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酶標(biāo)儀的檢測原理
光是電磁波，波長100nm～400nm稱為紫外光， 400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到，大于780nm稱為紅外光。人們只所以能夠看到色彩，是由于光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色，是由于植物吸收了光中的紅色光譜。酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下，檢測被測物的吸光值。
檢測單位：
光通過被檢測物，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
檢測單位用OD值表示， OD是optical delnsity(光密度)的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度， OD=1og(1/trans)，其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則，OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系：
E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度， Ι0 為在檢測物之前的光強(qiáng)度，Ι為從被檢測物出來的光強(qiáng)度。
OD值由下述公式計(jì)算：
E=OD=C×D×E
C為檢測物的濃度
D為檢測物的厚度
E為摩爾因子
在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長，在此波長下，此物質(zhì)能夠吸收zui多的光能量。假如選擇其它的波長段，就會造成檢測結(jié)果的不正確。因此，在測定檢測物時(shí)，我們選擇特定的波上進(jìn)行檢測，稱為丈量波長。
但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收，我們再選取一個(gè)參照波長，以消除這個(gè)不正確性。在參照波長下，檢測物光的吸收zui小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。
Anthos 酶標(biāo)儀檢測值計(jì)算
儀器中的檢測器接收透過被檢測物的光能量，轉(zhuǎn)換成二進(jìn)位數(shù)字信號，zui大為4095。儀器定義沒有光源下的透光值為 0%，沒有檢測物的透光值為100%。則實(shí)際檢測中，檢測物的透光值均在 0%一100%之間。透光值
的計(jì)算如下：
T=(Meas-Min)/(Max-Min)
其中T為透光值， Meas為檢測的二進(jìn)位數(shù)值， Min為在 0%的情況下檢測的二進(jìn)位數(shù)值， Max為在100%的情況下檢測的二進(jìn)位數(shù)值，舉例如下：
MaX=3600 Mn=20 Meas=30
T=(30-20)/3600-20)=0.0028
OD=1og(1/T)=1og(1/0.0028)=2.552
Anthos 酶標(biāo)儀的中心定位
儀器會自動對酶標(biāo)孔進(jìn)行中心定位，中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不正確。在對每一個(gè)酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測時(shí)，儀器實(shí)在要進(jìn)行35個(gè)點(diǎn)的丈量，選取zui中間的5個(gè)點(diǎn)的均值為本孔的OD值。
光源的參照通道
參照通道是用來校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響。
酶標(biāo)儀的用途和其它提示
用于ELISA試劑的測定，廣泛用于各種實(shí)驗(yàn)室，包括臨床實(shí)驗(yàn)室。
質(zhì)量控制
質(zhì)量控制是試劑檢測的重要因素。請按照試劑說明書的要求進(jìn)行質(zhì)量控制。
空缺校正
有一些試劑盒的說陰書將空缺孔設(shè)置為空氣，其它大多數(shù)空缺孔的設(shè)置是用試劑來設(shè)置的，請按照試劑盒的說明書要求進(jìn)行。
檢測結(jié)果的解釋
由于有相當(dāng)多的因素會影響檢測的結(jié)果，如不同的酶標(biāo)板，檢測試劑的體積，都會造成OD值的不，因此，只有使用同一酶標(biāo)板反應(yīng)的試劑檢測結(jié)果才能比較和分析。對結(jié)果的臨床解釋請依照試劑盒的說明書進(jìn)行。
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