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細(xì)胞培養(yǎng)注意事項（入門篇）2025/05/30: 1細(xì)胞房和生物安全柜先開紫外照射30min作用：對環(huán)境滅菌（空氣）。（備注：如果著急，至少也要開15分鐘），在做實驗之前考慮好需要哪些物品。開始照射之前，將所需要用到的物品都放到生物安全柜（或超凈工作臺）里面。常用移液槍或電動移液器等，需要在工作臺上放置一套專用設(shè)備。細(xì)胞培養(yǎng)箱一般都已經(jīng)調(diào)整好。定期留意一下二氧化碳是否足夠。不夠及時更換。2顯微鏡需要定期消毒酒精擦拭注意：顯微鏡一般都放在細(xì)胞房。3進入實驗之前首先給自己帶上拖鞋、頭套，口罩，實驗服，手套（手套帶雙層）。注意：手套要將袖口套進去。實

SCL胎牛血清2024/04/22: 更多產(chǎn)品更多品牌現(xiàn)貨供應(yīng)，敬請荷蘭SCL公司成立于1992年，早年一直是幾大血清銷售商的OEM供應(yīng)商，自2002年開始通過自主銷售，目前已成為歐洲及美洲地區(qū)的血清供應(yīng)商。SCL血清原材料都通過先進的心臟穿刺采血技術(shù)采自于天然放牧為主、疾病少、未發(fā)生瘋牛?。˙SE）和口蹄疫（FMD）疫情的健康牛群，生產(chǎn)的血清產(chǎn)品符合歐盟（EU）及美國農(nóng)業(yè)部（USDA）標(biāo)準(zhǔn)。所有生產(chǎn)流程均在GMP廠房進行，并通過ISO9001認(rèn)證，擁有CE標(biāo)識與歐洲藥品質(zhì)量管理局安全許可證書，符合歐洲藥典檢測標(biāo)準(zhǔn)。SCL公司一貫重

胎牛血清質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)解讀2024/04/22: 【胎牛血清】胎牛血清(fetalbovineserum，F(xiàn)BS)指通過對未出生的胎牛行穿刺采血，再經(jīng)自然層析、離心、過濾等處理而得到的上清液。在細(xì)胞培養(yǎng)體系中，血清是不屬于人工合成的成分，同時也讓血清成分成為細(xì)胞培養(yǎng)體系中最大的不確定因素，因此，如何保障胎牛血清的質(zhì)量是細(xì)胞培養(yǎng)得好壞的決定性因素之一?！咎ヅＱ宓臋z測指標(biāo)】胎牛血清的COA中，常規(guī)的檢測標(biāo)準(zhǔn)包括內(nèi)毒素、總蛋白、支原體、細(xì)菌、病毒、滲透壓、總蛋白等。胎牛血清產(chǎn)品分析證書（COA）就是FBS質(zhì)控的重要體現(xiàn)。【理化檢測】外觀胎牛血清外觀

細(xì)胞消化不下來？如何解決？2024/04/15: 細(xì)胞消化不下來？小伙伴們在給貼壁細(xì)胞傳代的時候有沒有遇到細(xì)胞消化不下來的情況呢？有時候等了10分鐘甚至20分鐘細(xì)胞仍巋然不動，繼續(xù)等待怕消化過度，暴力吹下又怕對細(xì)胞造成機械損傷，可謂進退兩難。1.細(xì)胞貼壁緊不同種類的細(xì)胞貼壁的松緊程度是不一樣的，比如293系列細(xì)胞貼壁很松，是晃一晃就可能掉下來的程度。而MCF10A細(xì)胞卻貼壁很緊，可能需要消化5-10min甚至更久才能脫落。在培養(yǎng)一株細(xì)胞之前，可以問問有經(jīng)驗的師哥師姐或者上網(wǎng)查資料確認(rèn)這株細(xì)胞大概消化多久，做到知己知彼百戰(zhàn)百勝。解決方案：若您培養(yǎng)

細(xì)胞污染是怎么造成的2024/01/03: 細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等儀器設(shè)備以及的實驗服和拖鞋，未定期消毒。物品被帶出細(xì)胞房使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用（通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37％烤干備用）。細(xì)胞培養(yǎng)中常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染，大多數(shù)較難處理（只有扔）。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細(xì)胞污染呢？接下來一起來了解一下。一、違規(guī)操作：1.為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌30min

