。支原體廣泛存在于人和動(dòng)物體內(nèi),大多數(shù)種類并不致病,但在特定條件下,如機(jī)體免疫力下降時(shí),部分支原體種類可能引發(fā)疾病。對(duì)人致病的支原體主要包括肺炎支原體、解脲支原體、人型支原體和生殖器支原體等,它們分別能引起呼吸道和泌尿生殖道的感染。常見的支原體檢測(cè)方法1.核酸檢測(cè)法核酸檢測(cè)法是目前支原體檢測(cè)中最敏感、最準(zhǔn)確的方法之一。該方法利用PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)擴(kuò)增支
流式細(xì)胞術(shù)在生物實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用2024/09/25
流式細(xì)胞術(shù)(FlowCytometry,F(xiàn)CM)作為一種先進(jìn)的細(xì)胞分析技術(shù),自其誕生以來,便在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域發(fā)揮著不可替代的作用。該技術(shù)通過高速、多參數(shù)地分析單個(gè)細(xì)胞或微粒的熒光信號(hào)和散射光信號(hào),為研究者提供了詳盡的細(xì)胞生物學(xué)信息,今天恒遠(yuǎn)生物帶你認(rèn)識(shí)細(xì)胞術(shù)在生物實(shí)驗(yàn)中的具體應(yīng)用。一、流式細(xì)胞術(shù)的基本原理流式細(xì)胞術(shù)的核心在于流式細(xì)胞儀的使用。該儀器利用鞘液包繞的樣品流通過激光束,激發(fā)細(xì)胞或微粒上的熒光染料,產(chǎn)生熒光信號(hào)和散射光信號(hào)。這些信號(hào)被光電倍增管接收并轉(zhuǎn)換為電信號(hào),隨后通過計(jì)算機(jī)系統(tǒng)進(jìn)行
?微生物內(nèi)毒素檢測(cè)方法及注意事項(xiàng)2024/09/19
微生物內(nèi)毒素,主要存在于革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁中,是一種由脂多糖(LPS)構(gòu)成的毒性成分。當(dāng)細(xì)菌死亡裂解后,內(nèi)毒素被釋放到環(huán)境中,可對(duì)人體健康產(chǎn)生嚴(yán)重影響,如引起發(fā)熱、微循環(huán)障礙、內(nèi)毒素血癥甚至休克等。因此,對(duì)微生物內(nèi)毒素的準(zhǔn)確檢測(cè)在醫(yī)藥、食品、生物制品等領(lǐng)域至關(guān)重要。恒遠(yuǎn)生物為你介紹?微生物內(nèi)毒素檢測(cè)方法及注意事項(xiàng)。一、微生物內(nèi)毒素檢測(cè)方法1.鱟試驗(yàn)法(LAL試驗(yàn))鱟試驗(yàn)法是經(jīng)典的內(nèi)毒素檢測(cè)方法之一,利用鱟血細(xì)胞(變形細(xì)胞)對(duì)內(nèi)毒素的高度敏感性進(jìn)行檢測(cè)。通過將待測(cè)樣品與鱟試劑混合,觀察鱟血細(xì)胞
?ELISA試劑盒在海藻糖檢測(cè)的應(yīng)用2024/09/10
近年來,隨著檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)因其高靈敏度和特異性,在海藻糖檢測(cè)中得到了廣泛應(yīng)用。今天恒遠(yuǎn)生物為你介紹ELISA試劑盒在海藻糖檢測(cè)中的應(yīng)用。?在海藻糖檢測(cè)中,ELISA試劑盒通常采用雙抗體夾心法。具體步驟如下:??準(zhǔn)備工作?:將ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出,在室溫下平衡20-30分鐘。準(zhǔn)備所需的試劑和器材,如酶標(biāo)儀、高精度加樣器、洗板機(jī)等。?標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:按照說明書要求,將原倍標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行梯度稀釋,以制備不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。?加樣?:在酶標(biāo)包被板上設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)
海藻糖在生物制品中的應(yīng)用及檢測(cè)方法2024/09/04
海藻糖又稱為漏蘆糖、蕈糖,是由兩個(gè)葡萄糖分子組成的一個(gè)非還原性雙糖,分子式為C12H22O11。海藻糖結(jié)構(gòu)式為α-D-吡喃葡糖基~α-D-吡喃葡糖苷,經(jīng)常以二水化合物存在,分子式為C12H22O11·2H2O。海藻糖結(jié)構(gòu)式海藻糖是一種典型應(yīng)激代謝物,能夠在高溫、高寒、高滲透壓及干燥失水等惡劣環(huán)境條件下在細(xì)胞表面形成特殊的保護(hù)膜,有效地保護(hù)生物分子結(jié)構(gòu)不被破壞,從而維持生命體的生命過程和生物特征。海藻糖在生物制品中的應(yīng)用1.凍干保護(hù)劑在生物制品的凍干過程中,海藻糖作為保護(hù)劑被廣泛應(yīng)用。凍干保護(hù)機(jī)制
ELISA常見問題與解決方法2024/08/30
