国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

His-tag蛋白純化六邊形戰(zhàn)士---諾獎得主愛用好物2022/11/04

2022年諾貝爾化學(xué)獎授予CarolynR.Bertozzi,MortenMeldal和K.BarrySharpless，"以表彰點擊化學(xué)和生物正交化學(xué)的發(fā)展"。今天我們一起來認(rèn)領(lǐng)下諾獎得主的愛用周邊~his標(biāo)簽蛋白純化系列top榜。CarolynR.Bertozzi最早在1998年發(fā)表在《Chemistry&Biology》上的“IdentificationofanN-acetylglucosamine-6-0-sulfotransferaseactivityspecifictolymphoi

PI細(xì)胞周期可能有四種命運(yùn)2022/10/22

PI細(xì)胞周期指細(xì)胞一個世代所經(jīng)歷的時間。從一次細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束為一個周期。細(xì)胞周期反應(yīng)了細(xì)胞增殖速度。細(xì)胞周期是一個重要的檢測參數(shù)，研究細(xì)胞周期變化的影響對于腫瘤的發(fā)展及藥物研發(fā)有著重要的作用。例如，已知抑制有絲分裂的化合物大都用來減緩腫瘤細(xì)胞的生長。PI細(xì)胞周期檢測步驟：1.細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：收集細(xì)胞，用1ml預(yù)冷PBS洗1遍，輕輕彈擊離心管底以適當(dāng)分散細(xì)胞，避免細(xì)胞成團(tuán)。2.細(xì)胞固定：加入1ml預(yù)冷的70%乙醇中，輕輕吹打混勻，4度固定2小時或更長時間(固定12-24小時可能效果更

疼痛研究有困難？離子通道來救你！2022/10/21

疼痛是由背根神經(jīng)節(jié)(DRG)神經(jīng)元感知并傳遞到中樞神經(jīng)系統(tǒng)的，DRG在功能上可分為三個亞細(xì)胞區(qū)室。1.痛覺外周末梢感知到疼痛從而引起的刺激（機(jī)械感覺、熱感覺和痛覺）。2.傳導(dǎo)痛覺信號的軸突。3.突觸前末端，它將信號轉(zhuǎn)發(fā)到下一個神經(jīng)元并向上傳遞到大腦，在那里信號被解釋為疼痛(如下圖所示)。圖1.疼痛信號的傳播途徑疼痛的類型主要有兩種：神經(jīng)性（神經(jīng)）疼痛和痛覺性（組織）疼痛。神經(jīng)性疼痛是由神經(jīng)系統(tǒng)的原發(fā)病變或功能障礙引起的。根據(jù)病變或功能障礙發(fā)生的部位，可細(xì)分為外周神經(jīng)痛和中樞神經(jīng)痛。外周神經(jīng)痛可能

磷酸化抑制劑的使用可以對磷酸化狀態(tài)進(jìn)行有效保護(hù)2022/10/19

磷酸化抑制劑指直接作用ATP酶抑制磷酸化作用的試劑，如二環(huán)己基碳二亞胺(DCCD)、對氯汞基苯(PCMB)作用于CF1，寡霉素作用于CF0(CF0下標(biāo)的o就是表明其對寡霉素oligomycin敏感)。它們都抑制了ATP酶活性從而阻斷光合磷酸化。磷酸化抑制劑詳細(xì)介紹：(1)電子傳遞鏈傳遞過程是：P680→pheo→Q→PQ→Fe-S-Cytb6→Cytf→PC→P700。其中P700和P680分別為光系統(tǒng)Ⅰ和光系統(tǒng)Ⅱ的作用中心色素，pheo為去鎂葉綠素(2)電子傳遞抑制劑指抑制光合電子傳遞的試劑，

微孔板夾心雜交法工作原理？2022/10/14

ELISA，即酶聯(lián)免疫吸附實驗，其基本原理是將一定濃度的抗原或者抗體通過物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面，加入待檢標(biāo)本，通過酶標(biāo)物顯色的深淺間接反映被檢抗原或者抗體的存在與否或者量的多少。ELISA技術(shù)作為免疫標(biāo)記技術(shù)（包含免疫熒光技術(shù)，免疫放射技術(shù)，免疫酶技術(shù)和免疫膠體金技術(shù)）中的一種，已廣泛應(yīng)用于科研和臨床實驗中，具有快速，定性或者定量甚至定位的特點。在ELISA實驗方法中，比較常見的方法有雙抗體夾心法，競爭法，間接法，雙抗原夾心法，捕獲法，下面對此一一詳述。1.雙抗體夾心法雙抗體夾心