原代培養(yǎng)技術(shù)的注意事項2023/12/08: 一、注意污染1、嚴(yán)格進行動物皮膚消毒，使用三套器械取材。新生動物皮膚先用2%碘酒液消毒，成年鼠先用3%~5%碘酒液消毒后用75%酒精消毒。2、嚴(yán)格進行無菌操作，防止細(xì)菌、霉菌、支原體污染，避免化學(xué)物質(zhì)污染。自取材開始，保持所有組織細(xì)胞處于無菌條件。細(xì)胞計數(shù)可在有菌環(huán)境中進行。3、吸取液體前，瓶口和吸管進行火焰消毒；吸取液體時，避免瓶口和吸管碰撞。4、離心管入臺前，管口、管壁應(yīng)消毒。5、實驗者離開超凈臺時，要隨時用肘部關(guān)閉工作窗。6、使用過的器械用酒精棉球擦去血污后，移入另一個器皿中繼續(xù)消毒，在浸

細(xì)胞消化不下來？如何解決2023/11/24: 細(xì)胞消化不下來？小伙伴們在給貼壁細(xì)胞傳代的時候有沒有遇到細(xì)胞消化不下來的情況呢？有時候等了10分鐘甚至20分鐘細(xì)胞仍巋然不動，繼續(xù)等待怕消化過度，暴力吹下又怕對細(xì)胞造成機械損傷，可謂進退兩難。小尚為大家總結(jié)了細(xì)胞難消化的原因，以及對應(yīng)的處理方式：1.細(xì)胞貼壁緊不同種類的細(xì)胞貼壁的松緊程度是不一樣的，比如293系列細(xì)胞貼壁很松，是晃一晃就可能掉下來的程度。而MCF10A細(xì)胞卻貼壁很緊，可能需要消化5-10min甚至更久才能脫落。在培養(yǎng)一株細(xì)胞之前，可以問問有經(jīng)驗的師哥師姐或者上網(wǎng)查資料確認(rèn)這株細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)科普2023/11/10: 細(xì)胞是生命的基本單位，它們構(gòu)成了我們身體的組織和器官。而細(xì)胞培養(yǎng)則是一種讓細(xì)胞在實驗室中生長和繁殖的技術(shù)，為科研提供了深入研究細(xì)胞行為和開展生物醫(yī)學(xué)研究的重要工具。為什么進行細(xì)胞培養(yǎng)？細(xì)胞培養(yǎng)可以幫助科學(xué)家們更好地理解細(xì)胞的生理和病理過程。通過在實驗室中控制細(xì)胞的環(huán)境條件，如溫度、濕度和培養(yǎng)基的成分，可以模擬和研究不同的生理和病理狀態(tài)，例如細(xì)胞的生長、分化、增殖和響應(yīng)藥物的能力。細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用領(lǐng)域細(xì)胞培養(yǎng)在許多領(lǐng)域中都有廣泛的應(yīng)用。在生物醫(yī)學(xué)研究中，它可以用于研究癌癥、感染性疾病、神經(jīng)退行性疾病

無血清培養(yǎng)基的優(yōu)勢有哪些2023/10/23: 無血清培養(yǎng)基（serum-freemedium,SFM）系指不含任何血清成分的合成培養(yǎng)基。近年來，因為細(xì)胞治療（celltherapy）的快速發(fā)展與生物工業(yè)上的制備抗體、病毒抗原或是重組蛋白表達(dá)時，細(xì)胞培養(yǎng)基中的血清成分復(fù)雜，可能會影響制程或是增加不穩(wěn)定的因素，因此，無血清培養(yǎng)基成為其目標(biāo)，現(xiàn)今已有許多成熟的產(chǎn)品可供應(yīng)研究人員做選擇。顧名思義，無血清培養(yǎng)基（serum-freemedium,SFM）系指不含任何血清成分的合成培養(yǎng)基。近年來，因為細(xì)胞治療（celltherapy）的快速發(fā)展與生物工

ELISA試劑盒實驗時為什么一定要保溫2023/10/08: elisa試劑盒實驗時為什么需要保溫?因為ELISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機會，只有最貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程，因此需經(jīng)擴散才能達(dá)到反應(yīng)的終點。在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴，可將ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底應(yīng)貼著水面，使溫度迅速平衡。為避

