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RNA保存的*解決方案2021/10/25: 一旦生物樣品被收集采摘，它的RNA會(huì)立刻變得非常不穩(wěn)定，極易被降解。由于特異及非特異的RNA降解，或者由于應(yīng)激反應(yīng)產(chǎn)生新的RNA都會(huì)引起RNA狀態(tài)的改變。對(duì)于生物芯片、基因表達(dá)矩陣分析（ArrayAnalysis）、定量RT-PCR等實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)，采樣后立即穩(wěn)定樣品里的RNA以保存當(dāng)時(shí)RNA的表達(dá)狀態(tài)，是精確/定量研究基因表達(dá)分析的重要前提。為了達(dá)到這個(gè)目的，往往需要將液氮或者干冰帶到采樣現(xiàn)場(chǎng)，采樣后立即運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室保存。對(duì)于實(shí)驗(yàn)者來(lái)說(shuō)，無(wú)論是采樣還是將樣品取出以抽提RNA都非常不方便。QIAGEN公

對(duì)于臍帶血究竟液氮罐能凍存多久？2021/10/23: 提起臍帶血，大多數(shù)人并不陌生，但對(duì)于臍帶血究竟能凍存多久，真正的答案還需要時(shí)間來(lái)證明。液氮罐臍帶血儲(chǔ)存的高年限是在不斷變動(dòng)中的，由于全球范圍內(nèi)成立時(shí)間最長(zhǎng)的臍帶血儲(chǔ)存機(jī)構(gòu)僅有25年的歷史，目前還沒(méi)有實(shí)際的數(shù)據(jù)來(lái)證明臍帶血的儲(chǔ)存年限究竟可以達(dá)到多久。臍帶血究竟能凍存多久？一起來(lái)看看真相從冷凍生物學(xué)理論分析，在-196℃深低溫條件下，細(xì)胞的活性可以長(zhǎng)期保存。澳大利亞扎多斯·蘭丁市的一名商業(yè)聯(lián)絡(luò)經(jīng)理威恩·庫(kù)恩在醫(yī)院中冷凍了自己的一部分精zi，21年后解凍同他妻子的卵子進(jìn)行人工人工授精，成功誕下了一個(gè)3

關(guān)于液氮罐的基本結(jié)構(gòu)2021/10/23: 在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，很多實(shí)驗(yàn)條件及材料的處理和保存都需要特殊的低溫環(huán)境。液氮是提供低溫的常用物質(zhì)之一，可用于凍存細(xì)胞和保存疫苗等。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，液氮的用途越來(lái)越廣泛，在醫(yī)院里也被用來(lái)進(jìn)行冷療，在金屬物質(zhì)的特性研究和電子儀器方面也被廣泛應(yīng)用，所以用于存儲(chǔ)液氮的容器即液氮罐，就成為生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中常用的低溫設(shè)備之一。杜瓦瓶存儲(chǔ)液氮，液氨，液氧的生物容器，因?yàn)?初創(chuàng)造的人叫杜瓦，所以又稱杜瓦罐，因?yàn)槌４鎯?chǔ)液氮，所以常被叫做液氮罐。液氮擁有超低溫的-196度，可以很好的保存生物細(xì)胞，胚

哪些方面采血管的問(wèn)題會(huì)影響到檢測(cè)結(jié)果呢2021/10/23: 血液標(biāo)本的采集是檢驗(yàn)標(biāo)本采集中最多也是最重要的工作,對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果影響顯著,采血管是血液標(biāo)本采集質(zhì)量中的主要環(huán)節(jié),為降低標(biāo)本采集中采血管的質(zhì)量問(wèn)題,自動(dòng)化儀器的大量使用及血液的保存對(duì)血樣原始性狀穩(wěn)定性提出了更高的要求，使真空采血技術(shù)突破了僅僅只為安全的要求，其準(zhǔn)確性、標(biāo)本的原始性狀、維持時(shí)間及管機(jī)配合、試管強(qiáng)度等性能指標(biāo)都可以作為評(píng)價(jià)真空采血管品質(zhì)的依據(jù)。真空采血管的質(zhì)量要做到什么標(biāo)準(zhǔn)制造試管的基礎(chǔ)材料要求比較高,需要具有相當(dāng)高的硬度、高透明度、不易破損、盡可能低的透氣率和透水率。玻璃雖然透明度高、

