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白益生物-抗體的制備方法和原理之抗血清的制備2023/05/29: 一、用于免疫的動(dòng)物作免疫用的動(dòng)物有哺乳類和禽類，主要為羊、馬、家兔、猴、豬、豚鼠、雞等，實(shí)驗(yàn)室常用者為家兔、山羊和豚鼠等。動(dòng)物種類的選擇主要根據(jù)抗原的生物學(xué)特性和所要獲得抗血清數(shù)量，如一般制備抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因動(dòng)物反應(yīng)良好，而且能夠提供足夠數(shù)量的血清，用于免疫的動(dòng)物應(yīng)適齡，健壯，無(wú)感染性疾患，為雄性，此外還需十分注意動(dòng)物的飼養(yǎng)，以消除動(dòng)物的個(gè)體差異以及在免疫過(guò)程中死亡的影響。若用兔，用純種新西蘭兔，一組三只，兔的體重以2～3kg為宜。二、免疫途徑免疫途徑有多種多樣，如靜脈

講講大鼠elisa試劑盒使用前的注意事項(xiàng)2023/05/11: 大鼠elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，往預(yù)先包被大鼠組織蛋白酶捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠組織蛋白酶呈正相關(guān)，用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，計(jì)算樣品濃度。大鼠elisa試劑盒的注意事項(xiàng)：1.使用前請(qǐng)保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請(qǐng)廢棄。2.微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置，會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請(qǐng)

植物安排制備基因組DNA操作方法2023/05/05: 1.ELISA試劑盒收取10~50g新鮮的植物安排。2.植物安排用冷的無(wú)菌水洗刷、吸干，放人液氮中凍結(jié)，用研缽和研杵研成細(xì)粉。3.將凍結(jié)的細(xì)粉放入250ml的離心瓶中，立即參加抽提緩沖液約每克植物5~10ml，輕輕攪拌混勻。4.參加十二烷基肌氨酸鈉使終濃度達(dá)1%，于溫育1~2h。5.用JA-14轉(zhuǎn)子4℃，5500g離心10min保存上清，必要時(shí)重復(fù)此歩驟以除掉殘?jiān)?.加人0.6體積yi丙醇，混合，假如看不見(jiàn)沉積，于-20℃放置30min，用JA-14轉(zhuǎn)子4℃，7500g離心15min，棄上清。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)2023/04/26: 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linkedimmunesorbentassay,ELISA)是Engvall和Vanweemen于1971年提出的。該法是以固相載體吸附技術(shù)和免疫酶技術(shù)相結(jié)合建立的一種檢測(cè)方法，其操作簡(jiǎn)便，無(wú)需特殊設(shè)備，并具有高度的敏感性和準(zhǔn)確性，所以受到大家的廣泛重視，以致在較短時(shí)間內(nèi)，于國(guó)內(nèi)外均取得了較快的進(jìn)展。(一)主要的技術(shù)類型ELISA的技術(shù)類型很多，但以檢測(cè)抗體的間接法，及測(cè)定抗原的雙抗體夾心法最chang用，現(xiàn)將其操作流程分別簡(jiǎn)介如下。1.間接法首先將已知標(biāo)準(zhǔn)抗原

酶標(biāo)記結(jié)合物2023/04/19: 結(jié)合物即酶標(biāo)記的抗體（或抗原），是ELISA中最關(guān)鍵的試劑。良好的結(jié)合物應(yīng)該是既保有酶的催化活性，也保持了抗體（或抗原）的免疫活性。結(jié)合物中酶與抗體（或抗原）之間有恰當(dāng)?shù)姆肿颖壤?，在結(jié)合試劑中應(yīng)盡量不含有或少含有游離的（未結(jié)合的）酶或游離的抗體（或抗原）。此外，結(jié)合物尚要有良好的穩(wěn)定性。（1）酶用于ELISA的酶應(yīng)符合以下要求：純度高，催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高，專一性強(qiáng)，性質(zhì)穩(wěn)定，來(lái)源豐富，價(jià)格不貴，制備成酶結(jié)合物后仍繼續(xù)保留它的活性部分和催化能力。最好在受檢標(biāo)本中不存在相同的酶。另外，它的相應(yīng)底物易

