PC057 NSC，大鼠神經(jīng)干細(xì)胞
| 參考價(jià) | ￥ 3980 |
| 訂貨量 | ≥1 |
- 公司名稱 長(zhǎng)沙贏潤(rùn)生物技術(shù)有限公司
- 品牌
- 型號(hào) PC057
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/4/9 10:53:01
- 訪問(wèn)次數(shù) 624
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培養(yǎng)條件
- DMEM/F12；N2，1%；B27，2%
- 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%
- 溫度：37攝氏度
細(xì)胞描述
細(xì)胞描述：本公司培養(yǎng)出品的神經(jīng)干細(xì)胞（NSC）取自12天wisdar大鼠胚胎的端腦。
細(xì)胞代數(shù)：P3
細(xì)胞生長(zhǎng)：神經(jīng)干細(xì)胞懸浮成“神經(jīng)球”生長(zhǎng)。
細(xì)胞規(guī)格：1ml 凍存管 （1x106）或者 1個(gè)25cm2的培養(yǎng)瓶。
細(xì)胞檢測(cè)：細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
細(xì)胞傳代
1. 顯微鏡下觀察細(xì)胞，神經(jīng)干細(xì)胞懸浮成“神經(jīng)球”生長(zhǎng)，通常情況下，每?jī)商鞊Q液一次，每四天傳代一次。
2. 在生物安全柜或者超凈臺(tái)中，將培養(yǎng)瓶中的含有神經(jīng)球的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到15ml離心管中。
3. 500rpm離心5分鐘，收集神經(jīng)干細(xì)胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶，在超凈工作臺(tái)中輕輕吹打10次，注意不要消化太久，消化的目的是縮小神經(jīng)球的體積，不要消化能單個(gè)神經(jīng)干細(xì)胞，那樣會(huì)影響其生長(zhǎng)速度。
5. 然后加入5ml培養(yǎng)基，吹打均勻后1000rpm 離心5分鐘。
6. 離心后，去掉上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，按照1:2-1:3的比例進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞復(fù)蘇
1. 取出凍存管后，投入37℃水浴中，震蕩解凍2 min。
2. 酒精消毒管壁外側(cè)后，將其轉(zhuǎn)入超凈臺(tái)中，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至離心管中，加入5 ml 37℃預(yù)熱的DMEM/F12+10%FBS培養(yǎng)基。
3. 將離心管離心（1000rpm，5 min）。
4. 棄去上清，再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27*培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存：液氮凍存（凍存液：DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO）。
細(xì)胞運(yùn)輸：干冰運(yùn)輸（1 Vial）或活細(xì)胞運(yùn)輸（T-25 flasks）。
細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞鑒定：神經(jīng)干細(xì)胞采用nestin免疫熒光染色鑒定。
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