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ELISA試劑盒檢測試劑盒操作過程

來源:上海撫生實業(yè)有限公司   2018年05月28日 09:37  

ELISA試劑盒檢測試劑盒操作過程
1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘。
2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3、加標準品和待測樣本:取滿足數(shù)量的酶標包被板,固定于框架上,別離設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記載各孔方位,在標準品孔中參與標準品50μL;待測樣本孔中先參與待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。
4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
6、加酶標工作液:每孔參與酶標工作液50μL,空白對照孔不加。
7、溫育:重復4的操作。
8、洗板:重復5的操作。
9、顯色:每孔先參與顯色劑A 液50μL,再參與顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min。
10、中止:取出酶標板,每孔加中止液50μL,中止反應(顏色由藍色立轉黃色)。
11、測定:以空白孔調(diào)零,在中止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
12、核算:根據(jù)標準品的濃度及對應的OD值,核算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上核算出對應的樣品濃度,也能夠運用各種應用軟件來核算。畢竟?jié)舛葹閷嵺`測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
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