hs 68細(xì)胞|人男性正常生殖細(xì)胞系 含STR
- 公司名稱 上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2023/5/10 15:53:05
- 訪問次數(shù) 1154
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | T25 10的六次方 |
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貨號 | hs 68細(xì)胞 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 醫(yī)院及其研究所科研實(shí)驗(yàn) |
hs 68細(xì)胞|人男性正常生殖細(xì)胞系 含STR
- 組成:
組份 | 數(shù)目 |
細(xì)胞 | 1 T-25瓶 |
細(xì)胞說明書 | 一份 |
- 細(xì)胞簡介:
生長特性: | 貼壁生長
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細(xì)胞來源: | 從ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進(jìn) |
培養(yǎng)條件: | 培養(yǎng)基:90%1640培養(yǎng)基 +10%FBS(推薦BI -04-001-1ACS*胎牛血清) 氣相:空氣95%,二氧化碳5% 溫度:37℃ |
培養(yǎng): |
1.用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒,將其平躺置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行2-3小時(shí)的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養(yǎng)液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進(jìn)行換液以及傳代; 2.待細(xì)胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進(jìn)行傳代,第yi次傳代比例為1:2。 3傳代步驟:將0.25%含EDTA胰酶置于37°預(yù)熱,倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預(yù)熱好的胰酶,置于37°孵育消化(第yi次消化需時(shí)常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細(xì)胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細(xì)胞脫落為*消化時(shí)間,記錄*消化時(shí)間,以便于下次消化),消化好后加入1ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后收集細(xì)胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,進(jìn)行傳代。
二、懸浮細(xì)胞 1.用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒,然后置于無菌操作臺,打開瓶口,輕輕吹打后,將其中的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管中,然后1200rpm離心3min,去上清; 2.將離心好的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基,然后將其置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進(jìn)行換液(離心后去舊液,加入新鮮培養(yǎng)基); 3.顯微鏡觀察細(xì)胞數(shù)目比較多時(shí),對其進(jìn)行傳代,第yi次傳代比例為1:2(離心后平均分成兩瓶培養(yǎng))。
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細(xì)胞總數(shù): | 1~3*106 |
傳代周期: | 2-3天 |
傳代比例: | 1:2~1:4 |
換液頻率: | 2-3天 |
凍存液: | 90%FBS+10%DMSO |
四、注意事項(xiàng):
1 收到細(xì)胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。
2 瓶中運(yùn)輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復(fù)使用,請換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)
3 對于貼壁細(xì)胞,若大部分細(xì)胞漂浮,置于培養(yǎng)箱隔夜觀察,大部分漂浮細(xì)胞重新貼壁,表明細(xì)胞活力正常,繼續(xù)培養(yǎng),剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉;若大部分細(xì)胞仍然不貼壁,將漂浮的細(xì)胞離心收集,用臺盼藍(lán)染色鑒定細(xì)胞活力,并與本公司銷售人員及時(shí)聯(lián)系。
4 建議客戶收到細(xì)胞后不同倍鏡各拍幾張細(xì)胞的照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),如細(xì)胞狀態(tài)出現(xiàn)問題請于72h內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系,以便于更好的幫您解決問題,超過時(shí)間我段,本公司則默認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好,不免費(fèi)對后續(xù)細(xì)胞狀態(tài)問題進(jìn)行售后。
hs 68細(xì)胞|人男性正常生殖細(xì)胞系 含STR-如何培養(yǎng)該細(xì)胞?
細(xì)胞培養(yǎng)是當(dāng)前細(xì)胞生物學(xué)乃至整個(gè)生命科學(xué)研究與生物工程中基本的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。
細(xì)胞培養(yǎng)為疫苗生產(chǎn)、藥物研制與腫瘤防治等醫(yī)學(xué)實(shí)踐提供了全新的手段。細(xì)胞培養(yǎng)包括原核生物細(xì)胞,入細(xì)菌;真核單細(xì)胞生物,入酵母菌、四膜蟲等;植物細(xì)胞與細(xì)胞的培養(yǎng)以及于此密切相關(guān)的病毒的培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)
體外培養(yǎng)的細(xì)胞可分為原代細(xì)胞(primary culture cell)與傳代細(xì)胞(subculture cell)。原代細(xì)胞是指機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞。有人把培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng),適應(yīng)在體外培養(yǎng)下條件下持續(xù)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞稱為傳代細(xì)胞。
分散的細(xì)胞懸液在培養(yǎng)瓶中很快(在幾十分鐘至數(shù)小時(shí)內(nèi))就貼附在瓶壁上,這就稱為細(xì)胞貼壁。
分散呈圓球形的細(xì)胞一經(jīng)貼壁就迅速鋪展并開始有絲分裂,逐漸形成致密的細(xì)胞單層,稱為單層細(xì)胞(sigle layer cell),這種培養(yǎng)方法稱為單層細(xì)胞培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
如果漂浮的死細(xì)胞多,說明細(xì)胞有很多老化的,建議每次傳代的時(shí)候,在用胰酶消化之前,用PBS將細(xì)胞漂洗一遍,胰酶消化的時(shí)間要把握好,37℃2-3min即可,及時(shí)終止反應(yīng),否則胰酶消化過度對細(xì)胞損傷較大,也會(huì)有很多死細(xì)胞出現(xiàn)的;吹打細(xì)胞的動(dòng)作要輕柔。
體外培養(yǎng)的細(xì)胞,不論是元代細(xì)胞還是傳代細(xì)胞一般不包吃體內(nèi)原有的細(xì)胞形態(tài)。但大體可以分為兩種基本形態(tài):成纖維樣細(xì)胞(fibroblast like cell)與上皮樣細(xì)胞(epitbelial like cell)。此外還有一些可移動(dòng)的游走細(xì)胞。
做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的同學(xué)看過來。
選擇上海琛藝生物細(xì)胞有3個(gè)理由:
1、細(xì)胞狀態(tài)好,形態(tài)佳,易成活,是市面上比較好養(yǎng)的細(xì)胞之一;
2、物流迅速,復(fù)蘇好后發(fā)貨,次日就能到;
3、使用我司推薦的進(jìn)口品牌血清進(jìn)行培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),效果更佳