如何同時(shí)測(cè)定蛋白質(zhì)純度與含量？檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

在生命科學(xué)研究和生物制藥生產(chǎn)中，dànbáizhì的純度和含量是評(píng)估樣品質(zhì)量與工藝穩(wěn)定性的關(guān)鍵參數(shù)。含量（濃度）表示樣品中目標(biāo)蛋白的juéduì量，而純度則反映目標(biāo)蛋白相對(duì)于雜質(zhì)的比例。通常檢測(cè)時(shí)，這兩項(xiàng)指標(biāo)依賴不同的技術(shù)手段，既增加了操作復(fù)雜性，也提升了誤差風(fēng)險(xiǎn)。隨著檢測(cè)需求的提高，多技術(shù)整合正在成為實(shí)現(xiàn)dànbáizhì純度與含量同步測(cè)定的理想方案。

一、同步測(cè)定的意義與關(guān)鍵挑戰(zhàn)

單獨(dú)測(cè)定蛋白純度和含量往往需要兩次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)，涉及不同樣品處理和分析方法。這不僅增加了操作步驟，還可能因批次差異或樣品消耗而導(dǎo)致結(jié)果偏差。同步測(cè)定的意義在于：

• 一次分析同時(shí)獲得純度與含量結(jié)果，節(jié)省時(shí)間和樣品；

• 減少因操作步驟多而引發(fā)的誤差，提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性與重復(fù)性；

• 支持高通量分析和實(shí)時(shí)質(zhì)量監(jiān)控，尤其適合生物制藥工藝開(kāi)發(fā)及大規(guī)模篩選需求。

關(guān)鍵挑戰(zhàn)則在于如何整合分離、定量及雜質(zhì)分析功能，同時(shí)兼顧分析靈敏度、特異性和數(shù)據(jù)可溯性，適應(yīng)復(fù)雜樣品背景。

二、主要技術(shù)

1、紫外-可見(jiàn)分光光度法（UV-Vis）

基于蛋白在280 nm處的特征吸收，結(jié)合已知消光系數(shù)快速估算蛋白濃度。盡管操作簡(jiǎn)便，但其無(wú)法區(qū)分雜質(zhì)成分，因?yàn)楹怂峒胺悄繕?biāo)蛋白也存在相似吸收特性。因此，UV-Vis適合作為初步含量估算，需結(jié)合其他手段進(jìn)行純度評(píng)估。

2、高效液相色譜（HPLC）

采用反相（RP-HPLC）、體積排阻（SEC-HPLC）或離子交換（IEX-HPLC）技術(shù)，可實(shí)現(xiàn)蛋白組分的高分辨分離。通過(guò)積分目標(biāo)峰面積占比計(jì)算純度，同時(shí)結(jié)合外標(biāo)曲線或參考物質(zhì)進(jìn)行濃度定量。HPLC具備良好的分離效率和重現(xiàn)性，適合多樣品批量分析與質(zhì)量控制。

3、毛細(xì)管電泳（CE）

CE依靠蛋白分子量或電荷差異進(jìn)行分離，分辨率高且樣品用量低。結(jié)合紫外或熒光檢測(cè)和內(nèi)標(biāo)校準(zhǔn)，可同時(shí)評(píng)估純度和定量含量，適合復(fù)雜樣品及快速檢測(cè)需求。

4、質(zhì)譜（MS）與同位素內(nèi)標(biāo)技術(shù)

LC-MS/MS結(jié)合同位素標(biāo)記肽段或全長(zhǎng)蛋白內(nèi)標(biāo)，已成為蛋白含量juéduì定量的主流方法。其高靈敏度和特異性，可在復(fù)雜樣品中jīngzhǔn測(cè)定目標(biāo)蛋白濃度，同時(shí)基于質(zhì)譜峰圖中的雜質(zhì)信息進(jìn)行純度分析。若與HPLC分離結(jié)合，可在高復(fù)雜度基質(zhì)中實(shí)現(xiàn)高通量檢測(cè)。

三、多技術(shù)整合策略

為同時(shí)實(shí)現(xiàn)dànbáizhì純度與含量測(cè)定，需整合具備分離能力、定量準(zhǔn)確性及雜質(zhì)識(shí)別能力的多種技術(shù)，并輔以自動(dòng)化與智能數(shù)據(jù)分析：

• 色譜-質(zhì)譜聯(lián)用：HPLC實(shí)現(xiàn)樣品分離，減少?gòu)?fù)雜背景干擾；LC-MS/MS提供高靈敏度juéduì定量及雜質(zhì)峰分析。兩者結(jié)合兼具分離與定量?jī)?yōu)勢(shì)。

• 自動(dòng)化與標(biāo)準(zhǔn)化流程：通過(guò)自動(dòng)化系統(tǒng)控制樣品制備、純化和檢測(cè)，減少人為誤差，提高結(jié)果穩(wěn)定性。關(guān)鍵參數(shù)（如流速、梯度、柱溫）標(biāo)準(zhǔn)化，確保批次間一致。

• 智能數(shù)據(jù)處理與報(bào)告生成：利用算法與zhuānyè軟件，自動(dòng)識(shí)別目標(biāo)峰、計(jì)算純度與含量，并生成可追溯報(bào)告，支持高通量應(yīng)用和質(zhì)量控制。

四、方法選擇與應(yīng)用建議

• 樣品背景簡(jiǎn)單：采用HPLC結(jié)合外標(biāo)曲線定量，可實(shí)現(xiàn)同步純度與含量檢測(cè)，適合生產(chǎn)質(zhì)量控制場(chǎng)景。

• 復(fù)雜樣品（如血清、細(xì)胞裂解液）：推薦HPLC與質(zhì)譜聯(lián)用方案，兼顧分離效果與高靈敏度定量，確保結(jié)果可靠。

• 樣品量少或需快速檢測(cè)：毛細(xì)管電泳具有高分辨率和低樣品消耗優(yōu)勢(shì)，適合篩選或微量樣品分析。

• 快速含量估算：UV-Vis可作為預(yù)估手段，但需后續(xù)采用高分辨方法確認(rèn)。

dànbáizhì純度與含量的同步測(cè)定不僅提高了檢測(cè)效率，更保障了數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性與可重復(fù)性。通過(guò)色譜、毛細(xì)管電泳和質(zhì)譜等技術(shù)的合理組合，輔以自動(dòng)化系統(tǒng)與智能數(shù)據(jù)解析，可在單次分析中準(zhǔn)確獲得兩項(xiàng)核心指標(biāo)，適應(yīng)生命科學(xué)與生物制藥對(duì)高效、jīngzhǔn檢測(cè)的需求。未來(lái)，dànbáizhì分析技術(shù)將持續(xù)向集成化、自動(dòng)化和高通量方向發(fā)展，為科研和產(chǎn)業(yè)提供堅(jiān)實(shí)的質(zhì)量支撐。百泰派克生物科技致力于提供可靠的dànbáizhì分析整體解決方案，助力生命科學(xué)研究與產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化高質(zhì)量發(fā)展。如需了解更多HPLC測(cè)定蛋白純度詳情，歡迎聯(lián)系我們獲取zhuānyè支持與定制服務(wù)！

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、bǎxiàngdàn白zhìzǔxué、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題。可在單細(xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

如何同時(shí)測(cè)定蛋白質(zhì)純度與含量？檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