蛋白質(zhì)印跡法實驗指南：凝膠電泳分離蛋白2022/09/27

Westernbotting實驗中，樣品一旦準(zhǔn)備好，樣品蛋白質(zhì)通過PAGE（聚丙烯酰胺凝膠電泳）分離，這可以在天然或變性條件下進(jìn)行。蛋白質(zhì)印跡指南的這一部分詳細(xì)介紹了您在分離蛋白質(zhì)時可能需要考慮的事項。本文主要涉及以下幾個方面：·聚丙烯酰胺凝膠·緩沖液pH值·用分子量標(biāo)記確定蛋白質(zhì)大小·陰性組織對照·上樣對照SDS-PAGE通常用于WB實驗，其中蛋白質(zhì)被變性及還原以獲得它們的初級結(jié)構(gòu)。用SDS分子（Sodiumdodecylsulfate）包被會產(chǎn)生與其分子量成正比的相對負(fù)電荷，從而允許僅按大小

密度梯度離心法分離淋巴細(xì)胞的原理2022/09/21

密度梯度離心法分離淋巴細(xì)胞的原理是：常用來分離人外周血單個核細(xì)胞（PBMC）的分層液比重是1.077±0.001的聚蔗糖（Ficoll)-泛影葡胺（Urografin)(F／H)分層液。Ficoll是蔗糖的多聚體，呈中性，_W水性高，平均分子量為400,000，當(dāng)密度為1.2g／ml仍未超出正常生理性滲透壓，也不穿過生物膜。紅細(xì)胞、粒細(xì)胞比重大，離心后沉于管底；淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的比重小于或等于分層液比重，離心后漂浮于分層液的液面上，也可有少部分細(xì)胞懸浮在分層液中。吸取分層液液面的細(xì)胞，就可從外

absin恒溫?fù)u床的正確使用方法2022/09/20

absin恒溫?fù)u床屬于實驗室常規(guī)的實驗設(shè)備和輔助設(shè)備，與光譜儀、質(zhì)譜儀、粘度計、旋光儀、發(fā)酵裝置、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀等聯(lián)用；主要是通過循環(huán)泵功能，將冷卻水導(dǎo)入分析設(shè)備中。在加水時注意離上蓋板不低于8cm，用軟水，電光分析天平用蒸餾水，切勿使用井水、河水、泉水等硬水，以防加熱管爆裂及影響恒溫靈敏度。absin恒溫?fù)u床的正確使用方法：1、開啟電源，約一分鐘自檢結(jié)束。若顯示“000”則說明傳感器開路或輸入信號超過測量范圍。2、按SET鍵可設(shè)定溫度，按SET鍵至斂碼管下排數(shù)據(jù)閃動，表示儀表進(jìn)入溫度設(shè)定狀態(tài)，按△

臨床病毒載體生產(chǎn)專用轉(zhuǎn)染試劑--加速治療商業(yè)化2022/09/20

新冠疫情爆發(fā)以來，細(xì)胞與基因治療行業(yè)蓬勃發(fā)展，而細(xì)胞與基因治療CDMO行業(yè)的底層工藝路線主要包括質(zhì)粒、病毒載體和細(xì)胞工廠三個方面。其中，病毒載體的生產(chǎn)是細(xì)胞和基因治療產(chǎn)品生產(chǎn)過程中一個重要的環(huán)節(jié)，穩(wěn)健的瞬時轉(zhuǎn)染是保證高產(chǎn)量和可靠的病毒載體大規(guī)模商業(yè)化生產(chǎn)的關(guān)鍵。目前，用于細(xì)胞、基因治療的病毒載體主要是慢病毒，AAV。Polyplus-transfection®提供GMP級轉(zhuǎn)染試劑，可用于臨床病毒載體的生產(chǎn)。接下來，小編給您介紹一下，用于細(xì)胞和基因治療領(lǐng)域的轉(zhuǎn)染試劑-PEIpro·用于AAV和LV

銅死亡——細(xì)胞死亡研究新方向2022/09/16

2012年鐵死亡被發(fā)現(xiàn)后，它的相關(guān)研究經(jīng)歷了指數(shù)級的增長，也是近幾年熱門中的“熱門”。小優(yōu)曾用3篇文章詳細(xì)的剖析過它，從研究歷程到正式命名，再到通路研究，都有詳細(xì)解讀，不清楚的同學(xué)可以戳鏈接再了解。在今年的3月17日，美國Broad研究所ToddR.Golub研究組與PeterTsvetkov合作在Science上發(fā)表了題為“CopperinducescelldeathbytargetinglipoylatedTCAcycleproteins”的研究文章。文章一經(jīng)發(fā)布，“銅死亡”一詞迅速霸屏?？?

