為了更好地運(yùn)用猴ELISA試劑盒,定時(shí)對(duì)其進(jìn)行清洗是很有必要的,下面我們來(lái)細(xì)心說(shuō)說(shuō)其清潔關(guān)鍵。
猴ELISA試劑盒的清潔關(guān)鍵:
1. 洗板
① 保證洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙(選擇潔凈、無(wú)或少塵的吸水資料)上輕輕拍干;
?、?合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
2. 讀板
應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔,在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸;盡可能完結(jié)ELISA技術(shù)規(guī)范自動(dòng)化,有用前進(jìn)技術(shù)質(zhì)量。
3. 加樣
?、?標(biāo)本為血清:將血液先天然寄存1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:有必要運(yùn)用含抗凝劑的血液標(biāo)本搜集管,采血后有必要當(dāng)即倒置采血管混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)技術(shù),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
?、?加樣后及時(shí)放入孵箱。
③ 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
?、?如果選用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
?、?標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
只有清潔還不夠,要完結(jié)一項(xiàng)漂亮的ELISA實(shí)驗(yàn),不但要做足實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備,還要熟練掌握操作方法及技巧,后便是實(shí)驗(yàn)的成果了。那么猴ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的成果怎么判別剖析呢?
1.儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2.以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的IFN-Y標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的IFN-Y含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);
或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
3.技術(shù)值范圍:0-400pg/ml
4.敏感度:1.0pg/ml
ELISA的實(shí)驗(yàn)成果可用肉眼觀察顏色反應(yīng)的深淺作出判別,也可用分光光度計(jì)作測(cè)定。當(dāng)然,后者更為正確。而肉眼觀察更為簡(jiǎn)潔,而且也有必定正確性。據(jù)Adler(1980)報(bào)告,目測(cè)為±1+、2+、3+、4+相當(dāng)于分光光度計(jì)測(cè)定O.D值。
不管用哪種方法判定成果,每次都要有陽(yáng)性和陰性參考血清作對(duì)照,這樣可以消除一些外界的影響要素。
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