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免疫印跡(western blot)技術(shù)服務(wù)*

來源:上海西唐生物科技有限公司 2012年05月31日 10:15


免疫印跡(western blot)技術(shù)服務(wù)

◇樣本制備

1. 懸浮細(xì)胞:取大約 1×107個(gè)細(xì)胞,低速離心收集,棄去培養(yǎng)液,加入1ml PBS懸浮細(xì)胞,轉(zhuǎn)入小離心管中,低速離心沉淀細(xì)胞,棄去PBS,放入-70冰箱保存。

2. 貼壁細(xì)胞:取大約1×107個(gè)貼壁細(xì)胞,胰酶消化后加入PBS懸浮細(xì)胞,轉(zhuǎn)入小離心管中,低速離心沉淀細(xì)胞,棄去PBS,放入-70冰箱保存。

3. 組織:采集新鮮組織(注意:生物體死亡后10分鐘內(nèi)取材料并保存好),組織塊以PBS或生理鹽水清洗干凈,切為小塊,放入-70冰箱中保存。

樣本量:組織樣本,質(zhì)量大于100mg;細(xì)胞樣本,細(xì)胞數(shù)大于1×106;

◇蛋白質(zhì)抽提:

實(shí)驗(yàn)對象為組織樣品,取適量(250~500mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑(或核蛋白抽提試劑),勻漿后抽提總蛋白(或核蛋白)。實(shí)驗(yàn)對象為細(xì)胞樣品(細(xì)胞培養(yǎng)),每份樣品取1×1061×107細(xì)胞,PBS清洗細(xì)胞,去PBS0.1ml~1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑(或核蛋白抽提試劑)抽提總蛋白(或核蛋白)。標(biāo)本也可交給我們處理,組織標(biāo)本每個(gè)10元,核蛋白或膜蛋白每個(gè)30元。

◇收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn):

每張膜上做一種目的蛋白和相應(yīng)的內(nèi)參蛋白。每張膜上可以做8個(gè)樣品。每張膜的費(fèi)用是:800元。一抗另計(jì),抗體為進(jìn)口單克隆抗體,我公司可代購,其它試劑免費(fèi)。


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