BD VACUTAINER 真空采血基本技術(shù)2021/10/23: BDVACUTAINER真空采血技術(shù)與傳統(tǒng)注射器采血大同小異，通過(guò)學(xué)習(xí)和練習(xí)可以很快熟練掌握確認(rèn)根據(jù)臨床醫(yī)生開(kāi)具的化驗(yàn)單，仔細(xì)核對(duì)患者身份及檢查項(xiàng)目。姿勢(shì)協(xié)助患者擺好姿勢(shì)，準(zhǔn)備采血。正確的采血姿勢(shì)為：患者采取坐姿，上身與地面垂直，肘部置于穩(wěn)固的操作臺(tái)面，肘關(guān)節(jié)下墊彈性棉墊，以使患者上臂與前臂呈直線，手掌略低于肘部，以充分暴露肘部靜脈。用品準(zhǔn)備好全套采血用品(包括：標(biāo)準(zhǔn)采血雙向針、持針器、相應(yīng)真空采血管、消毒用酒精棉片、壓脈帶）。選擇靜脈讓患者握拳，檢查患者手臂，選擇一根適合采血的靜脈。標(biāo)記根據(jù)各

如何選擇流式細(xì)胞儀2021/10/22: 自七十年代出現(xiàn)第一代流式細(xì)胞儀以來(lái)，隨著計(jì)算機(jī)技術(shù)、電子制造技術(shù)、激光技術(shù)及熒光素合成技術(shù)的不斷發(fā)展，現(xiàn)代流式細(xì)胞儀已今非昔比，制造工藝、功能、精確度有了質(zhì)的飛躍。流式細(xì)胞儀生產(chǎn)廠商推出各種不同型號(hào)的流式細(xì)胞儀來(lái)滿足用戶的不同需要?，F(xiàn)生產(chǎn)流式細(xì)胞的廠商全球至少有六家，各廠商產(chǎn)品又有不同的系列，各具特點(diǎn)。如何從眾多的型號(hào)中挑選出zui適合自己的機(jī)型，我們還需從分析應(yīng)用出發(fā)，評(píng)估自己的需求來(lái)決定什么樣的流式細(xì)胞儀*性價(jià)比、zui適合自己。⑴、DNA倍體分析DNA分析是流式細(xì)胞儀最初且是現(xiàn)在應(yīng)用*檢測(cè)

流式細(xì)胞術(shù)常見(jiàn)問(wèn)題集錦2021/10/22: 1、流式細(xì)胞儀上的FL2-WFL2-AFL2-H分別是做什么的？FL2-W是只檢測(cè)熒光的脈沖寬度，F(xiàn)L2-H是指脈沖高度。通常在做細(xì)胞周期分析時(shí)應(yīng)用，用于去除粘連細(xì)胞。2、流式同型對(duì)照怎樣選擇？同型對(duì)照（IsotypeControl）：使用與一抗相同種屬來(lái)源、相同亞型、相同劑量和相同的免疫球蛋白及亞型的免疫球蛋白，用于消除由于抗體非特異性結(jié)合到細(xì)胞表面而產(chǎn)生的背景染色。如果一抗是多抗，可以用annormalserum（與一抗相同的正常血清）（mustbethesamespeciesasprima