ELISA中的試劑－酶的底物相關(guān)知識(shí)！2023/04/11: 酶的底物HRP的底物HRP催化過(guò)氧化物的氧化反應(yīng)，最ju代表性的過(guò)氧化物為H2O2，其反應(yīng)式如下：DH2+H2O2D+H2O上式中，DH2為供氧體，H2O2為受氫體。在ELISA中，DH2一般為無(wú)色化合物，經(jīng)酶作用后成為有色的產(chǎn)物，以便作比色測(cè)定。常用的供氫體有鄰苯二胺(O-phenylenediamine,OPD)、四甲基聯(lián)苯胺(3,3',5,5'-tetramethylbenzidine,TMB)和ABTS[2,2'-azino-di-(3-ethylbenziazobinesulfonat

ELISA實(shí)驗(yàn)質(zhì)量控制問(wèn)題2023/03/27: 1.1基本概念1.1.1質(zhì)量控制（QuailityControl,Q.C）質(zhì)量控制是監(jiān)視全過(guò)程，排除誤差，防止變化，維持標(biāo)準(zhǔn)化現(xiàn)狀的一個(gè)管理過(guò)程。這一過(guò)程是通過(guò)一個(gè)反饋環(huán)路進(jìn)行的。1）確定控制的對(duì)象；2）規(guī)定控制對(duì)象的標(biāo)準(zhǔn)（預(yù)期值）；3）制定或選擇控制方法和手段；3）測(cè)量實(shí)際數(shù)據(jù)；4）比較或較對(duì)實(shí)際數(shù)據(jù)與預(yù)期值之間的差異，并說(shuō)明產(chǎn)生這一差異的原因。超出預(yù)定誤差范圍，報(bào)警系發(fā)出信號(hào)，反饋通道中斷。5）采取行動(dòng)，解決差異?；謴?fù)原狀（原標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)）的手段發(fā)揮作用。質(zhì)量控制主要采用質(zhì)控圖進(jìn)行。質(zhì)控圖是把某

ELISA試劑盒的主要四大優(yōu)勢(shì)2023/03/24: 上海白益的ELISA試劑盒其擁有靈敏度高、特異性好等特點(diǎn)，一直受到眾多科研工作者的喜愛(ài)。除去公司服務(wù)與產(chǎn)品服務(wù)，我司分析出了試劑盒的主要四大優(yōu)勢(shì)：1.可以大規(guī)模測(cè)定樣品：如有成千上萬(wàn)份樣品需要進(jìn)行檢測(cè)，免疫酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內(nèi)完成。2.樣品易保存：經(jīng)過(guò)酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。3.使用效果好①專一性強(qiáng)，抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng)，而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，所檢測(cè)的對(duì)象是抗原(或抗體)，使用的抗體除標(biāo)記了酶以外，與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無(wú)多大差別。②靈敏度

影響細(xì)胞株凍存的因素2023/03/20: 你們細(xì)胞是怎么凍存的?求解!!!我的是4度冰箱放半小時(shí),-20度冰箱半小時(shí),然后轉(zhuǎn)移到-80度冰箱!但是放在-80度冰箱1個(gè)月后,細(xì)胞復(fù)蘇就感覺(jué)狀態(tài)不太好了!!做實(shí)驗(yàn)前要先學(xué)會(huì)凍存，以備自己在后面的實(shí)驗(yàn)中能保持同一來(lái)源、穩(wěn)定可靠的細(xì)胞，且可減少污染或其它不利影響。影響凍存細(xì)胞活性的因素1、細(xì)胞凍存保護(hù)劑：常用的有二甲基亞砜（DMSO）和甘油，常用的濃度為5%-10%（90%小牛血清）。DMSO對(duì)二倍體細(xì)胞的毒性較甘油小。2、細(xì)胞懸液的凍結(jié)速度：慢凍時(shí)冰凍在細(xì)胞外形成，因此不致?lián)p害細(xì)胞。多數(shù)細(xì)胞以

結(jié)晶紫染色液染色原理2023/03/10: 結(jié)晶紫染色液(CrystalVioletStainingSolution)是一種組織或細(xì)胞染色時(shí)常用的可以把細(xì)胞核染成深紫色的染色液。結(jié)晶紫是一種堿性染料，可以與細(xì)胞核中的核酸結(jié)合把核染成藍(lán)色。無(wú)論活細(xì)胞還是死細(xì)胞都可以染色，但要染活細(xì)胞必須控制濃度。結(jié)晶紫染色液在中性、堿性或弱酸性溶液中，細(xì)菌細(xì)胞通常帶負(fù)電荷，而堿性染料在電離時(shí)，其分子的染色部分帶正電荷(酸性染料電離時(shí)，其分子的染色部分帶正電荷)，因此堿性染料的染色部分很容易與細(xì)菌結(jié)合使細(xì)菌著色。染色后的細(xì)菌細(xì)胞與背景形成鮮明的對(duì)比，在顯微鏡

