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血漿蛋白有什么功能？2022/07/20

1、營養(yǎng)功能每個成人3L左右的血漿中約含有200g蛋白質，它們起著營養(yǎng)貯備的功能。雖然消化道一般不吸收蛋白質，吸收的是氨基酸，但是，體內的某些細胞，特別是單核吞噬細胞系統(tǒng)，吞飲完整的血漿蛋白，然后由細胞內的酶類將吞入細胞的蛋白質分解為氨基酸。這樣生成的氨基酸擴散進入血液，隨時可供其它細胞合成新的蛋白質之用。2、運輸功能蛋白質巨大的表面上分布有眾多的親脂性結合位點，它們可以與脂容性物質結合，使之成為水溶性，便于運輸；血漿蛋白還可以與血液中分子較小的物質（如激素、各種正離子）可逆性的結合，即可防止它

蛋白質樣品中蛋白類雜質的檢測方法2022/07/19

本文圍繞蛋白質純度的重要性，闡述了蛋白類雜質的檢測方法，包括電泳法，色譜法，沉降速率測定法，質譜法，光散射法。任何方法都不能直接定量蛋白質樣品的純度。無論最終目的是為了解釋分析數(shù)據(jù)、驗證過程質量，還是為了確保生物制劑產品的安全性，樣品純度的測定都是至關重要的環(huán)節(jié)。隨著蛋白類生物制品的發(fā)展，蛋白質純度已經成為藥品管理的重大問題。在生物制品的質量指導原則中指出：除了評價原料藥和藥物產品的純度，可能由預期產品和多種產品相關物質組成之外，還應評價可能出現(xiàn)的雜質成份。這些雜質可能是在生產過程中產生的或者是

血清儲存的小常識2022/07/18

Q1：血清儲存條件是什么？血清在生產后，運送至市場上銷售，整個過程中，儲存溫度應嚴格保證在-20℃，避免反復凍融影響血清活性。因此，實驗人員在收到血清，檢查完好后，及時將血清送至-20℃冰箱中儲存，用時再取出采用三步法解凍。第一次解凍后，將血清分裝，儲存在-20℃冰箱中，盡可能減少血清凍融次數(shù)。解凍好的血清也應及時配制成培養(yǎng)基，盡快用完。Q2：血清解凍后可在4℃冰箱中放多久？一般來說，解凍了的血清，無論是否配制成培養(yǎng)基，都不建議在4℃冰箱中久放。血清本身是沒有外源抗菌成分添加的，4℃冰箱使用頻率

試驗中培養(yǎng)基的融化方法2022/07/15

將培養(yǎng)基放到沸水浴中或采用有相同效果的方法使之融化。經過高壓的培養(yǎng)基應盡量減少重新加熱時間，融化后避免過度加熱。融化后應短暫置于室溫中以避免玻璃瓶破碎。融化后的培養(yǎng)基放入47℃～50℃的恒溫水浴鍋中冷卻保溫，直至使用。融化后的培養(yǎng)基應盡快使用，放置時間一般不應超過4h。未用完的培養(yǎng)基不能重新凝固留待下次使用。敏感的培養(yǎng)基尤應注意，融化后保溫時間應盡量縮短，如有特定要求可參考的標準。傾注到樣品中的培養(yǎng)基溫度應控制在約45℃左右。一般產品在受熱、吸潮后，易被細菌污染或分解變質，因此一般情況必須防潮、

蛋白質的表達、分離、純化實驗2022/07/13

基因重組—層析法實驗方法原理攜帶有目標蛋白基因的質粒在大腸桿菌BL21中，在37℃，IPTG誘導下，超量表達攜帶有6個連續(xù)組氨酸殘基的重組氯霉素?；D移酶蛋白，該蛋白可用一種通過共價偶連的次氨基三乙酸（NTA）使鎳離子（Ni2+）固相化的層析介質加以提純，實為金屬熬合親和層析（MCAC）。蛋白質的純化程度可通過聚丙烯酰胺凝膠電泳進行分析。實驗材料大腸桿菌BL21試劑、試劑盒LB液體培養(yǎng)基氨芐青霉素WashingBufferElutionBufferIPTG蒸餾水胰蛋白胨酵母粉氯化鈉儀器、耗材搖床

