人單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP4)檢測試劑盒檢測原理:本試劑盒采用雙抗體夾心法：(MCP4)單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP4)會(huì)與單抗結(jié)合，游離的成份被洗去。加入酶標(biāo)抗體，(MCP4)抗體與結(jié)合在單抗上的人單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP4)結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應(yīng)孔中有單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP4)，辣根過氧化物酶會(huì)使無色的顯色劑現(xiàn)藍(lán)色，加終止液變黃。在450nm處測OD值，單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP4)濃度與OD450值之間呈正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中的單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP4)濃度。

　　選用世界著名生產(chǎn)廠家的原料，采用專業(yè)體外診斷試劑生產(chǎn)技術(shù)制造。適用于體外定量檢測人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中天然重組(MCP4)濃度。僅供科研使用，使用前請仔細(xì)閱讀說明書并檢查試劑組分。

　　人單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP4)檢測試劑盒樣品收集:

　　1.血清：全血樣品于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管。

　　2.血漿：抗凝劑推薦使用EDTA-Na2，樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測。避免使用溶血，高血脂樣品。

　　3.組織勻漿：用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞稱重后將碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

　　4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：取細(xì)胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘，除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測。

　　5.其它生物樣品：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測

　　6.樣品應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。

　　7.樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測的可保存于4℃，若不能及時(shí)檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃(1個(gè)月內(nèi)檢測)，或-80℃（6個(gè)月內(nèi)檢測），避免反復(fù)凍融。

　　8.如果您的樣品中檢測物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品最高值，請根據(jù)實(shí)際情況，做適當(dāng)倍數(shù)稀釋（建議先做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以確定稀釋倍數(shù)）。