標(biāo)準(zhǔn)品（標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)）簡(jiǎn)介2023/03/07: 標(biāo)準(zhǔn)品即標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，是中藥標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品研究中心代理的作為一種衡量標(biāo)準(zhǔn)；用做藥物方面，則為含量測(cè)定中的標(biāo)準(zhǔn)含量。標(biāo)準(zhǔn)品包括化學(xué)計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)品、冶金標(biāo)準(zhǔn)品和藥檢標(biāo)準(zhǔn)品。國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)品是指國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)中用于鑒別、檢查、含量測(cè)定、雜質(zhì)和有關(guān)物質(zhì)檢查等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，它是國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)不可分割的組成部分。國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)的物質(zhì)基礎(chǔ)，它是用來(lái)檢查藥品質(zhì)量的一種特殊的專用量具；是測(cè)量藥品質(zhì)量的基準(zhǔn)；也是做為校正測(cè)試儀器與方法的物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)；在藥品檢驗(yàn)中，它是確定藥品真?zhèn)蝺?yōu)劣的對(duì)照，是控制藥品質(zhì)量必bu可少的工具。中

ELISA試劑盒實(shí)踐過(guò)程中的一些技巧2023/03/02: ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)看似簡(jiǎn)單，其實(shí)不然。記得以前一個(gè)同學(xué)*次做ELISA實(shí)驗(yàn)，跟我說(shuō)，ELISA實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)直太簡(jiǎn)單了，到第2次在次做ELISA實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，他驚訝了，說(shuō)結(jié)果差別怎么這么大（同一份標(biāo)本），第三次的時(shí)候，他決定認(rèn)真的做一次，爭(zhēng)取做到同一份標(biāo)本，這次讓他感受到ELISA并不是那么簡(jiǎn)單，發(fā)覺(jué)其實(shí)挺難的。今天的文章中為大家講述一些ELISA實(shí)驗(yàn)中的小技巧，希望對(duì)大家有所幫助！1.操作前應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解，如環(huán)境溫度(保持在18C～25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的次數(shù)等，要先查

蛋白質(zhì)組學(xué)相關(guān)問(wèn)題與解答（二）2023/02/22: 8．哪些技術(shù)需要進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，以及具體采用生物學(xué)重復(fù)還是技術(shù)重復(fù)來(lái)完成？Labelfree需要進(jìn)行三次重復(fù)，而iTRAQ、TMT一般建議做3次實(shí)驗(yàn)重復(fù)，如果實(shí)驗(yàn)方案后期設(shè)計(jì)了大量的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)如WB或ELISA等，最好做也能做兩次重復(fù)；如果不進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)后期的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)也少，在后期發(fā)表文章的時(shí)候結(jié)果可能會(huì)受到一些審稿人的質(zhì)疑，從而影響文章的發(fā)表，特別是一些高分雜志較為突出，對(duì)于立志于發(fā)表高水平文章的研究人員建議最好進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。如果是進(jìn)行技術(shù)重復(fù)，各實(shí)驗(yàn)結(jié)果之間的數(shù)據(jù)重復(fù)性會(huì)更好，而生物學(xué)重復(fù)由于

蛋白質(zhì)組學(xué)相關(guān)問(wèn)題與解答（一）2023/02/17: 1．為什么通過(guò)elisa、WB能檢測(cè)到的蛋白在itraq實(shí)驗(yàn)中沒(méi)有檢測(cè)到？人血漿中的蛋白是有上萬(wàn)種的，而一般質(zhì)譜只能檢測(cè)到五六百種，也就是說(shuō)只占了其中的百分之幾，這是普遍現(xiàn)象，說(shuō)明咱們的方法是不存在問(wèn)題的；其次，ELISA/WB與質(zhì)譜相對(duì)來(lái)說(shuō)靈敏度不一樣，前者具有放大效應(yīng)，因?yàn)槠溟g會(huì)用到相應(yīng)的抗體，所以只要選對(duì)抗體，感興趣的蛋白基本都會(huì)被檢測(cè)到；因此，ELISA/WB檢測(cè)到的蛋白在組學(xué)中沒(méi)有被檢測(cè)到也是正常的。2．itraq的結(jié)果，用elisa驗(yàn)證了兩個(gè)差異蛋白，發(fā)現(xiàn)都是陰性結(jié)果，是什么情況，出

