BestBio貝博生物  植物細胞質(zhì)蛋白提取試劑盒  BB-3180

注意事項：

• 本試劑盒僅供科學(xué)研究使用。
• 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
• 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
• 使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
• 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

產(chǎn)品特點：

1. 使用方便。
2. 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
3. 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
4. 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
5. 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性。

試劑盒以外自備試劑和儀器

● 移液器、吸頭       ● 離心機及離心管

● 渦旋振蕩器         ● 冰箱，冰盒

BestBio貝博生物  植物細胞質(zhì)蛋白提取試劑盒  BB-3180

使用方法：

使用注意事項：

• 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。
• 實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
• 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
• 可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

1. 提取液制備：每500ul預(yù)冷的蛋白提取液A中加入2ul蛋白酶抑制劑；每200ul蛋白提取液B中分別加入2ul蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 取洗凈擦干后并去除葉梗和粗脈的200mg植物組織樣本剪碎，采用以下一種方法處理：
   1. 加入500ul提取液A后用勻漿機/勻漿器勻漿。
   2. 置于研缽中用液氮研磨，研磨后加入500μl冷的提取液 A。
   3. 加入500ul提取液A直接置冰上研磨。
3. 高速渦旋振蕩5秒，然后在4℃，100×g力條件下離心1分鐘。
4. 收集上清，棄沉淀。
5. 將上清在4℃，600×g力條件下離心3分鐘。
6. 收集沉淀，將上清移入另一干凈的離心管。
7. 在步驟6中的上清中加入50ul胞質(zhì)提取液B，高速渦旋振蕩15秒，充分混勻。
8. 振蕩10分鐘。
9. 在4℃，16000×g條件下離心10分鐘。
10. 將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，即得到細胞質(zhì)蛋白。
11. 將上述蛋白提取物定量^①后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒?sup>②。

注：

① 建議用BCA法進行蛋白定量。

② 蛋白樣品－80℃存放一年沒有問題。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被細菌污染。

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