堿性磷酸酶染色
2025-08-02
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1、取材、 固定、包埋、切片;
2、取已粘好烘 干的切片兩塊,放入二甲苯(一)→二甲苯(二)(各3-4分鐘)的染缸中進行脫蠟,再經(jīng)100%乙醇(一)
→100%乙醇(二)→95%乙醇→90%乙醇 →70%乙醇→30%乙醇→水。每級各一分鐘,在移切片時,用鑷子夾住切片震蕩
并提起,放下反復幾次,在移入下一染缸邊緣前稍停留,讓溶液滴凈后,再入下 一染缸,以免把上一染缸溶液過多帶入下
一染缸,而影響切片質(zhì)量;
3、將其中一塊切片以蠟筆作一標記(用作對照組切片),放入沸水中煮沸5分鐘;
4、將兩塊切片均放入AKP作用液中孵育30-60分鐘,作用液要事先預熱到37℃,水浴中進行;
5、取出切片在蒸餾水中洗滌;
6、放入硝.酸.鈷溶液2-3分鐘;
7、蒸餾水沖洗干凈,否則切片易被污染,影響定位;
8、切片浸入硫化銨中2-3分鐘;
9、蒸餾水沖洗干凈;
10、經(jīng)各級酒精脫水,即30%乙醇→70%乙醇→90%乙醇→950%乙醇→100%乙醇(二)→100%乙醇(一),各級一分鐘。