如何看流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果中的圖2021/10/22: FCM數(shù)據(jù)的存貯的方式是FCS2.0（flowcytometrystandard），采用列表排隊(duì)(ListMode)方式。易于加工處理分析，但缺乏直觀性，數(shù)據(jù)的顯示通常有一維直方圖、二維點(diǎn)圖、等高線圖、密度圖等幾種；由數(shù)據(jù)還可以做出標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量分析。Q1：坐標(biāo)軸的意義？1、單參數(shù)直方圖每一個(gè)細(xì)胞單參數(shù)的測(cè)量數(shù)據(jù)可以整理成統(tǒng)計(jì)分布，以直方圖的方式來(lái)顯示。在圖中，橫坐標(biāo)表示熒光信號(hào)或散射光信號(hào)相對(duì)強(qiáng)度的值，其單位是道數(shù)（channel），可以是線形（line）或者對(duì)數(shù)（log）?？v坐標(biāo)一般是相對(duì)

流式細(xì)胞術(shù)數(shù)據(jù)處理與分析2021/10/22: 數(shù)據(jù)的顯示通?？煞譃橐痪S單參數(shù)直方圖（histogramplot）、二維點(diǎn)圖（dotplot）、二維等高圖（contour）和假三維圖（pseudo3D）等。下面簡(jiǎn)述zui常用的單參數(shù)直方圖和二維點(diǎn)圖。1.單參數(shù)直方圖單參數(shù)直方圖是一維數(shù)據(jù)用得最多的圖形，可用來(lái)進(jìn)行定性分析和定量分析。橫坐標(biāo)表示熒光信號(hào)或散射光信號(hào)強(qiáng)度的相對(duì)值，其單位用“道數(shù)”（channel）表示，橫坐標(biāo)可以是線性的，也可以是對(duì)數(shù)的?？v坐標(biāo)通常代表細(xì)胞出現(xiàn)的頻率或相對(duì)細(xì)胞數(shù)。下面以研究細(xì)胞周期為例說(shuō)明如何分析單參數(shù)直方圖所表達(dá)

流式細(xì)胞術(shù)2021/10/22: 流式細(xì)胞術(shù)（FlowCytometry，F(xiàn)CM）是一種對(duì)液流中排成單列的細(xì)胞或其它生物微粒（如微球，細(xì)菌，小型模式生物等）逐個(gè)進(jìn)行快速定量分析和分選的技術(shù)。作為應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行檢測(cè)的技術(shù)平臺(tái)，現(xiàn)代流式細(xì)胞儀產(chǎn)生于上世紀(jì)六七十年代。經(jīng)過(guò)近四十年的發(fā)展和完善，今天的流式細(xì)胞儀已經(jīng)十分成熟，并被廣泛的運(yùn)用于從基礎(chǔ)研究到臨床實(shí)踐的各個(gè)方面，涵蓋了細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、血液學(xué)、腫瘤學(xué)、藥理學(xué)、遺傳學(xué)及臨床檢驗(yàn)等領(lǐng)域，在各學(xué)科中發(fā)揮著重要的作用。流式細(xì)胞術(shù)-概述一種在液流系統(tǒng)中，快速測(cè)定單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞器的生

流式細(xì)胞術(shù)的常用樣品制備方法2021/10/21: 單細(xì)胞懸液流式細(xì)胞術(shù)的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)對(duì)象是單細(xì)胞懸液，因此，在組織化學(xué)和免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)中欲對(duì)待測(cè)樣品細(xì)胞進(jìn)行分類(lèi)計(jì)數(shù)，也需把樣品制備成細(xì)胞懸液，并要求被檢細(xì)胞大小為0.2～80pm，每個(gè)樣品中至少有20000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞濃度為105～107個(gè)／ml。制備成的單細(xì)胞懸液經(jīng)熒光或免疫熒光標(biāo)記即可上機(jī)檢測(cè)。一．單細(xì)胞懸液的制備1.棄去培養(yǎng)細(xì)胞(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期)中的舊培養(yǎng)液，加入1～2ml0.25％胰蛋白酶，倒置顯微鏡下觀察，見(jiàn)細(xì)胞稍變圓時(shí)，停止胰蛋白酶作用。也可直接觀察培養(yǎng)瓶，靜置消化2～3分鐘，待細(xì)胞逐漸變

