二硫鍵定位分析檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

二硫鍵是蛋白質(zhì)中的一個重要結(jié)構(gòu)單元，它是由兩個半guāngānsuān氨基酸殘基中的硫原子在氧化環(huán)境下形成的，對于生物活性和功能起著決定性作用。二硫鍵廣泛存在于細(xì)胞表面受體、抗體、生長因子、激素、酶等蛋白質(zhì)中，并且容易被還原或發(fā)生錯誤配對，導(dǎo)致原始多肽或蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和生物學(xué)活性受到影響。二硫鍵定位分析通過確定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中二硫鍵位置和連接方式可以深入了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能。在生物藥物的制備和研發(fā)過程中，錯誤的二硫鍵配對可能會導(dǎo)致藥物失效，甚至可能有潛在的安全風(fēng)險(xiǎn)，因此，對二硫鍵進(jìn)行準(zhǔn)確的檢測和控制是生物制品表征中bìbùkěshǎo的。

圖1 二硫鍵定位分析原理

液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）技術(shù)的發(fā)展極大提高了檢測的靈敏度和準(zhǔn)確性，推動了二硫鍵分析的發(fā)展，也在二硫鍵定位分析中發(fā)揮著bùkětìdài的作用。百泰派克生物科技BTP通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證。公司根據(jù)二硫鍵分析原理，結(jié)合高效液相色譜儀與高分辨率質(zhì)譜儀建立了二硫鍵分析平臺，為您提供jīngzhǔn的二硫鍵定位分析服務(wù)，無論鏈內(nèi)/鏈間二硫鍵、一對/多對二硫鍵、交叉重疊抑或是錯配的二硫鍵，BTP都可進(jìn)行高效準(zhǔn)確的鑒定。歡迎免費(fèi)咨詢，了解更多詳情！

實(shí)驗(yàn)儀器

• 高效液相色譜儀：Easy-nLC 1200 （Thermo Fisher Scientific）

• 高分辨質(zhì)譜儀：Q Exactive™ Hybrid Quadrupole-Orbitrap™ Mass Spectrometer（Thermo Fisher Scientific）

案例示意

液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法定位二硫鍵，不進(jìn)行還原處理，而是直接進(jìn)行烷基化，這個步驟將游離的巰基封閉。隨后，進(jìn)行酶切操作，將蛋白質(zhì)分子切割成小片段。在這個過程中，存在二硫鍵的半guāngānsuān之間形成了特定的連接，導(dǎo)致分子量發(fā)生變化。接下來，通過質(zhì)譜儀采集數(shù)據(jù)，并使用相應(yīng)的分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)庫匹配，從而得到二硫鍵的信息。

表1 二硫鍵分析

Site：形成二硫鍵的半guāngānsuān在蛋白中的位置；Enzyme：酶解蛋白所用的酶；Peptide：肽段序列；PeptideMass：肽段分子量；MassError(ppm)：肽段的質(zhì)量偏差

圖2 肽段二級圖

常見問題

問題1：質(zhì)譜法鑒定二硫鍵的優(yōu)勢是什么？

回答：質(zhì)譜法在鑒定二硫鍵方面具有多個優(yōu)勢。首先，它不僅可以確定二硫鍵的存在與數(shù)量，還能確定二硫鍵的具體位置和相對含量，提供了更詳細(xì)的信息。其次，質(zhì)譜法具有高靈敏度和高分辨率的特點(diǎn)，可以準(zhǔn)確地檢測和定量二硫鍵，即使在低濃度下也能獲得可靠的結(jié)果。此外，質(zhì)譜法所需的樣品消耗量相對較少，對于寶貴或有限的樣品而言具有重要意義。因此，質(zhì)譜法在二硫鍵分析中被廣泛應(yīng)用，為研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能提供了有力的支持。

問題2：為什么要進(jìn)行烷基化？

回答：進(jìn)行烷基化是為了封閉游離巰基，防止實(shí)驗(yàn)過程中二硫鍵發(fā)生錯配。在質(zhì)譜分析中，樣品的制備過程需要進(jìn)行特殊處理，其中包括烷基化步驟。烷基化是通過將烷基化試劑與巰基反應(yīng)，使巰基被烷基取代，形成烷基硫醇。這樣可以有效地阻止巰基之間的反應(yīng)，避免在實(shí)驗(yàn)過程中形成不正常的二硫鍵連接或錯配。通過烷基化處理，可以確保在質(zhì)譜分析中得到準(zhǔn)確而可靠的二硫鍵信息，有助于揭示蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能特征。

中/英文項(xiàng)目報(bào)告

在技術(shù)報(bào)告中，百泰派克會為您提供詳細(xì)的中英文雙語版技術(shù)報(bào)告，報(bào)告包括： 1. 實(shí)驗(yàn)步驟（中英文） 2. 相關(guān)的質(zhì)譜參數(shù)（中英文） 3. 二硫鍵定位分析詳細(xì)信息 4. 質(zhì)譜圖片 5. 原始數(shù)據(jù)

二硫鍵定位分析一站式服務(wù)

您只需下單-寄送樣品 百泰派克一站式服務(wù)完成：樣品處理-上機(jī)分析-數(shù)據(jù)分析-項(xiàng)目報(bào)告

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對蛋白質(zhì)序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù)，包括對蛋白質(zhì)的氨基酸組成分析，N端測序，C端測序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白質(zhì)N端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的蛋白質(zhì)，提供基于從頭測序法的蛋白質(zhì)從頭測序服務(wù)，對蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達(dá) 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、蛋白質(zhì)組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量蛋白質(zhì)組學(xué)、靶向蛋白質(zhì)組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種蛋白質(zhì)組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種蛋白質(zhì)標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭?xì)胞層面上對多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測51個目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從蛋白質(zhì)、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋蛋白質(zhì)組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

二硫鍵定位分析檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