細菌培養(yǎng)鑒定操作規(guī)程2022/07/12

1.檢驗目的做疾病的病原學診斷，查找于疾病有關的病原菌以及了解與疾病的關系，指導臨床治療及預后和流行病學的調查。2.原理人體很多部位與外界相通，存在棲息菌群，但不致病，當菌群失調或分離到致病菌則具有臨床意義；另外機體某些部位是無菌的，如檢出則視為致病菌。并排除采樣及操作污染。3.標本要求（1）標本類型：，骨髓，腦脊液，胸水，腹水，尿液，等；痰液，前列腺液，膿液，組織分泌物或穿刺液等。（2）標本采集：見標本采集手冊（3）標本儲存和運輸：室溫放置，室溫運輸并立即送檢。人泌尿生殖道標本如白帶前列腺液等

培養(yǎng)細胞需要注意什么？2022/07/11

1、選擇正確的培養(yǎng)基在養(yǎng)細胞之，就要了解，你所養(yǎng)細胞的來源以及種類和名稱，查閱一定量的文獻，確定所需培養(yǎng)液種類以及是否需要添加特殊成分，常用的細胞培養(yǎng)液有DMEM、RPMI1640、F12等等，一些常見的細胞基本可以使用這幾種培養(yǎng)基中的一種來培養(yǎng)，有的需要加入一定其他成分，這需要根據(jù)不同的細胞類型，查ATCC細胞庫或者查文獻，才能找到所需合適培養(yǎng)液。選擇正確的培養(yǎng)液是養(yǎng)好細胞的步。2、了解細胞的生長習性不同的細胞生長習性不同。如成纖維細胞是貼壁生長，有一定的密度依賴性，密度小可能會出現(xiàn)不增殖，狀

菌株和菌種的區(qū)別你知道嗎？2022/07/08

菌種是指用于發(fā)酵過程中作為活細胞催化劑的微生物，其中包括細菌、放線菌、酵母菌和霉菌四大類。菌種是從事微生物學及生命科學研究的基本材料，在醫(yī)學領域中，診斷制品的制備，菌苗的生產、微生物致病性研究、藥物的抑菌試驗、藥品微生物檢驗等方面都有一套完整的菌種，菌種又分為母種、原種以及栽培種三級。菌株和菌種的區(qū)別1、菌株：菌株是一種菌類系列中一個品種，又叫品系，表示同種微生物不同來源的純種培養(yǎng)，從自然界中分離得到的每一個微生物純培養(yǎng)都可稱一個菌株。2、菌種：菌種則是用于繁殖的種子，是指食用菌、工業(yè)菌、農用菌

ELISA試劑盒的應用和類型2022/07/07

一、ELISA是什么？ELISA是酶聯(lián)免疫吸附測定法(Enzyme-LinkedImmunoSorbentAssay,ELISA)的簡稱。它是在免疫酶技術的基礎上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術。ELISA是一種廣泛應用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術。酶聯(lián)免疫吸附試驗的標準程序，通常是把蛋白、抗體、或激素等（即抗原）直接或是以捕捉抗體（captureAb）固定在固相載體上，再加入一級檢測抗體（primarydetectionAb），形成一個抗原抗體的復合物。如果該抗體已經用酶

