国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學(xué)|元素分析|水分測(cè)定儀|樣品前處理|試驗(yàn)機(jī)|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術(shù)中心>解決方案>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

細(xì)胞支原體污染的熒光檢測(cè)方法

來源:上海嶸崴達(dá)實(shí)業(yè)有限公司   2016年09月14日 14:21  

DNA螢光染色法

· 原理︰利用螢光染劑(bisbenzimide, Hoechst 33258)偵測(cè)支原體污染。此染劑會(huì)結(jié)合到DNA之Adenosine-Thymidine (A-T) rich區(qū)域,因?yàn)橹гw之DNA中A-T含量占多數(shù)(55~80%),所以可將其染色而偵測(cè)。被支原體污染之細(xì)胞經(jīng)染色后,在細(xì)胞核外與細(xì)胞周圍可看到許多大小均一之螢光小點(diǎn),即為支原體之DNA,證明有支原體之污染。 

· 特點(diǎn)︰簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)與靈敏,廣泛使用,可作為例行之偵測(cè)步驟??梢詡蓽y(cè)不易培養(yǎng)之支原體,例如M. hyorhinis,較直接培養(yǎng)法快,約一星期即可知道結(jié)果。 
· 缺點(diǎn):有時(shí)仍會(huì)有螢光背景,影響判讀。 


步驟: 
· 取出培養(yǎng)之Vero細(xì)胞,吸除培養(yǎng)液。于每個(gè)well中加入2 ml 1:3混合的冰醋酸/甲醇固定液,靜置10 min后,吸除固定液,用PBS洗滌三次。 
· 于每個(gè)well中,加入1 ml Hoechst 33258 working solution,室溫下靜置5-10 min。 
· 吸掉Hoechst 33258染液后,以無菌水洗滌3次,風(fēng)干后加入1滴的封片劑,并以蓋玻片覆蓋之。 
· 以100x-400x螢光顯微鏡觀察。觀察細(xì)胞核外是否有藍(lán)色螢光小點(diǎn)或是絲狀點(diǎn)之螢光物產(chǎn)生。 
結(jié)果判讀︰
若有支原體污染,在Vero細(xì)胞核外與細(xì)胞表面會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色螢光小點(diǎn)或是絲狀點(diǎn)。其形狀一致,與細(xì)胞殘片染成之不規(guī)則點(diǎn)狀物不同。其螢光可維持?jǐn)?shù)星期。
negative result : 螢光顯微鏡下,只觀察到Vero細(xì)胞的細(xì)胞核,測(cè)試樣品沒有支原體的污染。(為positive result : 在Vero細(xì)胞核外與細(xì)胞表面會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色螢光小點(diǎn)和絲狀點(diǎn),表示測(cè)試樣品有支原體的污染。 

Negative result 
螢光顯微鏡下,只觀察到Vero細(xì)胞的細(xì)胞核,測(cè)試樣品沒有支原體的污染。 

免責(zé)聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
  • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
阜阳市| 教育| 彰化县| 丽江市| 临城县| 广灵县| 新闻| 永州市| 土默特右旗| 洛宁县| 汽车| 钟山县| 屏东市| 宁波市| 商河县| 安阳县| 平果县| 洛浦县| 东平县| 沅江市| 枣庄市| 十堰市| 兴宁市| 金堂县| 田东县| 潮州市| 青冈县| 饶河县| 竹北市| 合作市| 来宾市| 芜湖县| 尼勒克县| 祥云县| 清流县| 个旧市| 永修县| 青龙| 通州市| 恩施市| 沽源县|