人細(xì)胞凋亡抑制因子的應(yīng)用

　　背景[1-3]

　　人細(xì)胞凋亡抑制因子是一類高度保守的內(nèi)源性抗細(xì)胞凋亡因子家族，主要通過抑制Caspase活性和參與調(diào)解核因子NF-κB的作用而抑制細(xì)胞凋亡。

　　細(xì)胞凋亡是機體消除有害細(xì)胞、防止細(xì)胞過度增殖的正常生理過程，細(xì)胞凋亡調(diào)控是機體維持正常的細(xì)胞更新和增殖的關(guān)鍵。

　　IAP家族結(jié)構(gòu)的共同特點是N端含有1個或3個包含70個氨基酸的桿狀病毒IAP重復(fù)序列（baculoviralIAPrepeat,BIR)，C端包含或不包含1個指環(huán)(ringfinger)結(jié)構(gòu)。

　　IAPs蛋白通過BIR結(jié)構(gòu)域直接與Caspase的IBM結(jié)合，抑制Caspase3/7/9的催化活性，阻斷細(xì)胞凋亡進程。

　　細(xì)胞凋亡過程

　　在IAPs家族蛋白成員中，5個IAP蛋白的羧基端包含指環(huán)結(jié)構(gòu)域具有E3泛素連接酶活性。c-IAP1通過BIR2與活化Caspase-3/7的IBM結(jié)合，依賴E3泛素連接酶的活性，經(jīng)泛素介導(dǎo)Caspase-3/7蛋白酶體降解，從而抑制細(xì)胞凋亡[14]。在凋亡過程中，c-IAP1蛋白可被裂解生成N端和C端的兩個片斷，C端片段包含CARD和指環(huán)結(jié)構(gòu)域，具有促凋亡的作用。

　　c-IAP1可調(diào)控含有指環(huán)結(jié)構(gòu)的c-IAP1、c-IAP2、XIAP和Livin等IAP家族蛋白，經(jīng)泛素-蛋白酶體降解，而不影響缺乏指環(huán)結(jié)構(gòu)的NAIP和Survivin蛋白表達(dá)。

　　IAPs介導(dǎo)的凋亡抑制可能是腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性的原因之一。IAPs蛋白是調(diào)控腫瘤細(xì)胞凋亡和對藥物敏感性的關(guān)鍵分子，有可能發(fā)展為逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞耐藥、提高療效的新靶點。

　　應(yīng)用[4][5]

　　用于凋亡抑制因子Survivin在膀胱移行細(xì)胞癌中表達(dá)及其與細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡的關(guān)系研究

　　應(yīng)用免疫組織化學(xué)（IHC）法檢測膀朧癌組織、正常膀朧組織中的survivin、兒一67、CyclinD:的表達(dá)，通過T血el法檢測TCC凋亡細(xì)胞，研究survivin表達(dá)與cyclinD;、兒一67的表達(dá)及冗C細(xì)胞凋亡之間相關(guān)性，以進一步探討survivin表達(dá)在膀朧癌的發(fā)生、發(fā)展及細(xì)胞凋亡與增殖中的作用，并為探討survivin在TCC的免疫診斷方面的應(yīng)用價值提供理論和實驗依據(jù)。

　　方法1、標(biāo)本取材自手術(shù)及活檢標(biāo)本的組織，病理科石蠟包埋后常溫保存。在病理科進行切片，切片厚度為4um。重新進行HE染色，并由專人進行病理診斷核實。

　　2、對10例正常膀朧組織、46例膀朧移行細(xì)胞癌中的表達(dá)水平進行檢測。應(yīng)用免疫組織化學(xué)（IHC）法檢測膀耽癌組織、正常膀朧組織中的sur-vivin、Ki一67、eyelinD，在表達(dá)，通過TUnel法檢測凋亡細(xì)胞。利用統(tǒng)計學(xué)原理研究survivin表達(dá)與cyclinDI、瓦一67的表達(dá)及凋亡之間相關(guān)性。

　　結(jié)果1、正常膀朧粘膜中未見survivn的表達(dá)，46例TCC組織表達(dá)率82.6%，表達(dá)指數(shù)為63.7;與正常組織差異顯著P<0.001。survivin的表達(dá)陽性率和表達(dá)強度與腫瘤分級、臨床分期呈正相關(guān)關(guān)系，即隨著病理分級及臨床分期增加，survivin在TCC表達(dá)率及表達(dá)強度逐漸增高。P<0.05。

　　2、KI一67陽性表達(dá)率正常組織為10.0%，TCC組為54.4%。P<0.01。ki一67的表達(dá)平均陽性率和表達(dá)指數(shù)隨著腫瘤分級、臨床分期呈正相關(guān)關(guān)系，隨著病理分級及臨床分期增加表達(dá)率及表達(dá)強度逐漸增高。P<0.05。