科研用細胞系鑒定的6大要求2022/07/06

一種新細胞系，不論是從原代培養(yǎng)衍生或是從已有的細胞系衍生，很難估計它未來的價值。通常要經過一段時間的應用、傳播以后，該細胞系真正的重要性才體現(xiàn)出來。這時，需要有關其起源的詳細信息，然而已經為時太晚，無法回顧性的收集信息。因此，從組織分離或得到一種新的細胞系開始，充分記錄有關細胞系的起源和處理的詳細資料，是至關重要的。這些記錄形成該細胞系的“身世”，記錄越詳細，價值越大。隨著細胞系通過細胞庫和私人聯(lián)系廣泛傳播到已遠離其起源的各研究室及商業(yè)公司，細胞培養(yǎng)工作中細胞系起源方面的問題也變得尤其重要，特別

人臍靜脈內皮細胞(HUVEC) 的培養(yǎng)方法2022/07/05

人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)是從臍帶靜脈中分離出來的原代細胞。這種細胞是研究內皮細胞的模型系統(tǒng)，研究相關的低氧、炎癥、氧化應激、感染反應以及正常和腫瘤相關血管生成等應用。TNF-α和IFN-γ等細胞因子會誘導內皮細胞激活（一種炎性反應），并導致VCAM-1/CD106等細胞黏附分子上調，這些上調可使用熒光標記抗體和細胞成像進行定量，以下是人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）培養(yǎng)操作方法。一、實驗方法原理本實驗采用新鮮的健康產婦新生兒臍帶，采用膠原酶Ⅰ型用消化分離得到臍靜脈內皮原代細胞。膠原酶是理想的

如何正確提取胎牛血清白蛋白？2022/07/04

胎牛血清白蛋白（BSA），又稱第五組分，是牛血清中的一種白蛋白，包含583個氨基酸殘基，分子量為66.430kDa，等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用，例如在westernblot中作為Blockingagent;在酶切反應緩沖液中加入BSA，通過提高溶液中蛋白質的濃度，對酶起保護作用。防止酶的分解和非特異性吸附，能減輕有些酶的變性，能減輕有些不利環(huán)境因素如加熱，表面張力及化學因素引起的變性。是胎牛血清中的一種球蛋白，一般獲取胎牛血清白蛋白，常常運用的方法是加熱法。下面一起來看

支原體的相關知識您了解嗎？2022/06/30

支原體早發(fā)現(xiàn)于1898年，1956年Robinson等從細胞培養(yǎng)物中分離出支原體，之后國內外關于支原體污染細胞的報道屢見不鮮。它廣泛存在于自然界中，有80余種，污染細胞常見的支原體包括發(fā)酵支原體（M.fementans）、豬鼻支原體（M.hyorhinis）、口腔支原體（M.orale）、精氨酸支原體（M.arginina）、梨支原體（M.pirum）、唾液支原體（M.salivarium）和人型支原體（M.hominis）。支原體通常附著在細胞的表面，并影響其宿主細胞的生理、遺傳等多方面的正常

怎么測定培養(yǎng)基的pH值才更準確？2022/06/29

校準首/先在測量pH值時，我們都會對pH計進行一個校準工作，它的校準準確率對后續(xù)的測量有很大影響。pH電極需要有規(guī)律的進行校準。每天至少校準一次，是最恰當?shù)?。由于每支電極都有其特征性的零點和斜率，為了得到可靠和精確的結果，最少兩點校準是bi不可少的。當要測量大范圍的pH值時，則需要進行至少3點校準。大多數(shù)的pH儀表可以進行3-5點校準。同時所測量的樣品pH值落在所選擇標準液范圍之內也是非常重要的。在電極進行校準時，最好等待緩沖液溫度在標示溫度下校準，這樣測出的pH值才是緩沖液標示的值，比如pH6

