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乳化型快速佐劑相關(guān)知識2023/05/17: 保存條件：不含防腐劑，2-8℃避光保存10個(gè)月1.注意事項(xiàng)：雖然本產(chǎn)品很穩(wěn)定但您還是要盡可能避免陽光直射帶來的危害；另外抗原如果含有甘油或者尿素會降低乳化效率，甚至乳化失敗。2.使用方法：實(shí)驗(yàn)表明最佳使用比例是30-50%。30%乳化后最粘稠，越接近50%粘性越低。因此建議夏季使用低濃度冬季使用高濃度乳化；這樣既能得到很好的免疫效果也能減少注射時(shí)帶來的阻力困難。乳化建議2種方法去操作：1、將佐劑先加入乳化管，然后加少部分抗原攪拌乳化兒下后再加抗原繼續(xù)乳化，直到抗原加完再乳化幾分鐘即可。2、抗原和

重組蛋白溶解復(fù)溶緩沖液和載體蛋白2023/05/16: 干粉形式的重組蛋白在常溫下能夠保持穩(wěn)定，大多數(shù)MCE重組蛋白以干粉形式發(fā)貨。凍干粉在使用前需進(jìn)行溶解，這時(shí)候會?？吹揭晃荒吧质煜さ摹芭笥选薄d體蛋白。溶解教學(xué)：Step1:判斷實(shí)驗(yàn)周期。短期實(shí)驗(yàn)=7天，溶解材料：復(fù)溶緩沖液、載體蛋白。Step2:開蓋前離心。凍干粉在運(yùn)輸過程中，會因?yàn)橥饬σ蛩卣掣接诠鼙诨蛘吖苌w上，在開蓋之前，先通過離心操作，將凍干粉收集于管底，避免損失和浪費(fèi)。建議10,000-12,000rpm高速離心30s；若沒有高速離心機(jī)，3,000-3,500rpm離心5min。Ste

核糖核酸是什么？2023/05/15: 核糖核酸的概述：核糖核酸存在于生物細(xì)胞以及部分病毒、類病毒中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酯鍵縮合而成長鏈狀分子。一個(gè)核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和堿基構(gòu)成。RNA的堿基主要有4種，即A腺嘌呤，G鳥嘌呤，C胞嘧啶，U尿嘧啶。其中，U(尿嘧啶)取代了DNA中的T胸腺嘧啶而成為RNA的特征堿基。與DNA不同，RNA一般為單鏈長分子，不形成雙螺旋結(jié)構(gòu)，但是很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結(jié)構(gòu)乃至三級結(jié)構(gòu)來行使生物學(xué)功能。RNA的堿基配對規(guī)則基本和DNA相同，不過除了A-U、G-C配

牛血清中球蛋白的作用2023/05/12: 1、球蛋白定義：球蛋白(G或GLB)是多種蛋白質(zhì)的混合物，包括具有防御作用而且含量較多的免疫球蛋白和補(bǔ)體、多種糖蛋白。2、球蛋白分類通過電泳的方法，球蛋白可分為α1，α2，β和γ球蛋白。它們大部分都是由肝臟合成。α1-球蛋白又分為α1-酸性糖蛋白和α脂蛋白。α1-酸性糖蛋白參與運(yùn)輸氨基己糖，α脂蛋白參與運(yùn)輸脂類。α2-球蛋白包括α2糖蛋白、纖溶酶原、凝血酶原、結(jié)合珠蛋白、銅藍(lán)蛋白和α2微球蛋白等。纖溶酶原、凝血酶原參與凝血。結(jié)合珠蛋白能和游離的血紅蛋白結(jié)合，防止血紅蛋白和鐵流失。銅藍(lán)蛋白參與銅代

Parafilm封口膜的產(chǎn)品特性及應(yīng)用范圍2023/05/11: Parafilm封口膜是一種可以自動封口、可模壓、韌性好的特制薄膜產(chǎn)品，廣泛用于分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)室。美國Parafilm封口膜具有*的滲透性能、*的水汽通透性能和很強(qiáng)的抗腐蝕性能。所有Parafilm封口膜產(chǎn)品的厚度均為0.005″（127µm）。能很輕松地打成“死結(jié)”是Parafilm®M封口膜的另一個(gè)全新特點(diǎn)。Parafilm®M封口膜的長度甚至可以拉伸到3～4倍而不會發(fā)生斷裂。Parafilm封口膜產(chǎn)品特性：美國Parafilm封口膜可以快速有效地密封實(shí)驗(yàn)室