經(jīng)常使用留置針應(yīng)該怎么正確維護(hù)2021/10/19: 靜脈留置針又稱靜脈套管針。核心的組成部件包括可以留置在血管內(nèi)的柔軟的導(dǎo)管/套管,以及不銹鋼的穿刺引導(dǎo)針芯。使用時(shí)將導(dǎo)管和針芯一起穿刺入血管內(nèi)，當(dāng)導(dǎo)管全部進(jìn)入血管后，回撤出針芯，僅將柔軟的導(dǎo)管留置在血管內(nèi)從而進(jìn)行輸液治療。留置針的使用能減少患兒因反復(fù)靜脈穿刺而造成的痛苦及對(duì)打針的恐懼感，減輕家長(zhǎng)的焦躁情緒，便于臨床用藥，急、危重患者的搶救用藥，減輕護(hù)士的工作量，減少患兒疼痛，因而靜脈留置針在臨床廣泛應(yīng)用，面對(duì)患兒這一特殊群體，靜脈留置針留置時(shí)間的長(zhǎng)短和患兒的舒適成為護(hù)士及家長(zhǎng)最為關(guān)注的問(wèn)題，也是留

PCR引物設(shè)計(jì)2021/10/18: PCR引物設(shè)計(jì)的目的是為了找到一對(duì)合適的核苷酸片段，使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列。因此，引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。要設(shè)計(jì)引物首先要找到DNA序列的保守區(qū)。同時(shí)應(yīng)預(yù)測(cè)將要擴(kuò)增的片段單鏈?zhǔn)欠裥纬啥?jí)結(jié)構(gòu)。如這個(gè)區(qū)域單鏈能形成二級(jí)結(jié)構(gòu)，就要避開(kāi)它。如這一段不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu)，那就可以在這一區(qū)域設(shè)計(jì)引物?，F(xiàn)在可以在這一保守區(qū)域里設(shè)計(jì)一對(duì)引物。一般引物長(zhǎng)度為15~30堿基，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為100~600堿基對(duì)。讓我們先看看P1引物。一般引物序列中G+C含量一般為40%~60%。而且四種堿

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）2021/10/18: 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）實(shí)驗(yàn)方法原理基本原理類(lèi)似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)做準(zhǔn)備；②模板DNA與引物的退火(復(fù)性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合；③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在Taq

RNA 操作注意事項(xiàng)與實(shí)驗(yàn)技巧2021/10/17: 一、操作注意事項(xiàng)：由于RNA酶的廣泛存在與難以滅活的頑固特性。使得RNA的提取純化和后續(xù)工作變得非常困難。為了保證RNA的研究工作成功，請(qǐng)仔細(xì)閱讀下列注意事項(xiàng)，相信它能幫助您解決常見(jiàn)的問(wèn)題。歸根究底，RNA工作的主要問(wèn)題是防止RNA酶的污染。RNA酶無(wú)處不在，在實(shí)驗(yàn)操作的任何一步，任何偶然的疏忽或不當(dāng)操作都有可能造成RNA酶污染，從而導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)失敗。因此，嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件，避免任何可能的污染是保證實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵，必須做到以下幾點(diǎn)：1.如果可能，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)辟出專(zhuān)門(mén)RNA操作區(qū)，離心機(jī)、移液槍、試劑

PAXgene Blood RNA Kit產(chǎn)品性能2021/10/17: PAXgeneBloodRNAKit產(chǎn)品性能PAX基因血rna管適用于采集全血并穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)rna，在18-25°C條件下可穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)3天(參見(jiàn)“RNA在18-25°C：FOS的穩(wěn)定性“和”RNA在18-25°C：IL1B的穩(wěn)定性“)，或在2-8°C條件下穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)5天(參見(jiàn)”RNA在2-8°C：FOS的穩(wěn)定性“和”RNA在2-8°C：IL1B的穩(wěn)定性“，和表格)，高度適合于臨床診斷檢測(cè).ReproducibleａndrepeatableRNApurification.Quadruplicateblo