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定)是一種常用的生物化學(xué)技術(shù),用于檢測(cè)樣品中的特定抗原或抗體。然而,在實(shí)際操作過程中,科研人員常常會(huì)遇到一些問題,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,以下是一些可能出現(xiàn)的問題及其解決方法:一、陰性對(duì)照出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果:可能原因:試劑污染、操作不當(dāng)、洗板不透徹。解決方法:更換新試劑,小心操作避免污染,確保洗板透徹。二、酶標(biāo)板整體背景高:可能原因:抗體非特異性結(jié)合、底物溶液污染、孵育過程未避光。解決方法:使用封閉液封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn),適當(dāng)稀釋底物溶液,確保孵育過程避光。三、復(fù)孔之
噬菌體試驗(yàn)的基本方法2024/08/12
(一)噬菌體的分離和純化1.噬菌體的分離每份未處理的污水樣品取100mL,混合后,經(jīng)36±1℃培養(yǎng)14~24h,通過孔徑為0.45mm的薄膜濾器,檢查濾液中是否有噬菌體的存在。用斑點(diǎn)試驗(yàn)法檢查噬菌體。2.單斑純化根據(jù)斑點(diǎn)試驗(yàn)法的結(jié)果,估計(jì)濾液內(nèi)噬菌體的數(shù)量。將濾液按百倍稀釋法作兩次連續(xù)稀釋。即吸取0.02mL,稀釋在2mL肉湯內(nèi),使成10-2;再吸取此稀釋液0.02mL,稀釋在2mL肉湯內(nèi),使成10-4。(二)PFU和RTDPFU和RTD是噬菌體效價(jià)的計(jì)量單位。PFU是噬斑形成單位,表示有感染能
植物羥基肉桂酰基轉(zhuǎn)移酶(HCT)ELISA實(shí)驗(yàn)說明2024/08/05
檢測(cè)范圍:5U/L-180U/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定植物組織,細(xì)胞及其它相關(guān)樣本中羥基肉桂?;D(zhuǎn)移酶(HCT)活性。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中植物羥基肉桂?;D(zhuǎn)移酶(HCT)水平。用純化的植物羥基肉桂?;D(zhuǎn)移酶(HCT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入植物羥基肉桂?;D(zhuǎn)移酶(HCT),再與HRP標(biāo)記的羥基肉桂?;D(zhuǎn)移酶(HCT)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的
牛乳鐵蛋白(LTF)ELISA實(shí)驗(yàn)說明2024/07/26
檢測(cè)范圍:2ng/ml-100ng/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定牛血清、血漿及相關(guān)液體樣本中乳鐵蛋白(LTF)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中牛乳鐵蛋白(LTF)水平。用純化的牛乳鐵蛋白(LTF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入乳鐵蛋白(LTF),再與HRP標(biāo)記的乳鐵蛋白(LTF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乳鐵蛋白(L
常見細(xì)菌染色方法2024/07/17
常見的染色方法包括簡(jiǎn)單染色、負(fù)染色、革蘭氏染色、芽孢染色法、鞭毛染色、莢膜染色。制備細(xì)菌染色片一般要經(jīng)過涂片、固定、染色、水洗、干燥等步驟,然后用顯微鏡甚至油鏡觀察。1.簡(jiǎn)單染色:不同細(xì)菌或由于觀察者所側(cè)重觀察的內(nèi)容不同,所使用的染料也有差異,但簡(jiǎn)單染色的方法是一樣的。先按照上述的制片方法制片,制成需要觀察的玻片后,使用相對(duì)應(yīng)的染料滴加到玻片上的菌膜區(qū)域,以覆蓋菌膜為準(zhǔn)。按照不同染料的要求,結(jié)合所觀察的內(nèi)容確定染色時(shí)間,染色時(shí)間到達(dá)時(shí)進(jìn)行水洗,干燥等步驟。最后得到的玻片加蓋蓋玻片即可進(jìn)行鏡檢。如
大鼠降鈣素原(PCT)ELISA實(shí)驗(yàn)說明2024/07/12
檢測(cè)范圍:10ng/L-450ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中降鈣素原(PCT)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠降鈣素原(PCT)水平。用純化的大鼠降鈣素原(PCT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入降鈣素原(PCT),再與HRP標(biāo)記的降鈣素原(PCT)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的降鈣素原
凍融血清沉淀物是否會(huì)影響血清品質(zhì)2024/07/04