基質(zhì)膠是什么？如何制備2023/05/10: 基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白EHS小鼠腫瘤中提取取的可溶性基底膜制備物，其主要成分由層粘連蛋白，Ⅳ型膠原，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等組成，還包如TGF-β、EGF、IGF、FGF等多種生長因子。在室溫條件下，基質(zhì)膠聚合形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì)，能模擬體內(nèi)細(xì)胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能，有利于體外細(xì)胞的培養(yǎng)和分化。凝膠制備方法1）基質(zhì)膠融化后，用預(yù)冷的槍頭混勻基質(zhì)膠。2）將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上，然后將培養(yǎng)的細(xì)胞與基質(zhì)膠混合，用遇冷的槍頭使細(xì)胞懸浮均勻。按照150-20

免疫熒光技術(shù)的特點(diǎn)及原理2023/05/09: 免疫熒光技術(shù)（Immunofluorescencetechnique）又稱熒光抗體技術(shù)，是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展最早的一種。它是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來的一項(xiàng)技術(shù)。很早以來就有一些學(xué)者試圖將抗體分子與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合，利用抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行組織或細(xì)胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。一、特點(diǎn)：該技術(shù)的主要特點(diǎn)是：特異性強(qiáng)、敏感性高、速度快。主要缺點(diǎn)是：非特異性染色問題尚未解決，結(jié)果判定的客觀性不足，技術(shù)程序也還比較復(fù)雜。熒光免疫法按反應(yīng)體系及定量方法不同，還可進(jìn)一步分做若干種。與放射免疫法相比，

細(xì)胞轉(zhuǎn)染的原理、操作步驟2023/05/08: 細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法主要包括：電穿孔法、磷酸鈣沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法、病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染等，理想的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法是具有高轉(zhuǎn)染效率、對細(xì)胞的毒性作用小等，本文主要介紹細(xì)胞轉(zhuǎn)染常用的方法-脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的原理和操作步驟。脂質(zhì)體(Liposome)轉(zhuǎn)染方法原理：脂質(zhì)體作為體內(nèi)和體外輸送載體的工具，已經(jīng)研究的十分廣泛，中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA，借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)。帶正電的陽離子脂質(zhì)體，DNA并沒有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中，而是帶負(fù)電的DNA自動結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上，形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復(fù)合物，從而吸附

RNA聚合酶的特點(diǎn)及分類2023/05/06: RNA聚合酶（RNApolymerase）是以一條DNA鏈或RNA為模板，三磷酸核糖核苷為底物、通過磷酸二酯鍵而聚合的合成RNA的酶，因?yàn)樵诩?xì)胞內(nèi)與基因DNA的遺傳信息轉(zhuǎn)錄為RNA有關(guān)，所以也稱轉(zhuǎn)錄酶。特點(diǎn)：RNA聚合酶催化RNA的合成，其與DNA聚合酶有許多相同的催化特點(diǎn)：①以DNA為模板；②催化核苷酸通過聚合反應(yīng)合成核酸；③聚合反應(yīng)是核苷酸形成3’，5’一磷酸二酯鍵的反應(yīng)；④以3’→5’方向閱讀模板，5’→3’方向合成核酸；⑤按照堿基配對原則忠實(shí)轉(zhuǎn)錄模板序列。分類：通?？筛鶕?jù)生物的類別，將R

脂質(zhì)體的制備2023/05/04: 一、囊泡形成的機(jī)制當(dāng)脂質(zhì)薄膜或脂質(zhì)結(jié)塊發(fā)生水合并且堆疊的液晶態(tài)雙層膜變得具有流動性和膨脹時(shí)，會形成脂質(zhì)體（脂質(zhì)囊泡）。水合的脂質(zhì)層在攪拌期間分離并自我密合形成龐大的多層囊泡（LMV），LMV可防止水與雙層膜的碳?xì)浠衔锖诵脑谶吘壈l(fā)生相互作用。一旦形成這些顆粒，將需要聲能（超聲）或機(jī)械能（擠出）形式的能量輸入才能減小粒徑。二、脂質(zhì)體制備方法脂質(zhì)配方的性質(zhì)取決于具體成分（陽離子、陰離子和中性脂質(zhì)）。但是，同一種制備方法適用于所有成分的脂質(zhì)囊泡。制備流程的一般要素包括制備用于水合的脂質(zhì)、攪拌水合以及減

