使用凍存管儲存樣本時，嚴格要求應把凍存管放入液氮的氣相層或冰箱中保存！如果凍存管儲存于液氮液體中，液氮有一定幾率會滲入凍存管內(nèi)部，復蘇時液氮氣化導致管內(nèi)外壓力不平衡，這樣極易造成凍存管的炸裂，并具有生物危害性。

操作凍存管復蘇，全程使用安全防護設備，建議穿實驗服、戴棉質手套且在安全的實驗臺上進行操作。條件允許情況下，請佩戴護目鏡或防護面罩。由于夏季室內(nèi)溫度會高于冬季，請格外小心。

凍存細胞儲存過程中，凍存管的冷凍溫度須均勻。不均勻的受凍將會導致冰塞的產(chǎn)生，冰塞會抑制兩側的液體溫度傳遞進而產(chǎn)生危險的高壓力并導致凍存管受損。

凍存的樣本量不要超過凍存管要求的工作體積。

凍存管使用不當， 會有爆、生物安全威脅及人身傷害等風險。

細胞凍存流程

用預熱過的 PBS 對細胞進行沖洗，棄去 PBS 后，加入含 EDTA的胰酶消化液對細胞進行消（薄地覆蓋表面即可，濃度須 根據(jù)不同的細胞系進行調整）。37 ℃消化 細胞 3–5分鐘，不可過度消化。一旦細胞從底部脫離，即可用含血清培養(yǎng)基終止消化并吸管輕吹打以重懸細胞 。離心細胞重懸液，棄上清。用適當體積含血培養(yǎng)基 重懸細胞。將細胞重懸液以 1:11 比例與凍存液 進行混合后轉移至凍存管中。細胞的濃度應為 1–5 ×106 細胞 /ml。含有細胞的凍存管須按照1度/min的冷卻速率進行凍。將凍存管插在含異丙醇的凍存盒小室并放置在 -70 ℃的冰箱中可以實現(xiàn)上述要求。如果凍存液中含有其他類型的樣品時，則需要將凍存管在 .20 ℃，-70 ℃或者液氮的氣相層進行直接凍存。