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淺述高速逆流色譜儀的工藝原理

來源:上海同田生物技術股份有限公司   2020年09月14日 10:10  
  高速逆流色譜儀是一種新的液相色譜技術,利用液液兩相的逆流分配,在沒有固體填料、不需使用固態(tài)固定相的情況下,而是利用離心力產(chǎn)生的恒定力將固定相保留在由管道連接的一系列的腔體中,實現(xiàn)復雜化學物質的混合物分離。它以液體溶劑為固定相,螺旋柱在行星運動時產(chǎn)生的離心力,使互不相溶的兩相不斷互相混合,同時保留其中的一相,使用恒流泵連續(xù)輸入另一相,樣品溶質在兩相之間反復分配,按分配系數(shù)的次序,被依次洗脫出來,它替代了傳統(tǒng)制備型液相色譜的填充柱。
  它不用任何固態(tài)的支撐物或載體。 它利用兩相溶劑體系在高速旋轉的螺旋管內建立起一種特殊的單向性流體動力學平衡,當其中一相作為固定相,另一相作為流動相,在連續(xù)洗脫的過程中能保留大量固定相。
  在高速逆流色譜儀的運行過程中,色譜柱線圈在公轉和自轉的二維方向上高速旋轉,維持很高的離心力,即“G”力,它與公轉半徑、公轉半徑、旋轉速度等因素有關,其目的是將固定相保持在色譜柱線圈中,而不被流動相推出,“G”力的大小會體現(xiàn)在固定相保留率上,因而固定相保留率是衡量一臺高速逆流色譜儀的重要指標,固定相保留率在儀器出廠和安裝調試過程中,都可以測定出來;首先利用恒流泵在低速旋轉情況下將固定相填充到色譜柱線圈中,然后在高速旋轉情況下將流動相注入到色譜柱線圈中,測量出固定相被推出的體積,固定相保留率=(色譜柱線圈體積-固定相被推出的體積)/色譜柱線圈體積,它是一臺儀器的綜合性能指標,直接決定樣品純化過程中的分離度。
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