使用細(xì)胞爬片時(shí)的準(zhǔn)備及操作方法有哪些？2023/04/25: 浸泡并過夜，第二天先用自來水沖洗20遍，再置于無水酒清中浸泡6小時(shí)，再用三蒸水沖洗3遍（個(gè)人認(rèn)為主要目的是將酸沖洗干凈就可以了，如果不干凈的話，細(xì)胞帖壁不好），放在飯盒或者玻璃培養(yǎng)皿中烘干后進(jìn)行高壓消毒。高壓后取出放入烤箱中烤干，備用?？靖珊罂煞湃氤瑑襞_中。4.多聚賴氨酸的使用：很多人都將玻片用此處理，以使細(xì)胞與玻片結(jié)合更牢。但我在做爬片時(shí)從來沒用過多聚賴氨酸，細(xì)胞貼壁仍然很好，且在做后續(xù)的免疫細(xì)胞化學(xué)染色、TUNEL等凋亡檢測、免疫熒光等也從未脫過片。細(xì)胞爬片的操作1.胰酶消化細(xì)胞后計(jì)數(shù)重懸細(xì)

胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)的使用說明2023/04/24: 產(chǎn)品說明：在組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)和原代細(xì)胞培養(yǎng)中的組織細(xì)胞分散（將組織塊制備成單個(gè)細(xì)胞懸液）以及傳代細(xì)胞培養(yǎng)中，貼壁生長細(xì)胞的消化分散均要使用組織細(xì)胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶，EDTA等，其功能主要是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)（如細(xì)胞外基質(zhì)）水解，使組織或貼壁細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液用于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。胰蛋白酶-EDTA消化液(Trypsin-EDTASolution)含0.25%胰酶和0.02%EDTA（0.53mM），溶于無鈣鎂平衡鹽溶液中，經(jīng)過濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞和組織的消化。胰蛋

天然培養(yǎng)基的用途有哪些？2023/04/23: 1.蛋白質(zhì)：雖然蛋白質(zhì)是血清的主要成分，但許多蛋白質(zhì)的功能在體外情況下所剩無幾，而有幾種有關(guān)的蛋白質(zhì)可能是需要的，例如攜帶礦物質(zhì)、脂肪酸、激素的蛋白。已知可滿足這些需求的蛋白質(zhì)有：白蛋白，它作為脂類或礦物質(zhì)及球蛋白的一種攜帶者；纖連蛋白（冷不溶性球蛋白），它可促進(jìn)細(xì)胞貼壁；α2-巨球蛋白，它是胰酶的抑制劑。此外，胎兒血清中的胎球蛋白可增進(jìn)細(xì)胞的貼附；轉(zhuǎn)鐵蛋白可結(jié)合鐵離子，使其毒性減小而具有生物可利用性。其他一些未知的蛋白質(zhì)對于細(xì)胞的貼附和生長可能也是必需的。蛋白質(zhì)還可增加培養(yǎng)基的成泡性，在吹打和

培養(yǎng)基配置與儲存2023/04/18: 實(shí)驗(yàn)材料基礎(chǔ)培養(yǎng)基（液體或干粉）；PET/PETG方形試劑瓶；血清（常規(guī)為FBS/NBS）；補(bǔ)充劑；移液槍；電動移液槍；15mL、50mL無菌離心管；滅菌超純水；盒裝無菌吸頭；血清移液管；超凈工作臺；雙抗（青鏈霉素混合液）；杯式濾器(0.22μmPES膜)；針式濾器(0.22μmPES膜)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備血清準(zhǔn)備：配置培養(yǎng)基前一天，將所需血清從-20℃冰庫取出，放置入2-8℃冰箱緩慢解凍儲存，使用前37℃水浴加熱。培養(yǎng)基準(zhǔn)備：液體基礎(chǔ)培養(yǎng)基使用前37℃水浴加熱。實(shí)驗(yàn)流程基礎(chǔ)培養(yǎng)基配置（干粉）：根據(jù)配置體

液體培養(yǎng)基的配制原則2023/04/11: 根據(jù)培養(yǎng)目的需要選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)由于微生物營養(yǎng)類型復(fù)雜，不同微生物有不同的營養(yǎng)要求。因此，要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)，配制針對性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)微生物有較強(qiáng)的合成能力，能以簡單的無機(jī)物如co2和無機(jī)鹽合成復(fù)雜的細(xì)胞物質(zhì)。因此，培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應(yīng)由簡單的無機(jī)物組成。異養(yǎng)微生物的合成能力較弱，不能以CO2作為碳源或主要碳源，故應(yīng)在培養(yǎng)基中至少添加一種有機(jī)物。注意營養(yǎng)物質(zhì)的濃度與配比要合適微生物只有在營養(yǎng)物質(zhì)濃度及其比例合適時(shí)才能良好生長。營養(yǎng)物質(zhì)濃度過低不能滿足現(xiàn)生長需要，

