每當聽到要提取血液樣本的核酸
你是不是也和我一樣有一種一臉懵的感覺?
是哪種物種的血?
(哺乳動物,禽類,還是兩棲類?)
是什么類型的樣本?
(新鮮血液,血凝塊,凍存血,干血斑,血清血漿…)
樣本體積多大?
如何選擇提取方法?
……
血液/循環(huán)核酸提取方案
馬上告訴你答案!
血液核酸提取方案
樣本特點:
材料成分復雜:血液樣本中包含紅細胞、白細胞、蛋白質、血小板等,提取時要保證裂解充分的同時去除無關雜質。
樣本保存:
新鮮血液可直接收集于抗凝血管,保存于-20℃。大體積血液,可先裂紅,將收集到的白細胞-20℃保存,保存效果更加。
血液中RNA在室溫兩小時即會被降解,選擇新鮮血液進行提取
。如有需長期保存,建議選擇RNA穩(wěn)定劑RNALock 血液RNA穩(wěn)定劑 (DP440,TIANGEN)進行處理,處理后的血液可在常溫保存2天,4℃保存1周,-20℃度保存半年。
小體積(200μl)血液DNA提取方案:
大體積(0.25-5ml)血液DNA提取方案:
血液RNA提取方案:
干血斑核酸提取方案
樣本特點
紙片吸附血液樣本有限,充分裂解后進行離心,需要盡可能提高提取得率和純度。
樣本保存
常溫保存
干血斑DNA提取方案
循環(huán)核酸提取方案
樣本特點
循環(huán)核酸在血清/血漿等體液中的含量很低,在腫瘤等疾病分析中樣品珍貴,對提取得率要求很高。
樣本保存
用于提取循環(huán)核酸的血清、血漿樣本,應使用可以穩(wěn)定樣本中白細胞的血液保存管進行儲存,盡可能減少在保存過程中因白細胞破裂釋放基因組DNA,干擾循環(huán)核酸提取及下游檢測實驗結果。
循環(huán)核酸DNA提取方案
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