ELISA試劑盒的參考標(biāo)準(zhǔn)介紹2023/09/13: 第一、標(biāo)準(zhǔn)曲線1.定量方法：標(biāo)準(zhǔn)曲線至少由5個濃度組成，測定次數(shù)不少于5次，以確定工作濃度范圍和IC50范圍。2.定性方法：工作濃度范圍通過陰性、臨界值濃度和陽性的樣品測定來確定，每個濃度重復(fù)不少于5次，濃度與響應(yīng)值之間應(yīng)有一定的關(guān)系。第二、檢測限和定量限1.檢測限：20份空白樣品測定均值加3倍標(biāo)準(zhǔn)差。2.定量限：應(yīng)大于標(biāo)準(zhǔn)曲線中濃度點。對于定量方法，應(yīng)對該濃度樣品至少測定6次進行驗證，而不能通過外延法推斷。第三、臨界值（cut-off值）的確定對于有殘留余量的藥物，檢測方法的臨界值為20份添加

實驗室問題解答QA2023/09/06: 一、標(biāo)準(zhǔn)溶液是自己配制出來的，它屬于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)嗎？要怎么做期間核查呢？參考解答：標(biāo)準(zhǔn)溶液是自己配制出來的，它屬于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，需要做期間核查（如果在很短時間內(nèi)用完了，這種情況不用核查）期間核查時候要區(qū)別是CRM還是RM，一般核查的時候主要關(guān)注標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)1、性狀是否發(fā)生變化2、是否在有效期內(nèi)3、外觀是否變化，比如是否渾濁4、保存的環(huán)境條件是否合適必要時可以用些技術(shù)手段看看試劑值是否發(fā)生明顯變化。但是實驗室一般不能對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進行定值。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)值是否變化和對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值是2個問題。二、作為企業(yè)內(nèi)部實驗室，因涉

牛血清白蛋白（BSA）的應(yīng)用2023/08/29: 牛血清白蛋白（BSA）是牛血清中的一種球蛋白，包含607個氨基酸殘基，分子量為66.446KDa，等電點為4.7。應(yīng)用：牛血清白蛋白（BSA）在生化實驗中有廣泛的應(yīng)用，例如在WB實驗中加入BSA，通過提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度，對酶起保護作用。防止酶的分解和非特異性吸附，能減輕有些酶的變性減輕不利環(huán)境因素，如加熱、表面張力及化學(xué)因素引起的變性。測定蛋白濃度按50：1配置BCA工作液。10ulC液（蛋白標(biāo)準(zhǔn)）+90ulPBS液稀釋成0.5mg/ml的蛋白標(biāo)準(zhǔn)液。再分別以0、1、2、4、8、12、16、

細(xì)胞培養(yǎng)的整個過程都是怎么樣的？2023/08/17: 當(dāng)你進行細(xì)胞培養(yǎng)時，通常會經(jīng)歷以下幾個基本步驟：1.細(xì)胞培養(yǎng)基配制：準(zhǔn)備適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，包括培養(yǎng)基基礎(chǔ)成分、補充物和生長因子等。培養(yǎng)基的配制需根據(jù)細(xì)胞類型和實驗要求進行優(yōu)化。2.細(xì)胞準(zhǔn)備：從細(xì)胞庫或前一次培養(yǎng)的細(xì)胞中獲取需要培養(yǎng)的細(xì)胞株。細(xì)胞通常以凍存?zhèn)浞莸男问酱鎯Γ枰冗M行解凍復(fù)蘇。3.細(xì)胞接種：將復(fù)蘇后的細(xì)胞以適當(dāng)?shù)募?xì)胞密度接種到含有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中。細(xì)胞接種密度需根據(jù)細(xì)胞類型和實驗要求進行控制。4.培養(yǎng)條件控制：提供適宜的培養(yǎng)條件，包括溫度、濕度和CO2濃度等。這些條件可以通過培養(yǎng)