透明質(zhì)酸酶的作用與用途2023/03/16: 透明質(zhì)酸酶（hyaluronidase,HAase）是能使透明質(zhì)酸產(chǎn)生水解作用酶的總稱，是一種能夠降低透明質(zhì)酸的活性，從而提高組織中液體滲透能力的酶。作用與用途：是一種能水解透明質(zhì)酸的酶（透明質(zhì)酸為組織基質(zhì)中具有限制水分及其他細(xì)胞外物質(zhì)擴(kuò)散作用的成分），用于人體暫時(shí)降低細(xì)胞間質(zhì)的粘性，可促使皮下輸液、局部積貯的滲出液或血液加快擴(kuò)散而利于吸收，為一種重要的藥物擴(kuò)散劑。注意事項(xiàng)：1、該產(chǎn)品對水是稍有危害的，不要讓未稀釋或者大量的產(chǎn)品接觸地下水、水道或污水系統(tǒng)，若無政府許可，勿將材料排入周圍環(huán)境。2、

CCK-8試劑盒的操作步驟2023/03/08: CCK-8試劑盒，是用于測定細(xì)胞增殖或毒性實(shí)驗(yàn)中活細(xì)胞數(shù)目的一種高靈敏度，無放射性的比色檢測法。CCK法應(yīng)用非常廣泛，如藥物篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗(yàn)以及生物因子的活性測驗(yàn)等。操作步驟：1、在96孔板中配置100μl的細(xì)胞懸液，將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24小時(shí)（在37℃，5%CO2的條件下）。2、向培養(yǎng)板加入10μl不同濃度的待測物質(zhì)。3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r(shí)間（例如6、12、24或48小時(shí)）。4、向每孔加入10μlCCK-8溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響

TRIZOL的原理和作用2023/02/28: 基本原理：TRIZOL是一種新型總RNA抽提試劑，采用變性劑即內(nèi)含異硫氰酸胍、酚和β-疏基乙醇等變性物質(zhì)，能迅速破碎細(xì)胞，抑制細(xì)胞釋放出的核酸酶。各組分作用：苯/酚：主要作用是裂解細(xì)胞，使細(xì)胞中的蛋白和核酸物質(zhì)解聚得到釋放。苯/酚雖可有效地變性蛋白質(zhì)，但不能抑制RNA酶活性。異硫氰酸胍：屬于解偶劑，是一類強(qiáng)力的蛋白質(zhì)變性劑，可溶解蛋白質(zhì)，并使蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)消失，細(xì)胞結(jié)構(gòu)降解，核蛋白迅速與核酸分離，保護(hù)RNA完整性。β-疏基乙醇：β-疏基乙醇主要破壞RNase蛋白質(zhì)中的二硫鍵。8-羥基喹/啉：0.

細(xì)胞培養(yǎng)可以分為哪幾種？2023/02/20: 細(xì)胞培養(yǎng)（cellculture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對于整個(gè)生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)過程，細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)模克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞，這是克隆技術(shù)的環(huán)節(jié)，而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技

胎牛血清給細(xì)胞提供的益處，有哪六個(gè)方面？2023/02/14: 胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的添加培養(yǎng)基。它營養(yǎng)豐富，大約含有三四百種不同成分，具有基礎(chǔ)培養(yǎng)基所不具備的營養(yǎng)因子。它給細(xì)胞提供的益處主要有六個(gè)方面：1.提供細(xì)胞生長所需的天然激素或天然生長因子,如胰島素、IGFII等。2.提供天然的結(jié)合蛋白如胎球蛋白、白蛋白等，能識別氨基酸、脂質(zhì)、金屬離子和激素等，能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。胎球蛋白（Fetuin），具有多個(gè)鈣離子結(jié)合位點(diǎn)，能調(diào)節(jié)血清中的鈣離子濃度。3.提供細(xì)胞外基質(zhì)成分，便于細(xì)胞粘附、貼壁、鋪展。當(dāng)然，有些細(xì)胞也能分泌部分外基質(zhì)成分，但血清中的更不可

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