FFPE組織樣品的DNA和RNA純化2021/10/14: 福爾馬林固定后石蠟包埋的組織簡(jiǎn)稱為FFPE樣品。將組織在4–10%的福爾馬林中迅速固定。固定時(shí)間限制在14–24小時(shí)(越長(zhǎng)的固定時(shí)間將越容易導(dǎo)致DNA的片段化，對(duì)下游實(shí)驗(yàn)不利)。將固定組織*脫水(*脫去福爾馬林殘余，因?yàn)槠渥璧K蛋白酶K的作用)。純化DNA時(shí)，使用新鮮從石蠟塊上切下的組織，每次制備最大量：.每片10μm.最多8片,每片大約250mm2,如果對(duì)樣品總量和產(chǎn)量沒(méi)有把握，建議用2-3片樣品進(jìn)行一次預(yù)實(shí)驗(yàn)。QIAampDNAFFPETissueFFPE組織樣品DNA操作流程■去除石蠟：融解

真空采血管，可能引起的危險(xiǎn)與解決措施2021/10/14: 真空采血管現(xiàn)在國(guó)內(nèi)大部分醫(yī)院應(yīng)該都已經(jīng)采用了，我們科室采用時(shí)間不算長(zhǎng)，1年多一點(diǎn)，使用起來(lái)效果好，但隨之而來(lái)的，就有一個(gè)問(wèn)題，就是采血時(shí)，采集出的血液有可能回流回血管的問(wèn)題。見(jiàn)下文：如何防止真空采血管采取的血液逆流？1937年發(fā)明真空采血管，1943年在歐美開(kāi)始流通，隨之在實(shí)踐使用中不斷的日趨完善，1964年間真空采血管在日本登場(chǎng)，1971年在日本正式使用。在改革開(kāi)放以后流人我國(guó)，九十年代部分醫(yī)院開(kāi)始使用，現(xiàn)今國(guó)產(chǎn)的真空采血管己占醫(yī)療市場(chǎng)的主導(dǎo)地位。高品質(zhì)的國(guó)產(chǎn)真空采血管逐步替代進(jìn)口同類(lèi)產(chǎn)品，有

各種檢驗(yàn)采血管的使用操作技術(shù)（含圖）2021/10/14: 一．促、抗凝采血管的介紹（一次性自動(dòng)定量真空采血器）一次性自動(dòng)定量真空采血器是由硅化真空采血管與雙向采血針組合而成，巧妙的利用真空負(fù)壓的原理，將采血管抽成不同的真空度，以達(dá)到自動(dòng)定量的目的，是集采血與盛血為一體的新型采血、驗(yàn)血工具。簡(jiǎn)便快捷預(yù)先添加各種添加劑，無(wú)需臨時(shí)配制。一針多管，減少重復(fù)操作，減輕患者痛苦。實(shí)現(xiàn)采血與檢驗(yàn)一管操作，直接上機(jī)，節(jié)省檢驗(yàn)操作時(shí)間。準(zhǔn)確可靠確保真空，采血量準(zhǔn)確，并采用*的硅化處理技術(shù)，能確保血樣的原始性狀。抗凝劑配比科學(xué)，檢測(cè)結(jié)果可靠。采血與檢驗(yàn)可全程封閉，避免血樣

真空采血管的采血順序2021/10/14: 現(xiàn)在大家基本上普及了方便安全的真空采血管，取代了以前的注射器采血，但卻并非每個(gè)人都清楚正確的采血順序。關(guān)于采血順序包括采血管廠商提供的采血順序也未必正確。醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理了以下內(nèi)容，供大家參考：根據(jù)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T225-2002《臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的收集與處理》中規(guī)定：如果一次采血要采取幾個(gè)標(biāo)本時(shí)，應(yīng)推薦以下順序采血：a、血培養(yǎng)管；b、無(wú)添加劑管；c、凝血試驗(yàn)管；d、有添加劑的管（不同添加劑管按以下順序采血：1、枸櫞酸鹽管；2、肝素管；3、EDTA管；4、草酸鹽/氟化物管）。日本標(biāo)準(zhǔn)：

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