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動(dòng)物ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的基本原理究竟是什么呢？
動(dòng)物ELISA試劑盒是經(jīng)過(guò)酶聯(lián)免疫吸附反響進(jìn)行實(shí)驗(yàn)來(lái)技術(shù)特定物質(zhì)的試劑盒,試劑盒中會(huì)有不同濃度的規(guī)范樣品,在酶標(biāo)條中經(jīng)過(guò)固相的抗原或抗體，酶標(biāo)記的抗原或抗體，酶作用的底物反響可形成規(guī)范曲線,從而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)樣品的測(cè)定.
那么動(dòng)物ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的基本原理究竟是什么呢?總結(jié)起來(lái)包括3條:
1.抗原或抗體可經(jīng)過(guò)共價(jià)鍵與酶銜接形成酶結(jié)合物，而此種酶結(jié)合物仍能堅(jiān)持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性；
2.抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體外表，可能是蛋白和聚苯乙烯外表間的疏水性部分相互吸附，并堅(jiān)持其免疫學(xué)活性；
3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)參加底物的色彩反響來(lái)判定是否有免疫反響的存在，并且色彩反響的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的，因而，能夠按底物顯色的程度顯示實(shí)驗(yàn)成果。
不過(guò)，影響ELISA實(shí)驗(yàn)成果的要素許多，所以加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才干充分發(fā)揮其原理的優(yōu)點(diǎn)。Elisa實(shí)驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)確診辦法。因?yàn)槠湓噭┓€(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，成果判斷較客觀等要素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)查驗(yàn)的各領(lǐng)域中。
在動(dòng)物ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)血清為何要稀釋？有兩個(gè)原因：
1.比賽按捺對(duì)比明顯，應(yīng)稀釋比賽物；
2.以下降非特異性反應(yīng)，使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來(lái)。
血清稀釋用一般的PBS即可，可加1％的BSA，能有用下降ELISA本底，當(dāng)然假如你嫌費(fèi)事我覺(jué)得用生理鹽水代替PBS也不大。不管你是用直接比賽仍是直接比賽，血清的稀釋倍數(shù)必定要事前確認(rèn)，但也不必一點(diǎn)點(diǎn)，你做一個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn)即可，挑選OD在1.0左右的稀釋倍數(shù)，即你的ELISA中陰性孔OD在1.0，這么作出來(lái)的曲線對(duì)比靈敏。
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