碰到血清沉淀怎么辦？2022/06/28

血清沉淀是什么？血清中經常會出現(xiàn)肉眼可見的沉淀，其成分有多種類型，產生的原因有很多，主要有纖維蛋白、磷酸鈣還有一些其它成分。1.纖維蛋白（Fibrin）血清中肉眼可見的沉淀物大多屬于這一類型。由于在生產過程中，血清采集、過濾（3次0.1μm過濾）和灌裝處理都是在低溫條件下快速完成,此時血清中纖維蛋白原（Fibrinogen）處于溶解狀態(tài)。但在解凍之后,血清中纖維蛋白原往往會發(fā)生凝集，形成肉眼可見的沉淀。2.磷酸鈣（CalciumPhosphate）這是一種常見的沉淀成分，通常會造成血清出現(xiàn)云霧狀

細胞生長緩慢的兩大根本原因2022/06/27

一、培養(yǎng)體系出現(xiàn)問題1.檢查你所培養(yǎng)的細胞是否存在污染。（1）如果培養(yǎng)細胞未添加抗生素，細胞污染則是不可避免的。①用肉眼和顯微鏡進行檢查。②如果細胞被污染則要棄掉。（2）由于支原體污染不容易覺察到，因此必須定期檢測。（3）檢測可能污染的途徑和原因。2.檢查你用于培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基和血清（例如：是否批次不同或廠商不同）。如果你常規(guī)使用的是粉劑或10×儲存液，而現(xiàn)在購買的培養(yǎng)基更換為1×液體，而隨后證明問題就出自于此。3.如果問題與培養(yǎng)基無關，那么很可能還是細胞的問題。（1）復蘇另一支凍存的細胞，并且

巨噬細胞在病毒感染后的作用研究2022/06/24

冠狀病毒(CoV)是自然界廣泛存在的一類病毒，因該病毒的形態(tài)在電鏡下觀察類似王冠而得名。其基因總長約28~32kb，基因組大致可分成6到7個區(qū)域，每個區(qū)域均包含至少1條開放閱讀框(opten-readingframe，ORF)。CoV顆粒的直徑約60～200nm，平均直徑為100nm，呈球形或橢圓形，是目前發(fā)現(xiàn)最大的RNA類病毒。目前為止發(fā)現(xiàn)冠狀病毒僅感染脊椎動物，可引起人和動物呼吸道、消化道、泌尿生殖系統(tǒng)和神經系統(tǒng)疾病。2019新型guan狀病毒(COVID、19)是新發(fā)現(xiàn)的可以感染人和動物的

細胞培養(yǎng)時需要注意哪些細節(jié)？2022/06/22

1.細胞生長的營養(yǎng)來源不同的細胞的培養(yǎng)基是不相同的，對于大多數(shù)腫瘤細胞來說，營養(yǎng)配方一般為：90%合成培養(yǎng)基（DMEM、RPMI1640、MEM等）和10%胎牛血清(FBS)；為了防止污染，可以適時加1%雙抗，抗生素的使用應為短期。Q：細胞培養(yǎng)基配方如何選擇？A:一般購買細胞時，針對不同的細胞株，會有詳細的介紹，包括生長的狀態(tài)圖、培養(yǎng)基的類型等。如人源肺癌細胞A549可用DMEM培養(yǎng)基，在胎牛血清的選擇上也可以選用品牌、來源可靠的胎牛血清，能提供較好的營養(yǎng)成分，以滿足細胞株生長的需要。Q：如果細

胰酶的使用注意事項及配制方法2022/06/21

胰酶使用注意：1、在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。2、胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。胰酶配制方法：1、培養(yǎng)液配制，方便好用，對細胞影響小，并且培養(yǎng)液的ph值正好適合胰蛋白酶的溶解2、生理鹽水配制，要先調ph值7.2到7.4（①胰酶（1：250）2.5克②EDTA-Na0.3克③NaCl8.0克④KCl0.4克⑤Glucose1.0克⑥PhenolRed0.005克⑦Water1000mL磁力攪拌2-3小時，調pH7.8-8.0，過濾

細胞凍存液的原理及配制方法2022/06/20

細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以zui大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外，減少細胞內冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷。細胞凍存是細胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實驗順利進行的重要技術手段。在細胞建株和建系中，及時凍存原始細胞是十分