【革蘭氏染色液染色原理】分泌物中的革蘭氏細(xì)菌含有多種氨基酸，具有酸堿化學(xué)物質(zhì)，且?guī)в胁煌碾姾桑c革蘭氏染色液中的酸堿化學(xué)物質(zhì)起化學(xué)反應(yīng)，與革蘭氏染色液中不同電荷的染料結(jié)合，從而使分泌物中的革蘭氏細(xì)菌染成不同的顏色。

【革蘭氏染色液主要組成成份】結(jié)晶紫、草酸銨、碘、碘化鉀、堿性復(fù)紅、石炭酸和酒精。

【革蘭氏染色液貯存條件】常溫保存。

【有效期】24個(gè)月。

【樣本要求】革蘭氏細(xì)菌的涂片。

【染色方法】

1、將結(jié)晶紫染色液滴加在已固定的涂片上，以覆蓋涂片為宜，染1分鐘，水洗。

2、滴加碘液，以覆蓋涂片為宜，染1分鐘，水洗。

3、滴加95%酒精脫色，以覆蓋涂片為宜，搖動玻片至紫色不再為酒精脫退為止，水洗。

4、滴加石炭酸復(fù)紅染色液，以覆蓋涂片為宜，復(fù)染60秒鐘，水洗。

5、待干后用油鏡觀察。

【結(jié)果判定】革蘭氏陽性菌被染后呈現(xiàn)紫色，革蘭氏陰性菌被染后呈現(xiàn)紅色。

【染色結(jié)果的解釋】革蘭氏染色液只對樣本進(jìn)行染色，樣本是否存在異常操作人員要根據(jù)染色結(jié)果并結(jié)合細(xì)菌形態(tài)特征進(jìn)行判別。

【染色方法的局限性】染色過程為人工染色，容易產(chǎn)生染色偏差。

【革蘭氏染色液注意事項(xiàng)】

1、涂片厚薄適宜，固定后方可染色。

2、所加染液以覆蓋涂片為宜，不能過少，以免蒸發(fā)而染料沉淀。

【革蘭氏染色液參考文獻(xiàn)】

1、俞善丁.臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)，第1版.北京:人民衛(wèi)生出版社，1997，319-325.

2、楊履渭主編.微生物學(xué)及檢驗(yàn)技術(shù).廣東科技出版社。

3、葉應(yīng)嫵、王毓三主編.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.東南大學(xué)出版社出版。