人elisa試劑盒顯色溫育反應(yīng)的重要性！2022/09/13

人elisa試劑盒的顯色是ELISA中的一步溫育反應(yīng)，此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內(nèi)，陰性孔可保持無色，而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行。在定量測定中，加入底物后的反應(yīng)溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測定的顯色可在室溫進(jìn)行，時間一般不需要嚴(yán)格控制，有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯色情況適當(dāng)縮短或延長反應(yīng)時間，及時判斷。OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)20-30分鐘后即不再加深，再延長反應(yīng)時間，可使本底

帕金森綜合征與溶酶體離子通道關(guān)系大揭秘，即刻了解！2022/09/08

作為細(xì)胞中的“回收站”，溶酶體在維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)上發(fā)揮著至關(guān)重要的作用，小優(yōu)曾經(jīng)為大家介紹過溶酶體降解（自噬）與神經(jīng)退行性疾病的關(guān)系，感興趣的小伙伴們請戳這兒了解。本文想帶大家將焦點從溶酶體降解轉(zhuǎn)移到溶酶體膜上，在溶酶體膜上也存在多種不同類型的蛋白質(zhì)，包括離子通道、轉(zhuǎn)運(yùn)體、結(jié)構(gòu)蛋白、酶等,其中離子通道蛋白由于他們在溶酶體離子動態(tài)平衡和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)、溶酶體膜電位和pH以及細(xì)胞營養(yǎng)代謝水平的調(diào)控中的重要作用,受到越來越多的關(guān)注。圖1.溶酶體膜上的部分相關(guān)蛋白質(zhì)早在2013年，賓夕法尼亞大學(xué)DejianRen

多標(biāo)實驗的實驗技巧2022/09/02

多重免疫分析具有許多優(yōu)點，如可以從每個樣本中獲取更多的生物信息，更高的通量以及（在許多情況下）降低成本。多標(biāo)實驗還通過在相同的實驗條件下同時測量所有分析物來消除其他變量的影響，例如測定溫度，緩沖液系統(tǒng)和操作員。開發(fā)多重免疫測定的主要挑戰(zhàn)是不同分析物的濃度和表達(dá)模式可能會有很大差異。這可以通過仔細(xì)的實驗設(shè)計來解決。1.了解樣本信息為了使多重免疫測定生成可靠的數(shù)據(jù)，必須對其進(jìn)行配置以確保準(zhǔn)確檢測所討論的每種分析物。分析物的豐度和表達(dá)位置可能不同；雖然有些分析物是細(xì)胞內(nèi)的，但其他分析物在細(xì)胞表面表達(dá)或

His標(biāo)簽抗體在WB和ELISA中的應(yīng)用2022/09/02

His標(biāo)簽是一種流行的重組蛋白的添加物，以促進(jìn)蛋白質(zhì)的純化和檢測。His標(biāo)簽的使用通常優(yōu)先于其他標(biāo)簽，因為可使用相對便宜的樹脂進(jìn)行純化，如NiNTA。Anti-HisTag抗體能夠檢測標(biāo)記的蛋白，從而篩選表達(dá)。多聚his標(biāo)簽通常由6個組氨酸殘基組成，但也可能在3-10個組氨酸殘基之間，通常位于重組蛋白的C端或n端。在這里，我們給大家介紹JacksonImmunoResearch公司的Anti-HisTag抗體對his標(biāo)記蛋白的WB和ELISA中的應(yīng)用。使用WB在細(xì)胞裂解液中篩選his標(biāo)記的蛋白從

蛋白質(zhì)印跡法實驗指南：第1部分，實驗原理和樣品準(zhǔn)備2022/09/02

蛋白質(zhì)印跡法（WesternBlotting）的6個基礎(chǔ)步驟：1.樣品制備2.通過凝膠電泳分離蛋白質(zhì)3.蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移（電印跡）到膜上4.膜封閉5.免疫檢測6.靶蛋白顯印WB法可用于檢測天然和合成來源的蛋白質(zhì)。來自表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白和來自生物樣品的內(nèi)源蛋白都可以用蛋白質(zhì)印跡法檢測。對于要通過WB分析的蛋白質(zhì)，首先必須要處理含有目標(biāo)蛋白的樣品，以使目標(biāo)蛋白質(zhì)可用于分析。例如，在篩選表達(dá)時，通過裂解細(xì)胞來釋放蛋白質(zhì)，使其進(jìn)入分離基質(zhì)。蛋白質(zhì)提取之后可以進(jìn)行變性和還原，目的是將蛋白質(zhì)分解成一級結(jié)構(gòu)，因此蛋

