土壤β-葡萄糖苷酶（Solid-β-Glucosidase，S-β-GC）試劑盒說明書

微量法 100 管/48 樣

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：

S-β-GC 能夠催化水解芳基或烴基與糖基原子團(tuán)之間的糖苷鍵生成葡萄糖，是纖維素分解酶系中重要組成成分之一，在土壤微生物的糖類代謝方面具有重要生理功能。

測(cè)定原理：

S-β-GC 能夠催化對(duì)-硝基苯-β-D 吡喃葡萄糖苷生成對(duì)-硝基ben酚，后者在 400nm 有特征光吸收。

土壤β-葡萄糖苷酶試劑盒 土壤系列

試劑組成和配制：

試劑二：粉劑×1 瓶，-20℃保存；臨用前加入 10ml 蒸餾水，充分溶解備用，用不完的試劑仍-20℃保存。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

自備儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。

樣品處理：

新鮮土樣自然風(fēng)干或 37 度烘箱風(fēng)干，過 30~50 目篩。

測(cè)定步驟：

1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 400nm，蒸餾水調(diào)零。

2、加樣表。

混勻， 37℃振蕩反應(yīng) 1h 后，90℃水浴 5min（蓋緊，防止水分散失），流水冷卻， 10000g 25℃離心 10min，取上清液（在EP 管或 96 孔板中加入下列試劑）

充分混勻，室溫靜置 2min 后， 400nm 處測(cè)定吸光值A，計(jì)算ΔA=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)

一個(gè)對(duì)照管。

S-β-GC 活力計(jì)算：

a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.0032x -0.0027；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/L），y 為吸光值。單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1 μmol 對(duì)-硝基ben酚定義為一個(gè)酶活力單位。

S-β-GC 活力（μmol/d/g 土樣）＝ (ΔA+0.0027) ÷0.0032×V 反總÷W÷T =112.5×(ΔA+0.0027)

T：反應(yīng)時(shí)間，1h=1/24d； V 反總：反應(yīng)體系總體積：3×10^-4 L；W：樣本質(zhì)量，0.02g。

b. 用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.0016x -0.0027；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/L），y 為吸光值。單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1 μmol 對(duì)-硝基ben酚定義為一個(gè)酶活力單位。

S-β-GC 活力（μmol/d/g 土樣）＝ (ΔA+0.0027) ÷0.0016×V 反總÷W÷T =225×(ΔA+0.0027)

T：反應(yīng)時(shí)間，1h=1/24d； V 反總：反應(yīng)體系總體積：3×10^-4 L；W：樣本質(zhì)量，0.02g。

土壤β-葡萄糖苷酶試劑盒 土壤系列