大鼠血清甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)檢測elisa北京方程生物公司現(xiàn)貨供應(yīng)

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說明：1. 加AB液之后，白色的孔就會顯色。淡綠色，顏色深淺跟目標蛋白濃度正相關(guān)。2. 生物素與親和素結(jié)合，可以放大免疫反應(yīng)的效應(yīng)，便于顯色。3.ELISA包被的板子采用平底（flat），大概60個96孔板，260美元左右。白色的板子雖然不能拆卸，但是不用的孔，只要別污染，下次可以用，所以一塊板子等同于可以拆開來用。12. 保留AB液在孔內(nèi)，直接每孔加50ul的終止液（2N H2SO4）。終止液也是公司買的專門ELISA用的。加完終止液，輕彈板子，混勻。可以看見淡綠色變?yōu)榱咙S色。黃色的顏色深淺，與綠色*，與目標蛋白的濃度成正相關(guān)。加完終止液，立即到機器上讀數(shù)。選擇450nm，測OD值。說明：不常做ELISA的實驗室，請務(wù)必在實驗之前，確認吸光度檢測儀器在正常使用狀態(tài)。如果儀器狀態(tài)不好，讀數(shù)不準，ELISA的結(jié)果也不可信。附圖的板子顏色，是我昨天的結(jié)果，室溫放了一個晚上之后，今早來看，顏色普遍都黃色，雖然還有顏色深淺的區(qū)別。剛做出來的時候，顏色淡的近乎白色，幾乎沒有黃色。 X,Y軸都取對數(shù)之后，可以看見點與點之間成直線。但是，R2只有0.967，一般比較好的標準曲線，應(yīng)該是0.99左右。D1與D2的重復(fù)性不好（標準品濃度，125pg/ml），可能是個人操作原因。根據(jù)標準品得到的公式，就可以根據(jù)OD值來計算各個樣本檢測濃度。

1. 請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正常現(xiàn)象，可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液（加熱溫度不要超過50℃，使用時洗滌液應(yīng)為室溫）。當日使用。3. 標準品: 于10000×g離心1分鐘，加入標準品&樣品稀釋液1.0mL至凍干標準品中，旋緊管蓋，靜置10分鐘，上下顛倒數(shù)次，待其充分溶解后，用移液器將其輕輕混勻（濃度為500pg/mL）。然后根據(jù)需要進行倍比稀釋（注：不要直接在反應(yīng)孔中進行倍比稀釋）。建議配制成以下濃度：按照稀釋方法圖例 標準品&樣品稀釋液直接作為空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL標準品：取0.5mL10ng/mL的上述標準品加入含有0.5mL標準品&樣品稀釋液的EP管中，混勻即可，其余濃度依此類推。 4. 生物素化抗體工作液：實驗前計算當次實驗所需用量（以100μL/孔計），實際配制時應(yīng)多配制100-200μL。使用前15分鐘，以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作濃度。當日使用。5. 酶結(jié)合物工作液：實驗前計算當次實驗所需用量（以100μL/孔計），實際配制時應(yīng)多配制100-200μL。使用前15分鐘，以酶結(jié)合物稀釋液稀釋濃縮HRP酶結(jié)合物(1:100)成工作濃度。當日使用。

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