幾種常用的免疫學(xué)技術(shù)知識簡介2023/08/09: 免疫學(xué)技術(shù)：是指在免疫學(xué)長期發(fā)展過程中形成的一套特別的研究手段和計數(shù)，包括人工免疫防治技術(shù)（疫苗和血清）和免疫檢測技術(shù)（抗原抗體檢測和機體免疫功能檢測）免疫學(xué)研究涉及到的重要技術(shù)包括：單克隆抗體技術(shù)、T細(xì)胞克隆技術(shù)、轉(zhuǎn)基因及基因編輯技術(shù)、分子雜交技術(shù)、聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)等。常用的免疫學(xué)技術(shù)：1．免疫熒光技術(shù)免疫熒光技術(shù)是利用熒光素標(biāo)記的抗體（或抗原）檢測組織、細(xì)胞或血清中的相應(yīng)抗原（或抗體）的方法.由于熒光抗體具有安全、靈敏的特點,因此已廣泛應(yīng)用在免疫熒光檢測和流式細(xì)胞計數(shù)領(lǐng)域.根據(jù)熒光素標(biāo)記的方

無血清細(xì)胞培養(yǎng)基與血清細(xì)胞培養(yǎng)基的區(qū)別2023/08/03: 無血清細(xì)胞培養(yǎng)基與血清細(xì)胞培養(yǎng)基哪個好？很難一句話來說。但可以從幾個方面分別比較。1.產(chǎn)品性能方面無血清培養(yǎng)基更好。血清并不是生來就為養(yǎng)細(xì)胞而來的。血清是全血的一部分，組分很復(fù)雜，有150多種已知組分組分，多種未知組分。這些組分中，有些對細(xì)胞生長是有利的，有些對細(xì)胞生長是無作用的，有些對細(xì)胞生長反而是有害的。另外，不同的牛，由于其體質(zhì)不同，其血清中各種組分的差異很大。比如血清中的EGF，有的含量為10ug/ml，有的僅為2ug/ml，相差了5倍。有時你用的血清不好用，不是你的運氣差，很多時候也不

胎牛血清（FBS）知多少2023/08/03: 胎牛血清血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，這些物質(zhì)對促進細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。胎牛血清是品質(zhì)高的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細(xì)胞有害的成分最少。胎牛血

PBS磷酸鹽緩沖液的配置方法及作用2023/07/24: PBS緩沖液，是生物化學(xué)研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaC和KCI，一般作為溶劑，起溶解保護試劑的作用。由于Na2HPO和KH2PO4有二級解離，緩沖的PH值范圍很廣，而NaCI和KCI主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補加1mmoI/LCaCI2和0.5mmoI/LMgCI2，以提供二價陽離子。配置方法：稱取8.0gNaCI、0.2gKCI、1.44gNa2HPO4、0.24gKH2PO4溶于800ml蒸餾水中，用HCI調(diào)節(jié)溶液至7.4，

新生牛血清的成分2023/07/17: 1.蛋白質(zhì)新生牛血清中的主要成份中除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外，主要還有白蛋白，球蛋白。纖維粘連素細(xì)胞促進細(xì)胞附著;胎牛血清中含胎球蛋白促細(xì)胞依附;轉(zhuǎn)鐵蛋白可以結(jié)合鐵離子，減少其毒性會被細(xì)胞利用的可能。2.多肽血小板促生長因子能促細(xì)胞分裂，據(jù)專人介紹新生牛血清是多肽家族的重要成員，多肽擁有著重要的作用，比如它可以促進細(xì)胞增殖因子數(shù)量的增加，不僅如此，它還能夠促成纖維細(xì)胞生長因子以及神經(jīng)細(xì)胞生長因子等，據(jù)悉，雖然從數(shù)量上來看新生牛血清的含量比例少，但它能夠促進細(xì)胞的增長。3.激

細(xì)胞培養(yǎng)的原理和步驟2023/06/27: 細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理：細(xì)胞傳代（生存空間和營養(yǎng)不足，長得太密，代謝廢物太多，要洗洗，同時也要分離出一部分細(xì)胞，要加入新的培養(yǎng)液），換液（生存空間和營養(yǎng)剩余，但是代謝廢物太多，要洗洗，要吃飯，才能長好，所以要洗和加入新鮮培養(yǎng)基），凍存（太多了，先存起來，液氮里面里就是低溫，保存能量，活得久），復(fù)蘇（解凍，恢復(fù)吃飯的能力，恢復(fù)生長。）這四步。細(xì)胞培養(yǎng)的基本步驟（一定要明白每個步驟的意義和目的）：01細(xì)胞傳代（貼壁細(xì)胞）：試劑：PBS,胰酶，含血清的培養(yǎng)基；流程：顯微鏡下看一看培養(yǎng)皿里的細(xì)胞多不多，太多

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