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高效液相色譜儀定量環(huán)不同有什么影響?

來源:加拿大AFP   2021年08月20日 18:04  
  定量環(huán)適用于不銹鋼或生物相容性PEEK制成的進樣器。高效液相色譜儀定量環(huán)不同有什么影響?
  如果儀器是自動進樣:很明顯,回路的大小決定了你的最大進樣量。如果使用100ul定量環(huán),則最大進樣量必須小于100ul。如果儀器是手動進樣:理論上,精確進樣量是循環(huán)的一半以上。也就是說,如果你的儀器的是10ul,進樣量在5ul-10ul范圍內(nèi)更準確。如果要進樣1ul,結(jié)果的準確性就會受到質(zhì)疑。常見的手動注射回路為20ul,注射量大部分為滿刻度。因為人工操作誤差大。因此,在同一個實驗中,在平行條件下,變化的主要是試液的濃度,而不是進樣量的大小。另外,一定要注意樣品的清潔度,一定要過濾。否則,不溶性顆粒會堵塞回路并影響進樣量。
  定量環(huán)使用注意事項:
  進樣量和定量環(huán)是否必須匹配?如果為20ul,則按藥典規(guī)定進樣10ul。當進樣量與回路匹配時,進樣量應該是回路的2倍左右,哪個更準確?
  這種情況下,可以換成10微升的循環(huán)來解決問題。您不能使用10微升進樣針將樣品注入20微升定量環(huán)。這是因為(1)10微升樣品在充滿流動相的20微升定量環(huán)中必須有樣品溶液的擴散過程。濃度會不斷變化,導致每次進樣的峰面積不同,無法準確測定。(2)從進樣回路的結(jié)構(gòu)上也可以看出,10微升的進樣量不可能全部進入定量回路。注射殘留物無法消除。因此,這種進樣方式會在每次進樣量之間造成較大的偶然誤差。鑒于以上兩個原因,進樣量至少是定量環(huán)體積的2倍才能填充樣品整個定量環(huán)消除了濃度差引起的擴散過程和進樣殘留引起的進樣量誤差,確保進樣準確。

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