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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標物>行業(yè)專用試劑>生物試劑> 3-磷酸甘油醛脫氫酶活性檢測試劑盒

3-磷酸甘油醛脫氫酶活性檢測試劑盒

參考價10300.00
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 公司名稱 上海尚寶生物科技有限公司
  • 品牌其他品牌
  • 型號
  • 所在地上海市
  • 廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
  • 更新時間2021/1/15 10:12:47
  • 訪問次數(shù) 475
規(guī)格
100管/96樣10300.00元9999 支 可售

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!


上海尚寶生物科技有限公司是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的高科技生物企業(yè)。公司總部位于上海、在全國30多個省市設(shè)有分公司和代理機構(gòu)。公司秉承“以客戶為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念,擁有專業(yè)的研發(fā)和質(zhì)量檢測團隊以及*的倉儲和物流系統(tǒng),為各大院校、科研單位、醫(yī)院、生產(chǎn)廠商等單位提供優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。
公司擁有一批專業(yè)的博士、碩士研發(fā)人員,專注于生物產(chǎn)品的不斷完善和創(chuàng)新。產(chǎn)品覆蓋面廣,品質(zhì)可靠。先后開發(fā)了涵蓋分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的多種試劑及試劑盒。同時,尚寶生物公司提供各種常規(guī)生化試劑,可隨時為廣大科研工作者提供各類專業(yè)試劑。在質(zhì)量方面,尚寶生物謹記公司信念:質(zhì)量高于一切。所有研發(fā)的產(chǎn)品都設(shè)有嚴謹?shù)纳a(chǎn)流程,科學(xué)的質(zhì)量檢測方法和成熟的質(zhì)量檢測程序,我們恪守對每一位用戶的承諾:用專業(yè)的態(tài)度做專業(yè)的品牌。同時,公司組建了一支專業(yè)的技術(shù)服務(wù)隊伍,能夠為科研工作者提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù)。每一位購買尚寶生物產(chǎn)品的用戶都能夠得到專業(yè)的咨詢和售后服務(wù)。

 

 

生物試劑,細胞增殖檢測試劑盒,核酸提取試劑盒,蛋白定量試劑盒,蛋白提取試劑盒,染色液,固定液,Buffer常規(guī)溶液

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/96樣
貨號 BA1002 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

3-磷酸甘油醛脫氫酶活性檢測試劑盒

(微量法)

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。

產(chǎn)品貨號:BA1002

產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣

3-磷酸甘油醛脫氫酶活性試劑盒測定意義:

      GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途徑的關(guān)鍵酶,與糖異生途徑、體內(nèi)血糖濃 度的維持和糖尿病的發(fā)生密切相關(guān),在機體糖、脂、蛋白代謝紊亂疾病中發(fā)揮重要作用。

測定原理:

3-磷酸甘油醛脫氫酶活性試劑盒活性檢測試劑盒催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和 NADH生成3磷酸甘油醛、無機磷和NAD,340nm處測定NADH的減少量可反映GADPH活性的高低。

需自備的儀器和用品:

分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾 水。

試劑的組成和配制:

                             提取液:100mL×1 瓶,4℃保存;

                             試劑一:粉劑×1 瓶,-20℃保存;

                             試劑二:液體20mL×1 瓶,4℃保存;

                             試劑三:液體×1 支,4℃保存。

樣本的前處理:

1、細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(10 4 個):提取液體 積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功 率 20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液), 進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟:

1、分光光度計或酶標儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。

2、樣本測定

(1)工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,充分溶解,37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘; 現(xiàn)配現(xiàn)用。

(2)在試劑三中加入500μL蒸餾水,充分混勻待用;用不完的試劑4℃保存一周。

(3)在微量石英比色皿或96孔板中加入5μL 樣本、5μL試劑三和190μL工作液,混勻,加入后一個試劑的同 時開始計時,記錄340nm處20s時的吸光值A(chǔ)1和5min20s后的吸光值A(chǔ)2,計算 ΔA=A1-A2。

GAPDH 活性計算:

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

(1)按樣本蛋白濃度計算: 單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×10 9]÷(V樣×Cpr) ÷T

                                                  =1286×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算 單位的定義:每g組織每分鐘消耗1nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

GAPDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×10 9]÷(W×V樣÷V樣總) ÷T

                                              =1286×ΔA÷W 

(3)按細菌或細胞密度計算 單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×10 9]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T

                                                =2.57×ΔA 

V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10 -4 L;ε:NADH摩爾消光系數(shù),6.22×10 3 L/mol/cm;d:比色皿光徑,1cm; V樣:加入樣本體積,0.005 mL;

V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度, mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細菌或細胞總數(shù),500萬

b.用96孔板測定的計算公式如下

(1)按樣本蛋白濃度計算

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×10 9]÷(V樣×Cpr) ÷T

                                                 =2572×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算

單位的定義:每g組織每分鐘消耗1nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

GAPDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×10 9]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T

                                              =2572×ΔA÷W

(3)按細菌或細胞密度計算

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

GAPDH(nmol/min/10 4cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×10 9]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T

                                                 =5.144×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10 -4 L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×10 3 L/mol/cm;d:96孔板光徑,0.5cm; V樣:加入樣本體積,0.005 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度, mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細菌或細胞總數(shù),500萬。



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