膠質(zhì)瘤腫瘤微環(huán)境相關(guān)抗體推薦2022/09/01

腫瘤細(xì)胞與周圍腫瘤微環(huán)境（TumorMicroenvironment，TME）之間的動態(tài)相互作用在膠質(zhì)瘤的持續(xù)生長、增殖和侵襲、存活、逃避細(xì)胞死亡、代謝、遷移和轉(zhuǎn)移等過程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。膠質(zhì)瘤TME具有高度異質(zhì)性，由多種癌細(xì)胞和非癌細(xì)胞組成，包括內(nèi)皮細(xì)胞(EC)、免疫細(xì)胞、膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(GSC)和星形膠質(zhì)細(xì)胞，以及非細(xì)胞成分，例如作為細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)。已經(jīng)記錄了神經(jīng)膠質(zhì)瘤腫瘤細(xì)胞和TME之間的幾種細(xì)胞間通訊方式。在膠質(zhì)瘤TME中，細(xì)胞通過內(nèi)皮細(xì)胞、生長因子、細(xì)胞因子、趨化因子、單核細(xì)

膠質(zhì)瘤的分類及其關(guān)鍵研究靶點2022/08/31

膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）的實體瘤。它們來自膠質(zhì)細(xì)胞的腫瘤性轉(zhuǎn)化，即星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞和室管膜細(xì)胞。腦腫瘤約占所有成人癌癥的2%，但在兒童腫瘤組中占較大比例。膠質(zhì)瘤約占所有惡性腦腫瘤的80%，根據(jù)細(xì)胞起源、分化和惡性程度分類。膠質(zhì)瘤在發(fā)病年齡、嚴(yán)重程度、組織學(xué)特征、進(jìn)展和轉(zhuǎn)移能力方面表現(xiàn)出相當(dāng)大的差異。膠質(zhì)瘤診斷后的生存時間因級別而異。根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）的分類，膠質(zhì)瘤分為四個等級。1、2和3級被歸類為低級別膠質(zhì)瘤，而4級被歸類為高級別膠質(zhì)瘤。不幸的是，由于治愈性治療的可能性有

看！心血管疾病研究--HTRF技術(shù)怎么做？2022/08/31

本文涉及應(yīng)用技術(shù)：均相時間分辨熒光（HTRF&TR-FRET）。來看研究人員是如何利用HTRF技術(shù)助推心血管疾病的研究的吧。Comeon~一氧化氮信號通路研究一氧化氮（NO）是自分泌和旁分泌的信號通路分子，可以擴(kuò)散進(jìn)入生物膜。發(fā)揮作用時間很短，促進(jìn)血管動態(tài)平衡。能夠抑制平滑肌收縮生長，阻止血小板凝聚以及防止白細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞粘附。另外它還參與免疫防御系統(tǒng)，神經(jīng)傳遞，血管生成等過程。研究表明，這種配體/受體長期低表達(dá)可能是高血壓、心力衰竭、心肌梗死、中風(fēng)和死亡的發(fā)病的關(guān)鍵。因此，NO-sGC信號通路

外泌體來源長鏈非編碼RNA H19促進(jìn)成骨和血管生成2022/08/30

骨質(zhì)疏松癥是一種常見的代謝性骨病，其表現(xiàn)為骨量低和骨組織微觀結(jié)構(gòu)惡化。這會導(dǎo)致骨脆性和骨折的風(fēng)險增加。研究數(shù)據(jù)表明胱硫氨酸β合成酶(CBS)缺乏癥的患者通常患有骨質(zhì)疏松癥和骨折。然而，目前的主要挑戰(zhàn)是了解CBS+/-條件下的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞功能障礙的病因，以及制定臨床策略來保護(hù)這些患者的骨骼健康。治療骨骼異常的策略有多種多樣，如支架材料與生長因子的結(jié)合、細(xì)胞或自體骨移植等。研究辦法及結(jié)果1.通過RT2lncRNAPCRArray篩選（(LAMM-001Z,MouseLncRNAfinder,），

支氣管杯狀細(xì)胞中的MUC5B和MUC5AC在新型guan狀病毒中的研究2022/08/30

研究背景：SARS-CoV-2會優(yōu)先感染支氣管氣道上皮的杯狀細(xì)胞。杯狀細(xì)胞（gobletcells）是一種特殊類型的上皮細(xì)胞，分泌黏性蛋白(mucins，MUCs)，是重要的黏液成分。黏蛋白5AC(MUC5AC)主要由氣道杯狀細(xì)胞表達(dá)，而黏蛋白5B(MUC5B)主要由粘膜下腺體的杯狀細(xì)胞表達(dá)。慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者細(xì)支氣管腔中的MUC5B蛋白和支氣管上皮中的MUC5AC蛋白表達(dá)會增高。由來自美國北達(dá)科他州大學(xué)的JaspreetOsan等人近日研究發(fā)現(xiàn)杯狀細(xì)胞在由SARS-CoV-2誘導(dǎo)