血清實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題答疑
血清正確的保存對(duì)實(shí)驗(yàn)有著至關(guān)重要的作用!近有很多老師詢問(wèn)了技術(shù)人員一些血清問(wèn)題,今天小編對(duì)所有問(wèn)題做了個(gè)匯總,一起來(lái)看看吧!
問(wèn)題一:如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
答:將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清,并避免反復(fù)凍融。我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若一次無(wú)法用完一瓶,建議無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
問(wèn)題二:血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?
答:沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的 轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶里(一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以,使用 產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃,沉淀會(huì)自然消失。
問(wèn)題三:如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
答:按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:
(1)解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
(2)血清分裝凍存時(shí),須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。
(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
(4)勿將血清置于37℃太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。
(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無(wú)須做此步驟。
(6)若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。
問(wèn)題四:培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長(zhǎng)期保存嗎?
答:一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí),您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_(kāi)始降解。
在此,恒遠(yuǎn)技術(shù)員解析血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):
(1)牛血清必須來(lái)自有文件證明無(wú)牛海綿狀腦病的牛群或國(guó)家。并應(yīng)具備適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測(cè)系統(tǒng)。
(2)證明所用牛血清中不含對(duì)所生產(chǎn)疫苗病毒的抑制物。
(3)有些國(guó)家還要求牛血清來(lái)自未用過(guò)反芻動(dòng)物蛋白飼料的牛群。
(4)無(wú)細(xì)菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國(guó)家要求無(wú)細(xì)菌噬菌體污染。
(5)對(duì)細(xì)胞有良好的支持繁殖作用。
(6)血清要通過(guò)濾膜過(guò)濾除菌,保證無(wú)菌。
恒遠(yuǎn)專注科研試劑盒的研發(fā)及銷售多年,涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域,滿足您實(shí)驗(yàn)所需,以實(shí)現(xiàn)與客戶的雙贏,完善的庫(kù)存及供應(yīng)體系以及高效穩(wěn)定的專業(yè)純化技術(shù),保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應(yīng)。期待您的咨詢選購(gòu)。更多精彩內(nèi)容可關(guān)注“恒遠(yuǎn)生物”VX公眾號(hào)。
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