大鼠腸內(nèi)酯（enterolactone） ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)2023/02/11: 檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被腸內(nèi)酯抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并徹di洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腸內(nèi)酯（enterolactone）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心1

白益生物elisa試劑盒持續(xù)改進(jìn)2023/02/06: ELISA試劑盒在過(guò)去的一年銷售中創(chuàng)行業(yè)新高，真可謂是創(chuàng)造了ELISA試劑盒新紀(jì)錄，白益生物全體員工倍感欣慰，感謝這么多新老客戶的信賴和支持，后續(xù)會(huì)一直秉承嚴(yán)于律己，寬與客戶的宗旨，希望廣大客戶能夠提出寶貴的意見(jiàn)，大家共同發(fā)展。ELISA試劑盒移液器使用時(shí)漏液的原因有下幾方面：1、槍頭是否匹配。2、彈簧活塞是否正常。3、如果是易揮發(fā)的液體（許多有機(jī)溶劑都如此），則可能是飽和蒸汽壓的問(wèn)題，可以先吸放幾次液體，然后再移液。4、如不使用，要把移液槍的量程調(diào)至zui大值的刻度，使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護(hù)彈

PBS緩沖液制備和作用2023/01/04: 定義：管狀試樣容器，可帶密封蓋或壓蓋。離心管的使用方法：1.因刻度離心管是量入式量器，使用前必須清洗干凈并作干燥處理。2.讀數(shù)時(shí)，一定要正確觀察彎液面，否則將引進(jìn)一定的誤差。3.使用時(shí)，離心管的數(shù)量要根據(jù)離心機(jī)的型號(hào)決定，如用雙只套管的離心機(jī)做單只試驗(yàn)，必須在另一只離心管中裝入同體積的液體，以保持平衡。4.離心管與離心機(jī)套管應(yīng)相配合。管子不宜太長(zhǎng)，否則轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)易發(fā)生破碎。但也不易太短，太短的管子在空中轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)不穩(wěn)定，并易引起破碎。太粗套不進(jìn)，太細(xì)轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)不穩(wěn)，圓口應(yīng)大于套管內(nèi)徑為準(zhǔn)。5.離心管套入離心

離心管的使用方法注意事項(xiàng)2023/01/04: 定義：管狀試樣容器，可帶密封蓋或壓蓋。離心管的使用方法：1.因刻度離心管是量入式量器，使用前必須清洗干凈并作干燥處理。2.讀數(shù)時(shí)，一定要正確觀察彎液面，否則將引進(jìn)一定的誤差。3.使用時(shí)，離心管的數(shù)量要根據(jù)離心機(jī)的型號(hào)決定，如用雙只套管的離心機(jī)做單只試驗(yàn)，必須在另一只離心管中裝入同體積的液體，以保持平衡。4.離心管與離心機(jī)套管應(yīng)相配合。管子不宜太長(zhǎng)，否則轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)易發(fā)生破碎。但也不易太短，太短的管子在空中轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)不穩(wěn)定，并易引起破碎。太粗套不進(jìn)，太細(xì)轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)不穩(wěn)，圓口應(yīng)大于套管內(nèi)徑為準(zhǔn)。5.離心管套入離心

酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定原理2022/12/29: 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzymelinkedimmunosorbentassay，簡(jiǎn)寫ELISA或ELASA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結(jié)合進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測(cè)方法。酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）為免疫學(xué)中的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)，本詞條從定義、基本原理、分類方法、操作要點(diǎn)等方面對(duì)其進(jìn)行了詳細(xì)介紹。原理1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）用于IgG定量測(cè)定的

胰蛋白酶作用2022/12/29: 蛋白酶是水解蛋白質(zhì)肽鏈的一類酶的總稱。按其降解多肽的方式分成內(nèi)肽酶和端肽酶兩類。前者可把大分子量的多肽鏈從中間切斷，形成分子量較小的朊和胨；后者又可分為羧肽酶和氨肽酶，它們分別從多肽的游離羧基末端或游離氨基末端逐一將肽鏈水解生成氨基酸。胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在pH為8.0、溫度為37℃時(shí)，胰酶溶液的作用能力強(qiáng)。使用胰酶時(shí)，應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間，以免消化過(guò)度造成細(xì)胞損傷。因

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