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詳細介紹
小鼠呼吸道上皮原代細胞
小鼠呼吸道上皮細胞分離自呼吸道；呼吸道是肺呼吸時氣流所經(jīng)過的通道，有肺脊椎動物的呼吸道分上、下兩部：鼻、咽和喉合稱上呼吸道。氣管及其以后一分再分的管道，合稱為下呼吸道，或稱為氣管樹。氣管樹是隨著動物的進化逐漸復(fù)雜化的。整個呼吸道內(nèi)表面都分布有分泌液和纖毛（鼻孔、咽后壁和聲帶黏膜除外），它能溫暖（或冷卻）、濕潤和凈化吸入的空氣，對于呼吸器官和機體有著保護作用。呼吸道以骨或軟骨做支架，其內(nèi)表面覆蓋著黏膜，黏膜內(nèi)分布著豐富的毛細血管。呼吸道上皮細胞屬于假復(fù)層纖毛柱狀上皮，分布于呼吸道的內(nèi)表面，主要由柱狀，杯形，梭形和錐形等不同形狀細胞組成。看上去像復(fù)層上皮，但實際上所有細胞底部均附于基膜上，屬單層上皮，故稱假復(fù)層柱狀上皮，上皮表面有纖毛，杯狀細胞可分泌粘液，包裹著大量細菌，借助纖毛不斷擺動將其慢慢移動至出消化道。
英文名稱 | Mouse Respiratory Epithelial Cells | 組織來源 | 呼吸道 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7534 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠呼吸道上皮細胞
組織來源：呼吸道
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠呼吸道上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠呼吸道上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]雜交瘤細胞CD25 PC 615.3 [PC 61; PC 61.5.3] hybridoma cell line CD25 DMEM+10% Hyclone 滅活血清 | 過氧化酶活化增生受體γ抗體 |
RNA尿苷酸合酶結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 | 細胞角蛋白16抗體 |
流感病毒H3N1血凝素抗體 | 蛋白酪酸酶非受體型4抗體 |
生長因子受體抗體 | 葡萄糖苷酶2β/Glucosidase IIβ抗體 |
鋅指蛋白923抗體 | 基質(zhì)細胞衍生因子－1抗體 |
IGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (His 標簽) | CM-H096人關(guān)節(jié)軟骨細胞培養(yǎng)基100mL |
轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1 小鼠結(jié)腸平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL | RN-s, 大鼠紋狀體元 Rattus |
支氣管上皮細胞培養(yǎng)基BEpiCM | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0911 |
大鼠腎小球內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL | 犬腎細胞;MDCK(NBL-2) |
水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S4 胃腺癌細胞，SGC7901細胞 CW-2(結(jié)腸腺癌細胞) | 小鼠呼吸道上皮原代細胞蛋白酪酸酶非受體型4抗體 |
IFNG Protein Ferret 重組雪貂 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 (His 標簽) | CD68 Others Human 人 CD68 / Macrosialin / Gp110 (aa 1-319) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
小鼠Lewis肺癌瘤株;LLT 小鼠前脂肪細胞培養(yǎng)基 100mL | 小鼠膀胱平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL |
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3 | 髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體 |
附睪分泌蛋白4抗體 | 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化);PC-12(高分化) |
應(yīng)激誘導(dǎo)0蛋白1抗體 | 半胺酸蛋白酶蛋白-7抗體 |
跨膜蛋白59樣蛋白抗體 | IGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (His 標簽) |
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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