多肽合成的相關(guān)知識(shí)了解
多肽因其*的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)在分子生物學(xué)中占有重要地位。近年來(lái),多肽已被用于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的研究。通過(guò)標(biāo)記,合成肽可以用作探針來(lái)查看蛋白-多肽發(fā)生作用的地方。抑制肽被用于臨床研究,用來(lái)檢查多肽對(duì)于癌癥蛋白及其他疾病相關(guān)蛋白的抑制作用。
1963年,Merrifield提出了固相多肽合成方法(SPPS),由于其合成方便,迅速,成為多肽合成的理想方法,而且?guī)?lái)了多肽有機(jī)合成上的一次革命,并成為了一支獨(dú)立的學(xué)科——固相有機(jī)合成,固相合成的發(fā)明同時(shí)促進(jìn)了肽合成的自動(dòng)化。
多肽合成以固相合成為反應(yīng)原理,在密閉的防爆玻璃反應(yīng)器中使氨基酸按照已知順序(序列,一般從C端-羧基端 向 N端-氨基端)不斷添加、反應(yīng)、合成,操作終得到多肽載體。固相合成法,大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度。為了防止副反應(yīng)的發(fā)生,參加反應(yīng)的氨基酸的側(cè)鏈都是保護(hù)的。羧基端是游離的,并且在反應(yīng)之前必須活化。固相合成方法有兩種,即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc存在很多優(yōu)勢(shì),現(xiàn)在大多采用Fmoc法合成,但對(duì)于某些短肽,tBoc因其產(chǎn)率高的優(yōu)勢(shì)仍然被很多企業(yè)所采用。
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