做細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)經(jīng)常會(huì)用到血清,血清用不完我們會(huì)凍起來下次使用。但相信大家也會(huì)發(fā)現(xiàn)在融化血清過程中會(huì)出現(xiàn)白色的沉淀物質(zhì),就會(huì)疑惑這種情況是否是血清出現(xiàn)問題。首先呢我們要搞清楚血清中絮狀沉淀物是什么,沉淀物包含纖維蛋白和脂蛋白,這是正常特性,不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1~2分鐘)或簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以,使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加
人腎素活性(PRA)ELISA實(shí)驗(yàn)說明2024/06/25
檢測(cè)范圍:1IU/L-50IU/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清及相關(guān)液體樣本中腎素活性(PRA)濃度。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人腎素活性(PRA)水平。用純化的人腎素活性(PRA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入腎素活性(PRA),再與HRP標(biāo)記的腎素活性(PRA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腎素活性(PRA)呈正相
恒遠(yuǎn)生物|酶的提取、分離、活力檢測(cè)與純化2024/06/19
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康拿甘侵参矬w內(nèi)具有催化作用的蛋白質(zhì),植物體內(nèi)的生化反應(yīng)一般都在酶的作用下進(jìn)行,沒有酶的催化反應(yīng),植物生命也就停止了,因此對(duì)酶的研究是闡明生命現(xiàn)象本質(zhì)中十分重要的部分。研究酶先要將酶從組織中提取出來,加以分離、純化,不同的研究目的對(duì)酶制劑的純度要求也不同,有些工作只需粗的酶制劑即可,而有些工作則要求較純的酶制劑,根據(jù)不同情況區(qū)別對(duì)待。在酶的提取和純化過程中,自始至終都需要測(cè)定酶的活性,通過酶活性的測(cè)定以監(jiān)測(cè)酶的去向。二、實(shí)驗(yàn)原理(1)酶的提取1.酶存在于動(dòng)植物以及微生物的細(xì)胞的各個(gè)部位。
如何避免牛血清中的沉淀2024/06/13
細(xì)胞治療、生物藥的研發(fā)和生產(chǎn),都離不開細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),作為細(xì)胞的重要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖起著重要作用,直接影響著生物制品的質(zhì)量和安全性,今天小編就給大家聊一聊血清的幾點(diǎn)小知識(shí),幫助大家解決血清使用的一些困擾。1.血清絮狀物沉淀血清中的絮狀物由很多種原因造成,如最常見的是溫度的變化。沉淀的主要成分是纖維蛋白和脂蛋白,尤其在血清融化過程中容易凝集析出。2.絮狀物沉淀出現(xiàn)在血清中會(huì)影響血清本身的質(zhì)量嗎?血清中的絮狀物沉淀對(duì)血清的品質(zhì)并無影響,所以不用擔(dān)心,但要是血清用戶對(duì)血清中的絮狀物沉淀比較
恒遠(yuǎn)生物|雞免疫球蛋白M(IgM)ELISA實(shí)驗(yàn)說明2024/06/07
檢測(cè)范圍:150ng/ml-5000ng/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定雞血清、血漿及相關(guān)液體樣本中免疫球蛋白M(IgM)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中雞免疫球蛋白M(IgM)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入免疫球蛋白M(IgM),再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白M(IgM)呈正相關(guān)。用酶
鹽析法與抗體的分離純化2024/05/28
鹽析法原理蛋白質(zhì)的溶解度在必定范圍內(nèi)隨鹽的濃度而改變。在低鹽濃度下溶解度跟著鹽濃度而添加,當(dāng)鹽濃度到達(dá)必定水平常,其溶解度又以不一樣程度降低并先后分出。其原理是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)分子的極性基團(tuán)有著靜電引力,當(dāng)水中參加少數(shù)鹽類時(shí),鹽類離子與水分子對(duì)蛋白質(zhì)分子上極性基團(tuán)的影響,使蛋白質(zhì)在水中溶解度增大。但鹽濃度添加到必定程度時(shí),水的活度降低,蛋白質(zhì)外表的電荷被中和,水化膜損壞,致使蛋白質(zhì)分子互相集合而沉積。鹽析法即是依據(jù)不一樣蛋白質(zhì)在必定濃度的鹽溶液中溶解度不一樣而到達(dá)互相別離的辦法。鹽的挑選蛋白質(zhì)鹽析常用
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