牛津杯在做抑菌試驗(yàn)時(shí)的操作步驟如下:
將已滅菌的瓊脂培養(yǎng)基加熱到*融化,倒在培養(yǎng)皿內(nèi),每皿15ml(下層),待其凝固。此外,將融化的PDA培養(yǎng)基冷卻到50℃左右混入試驗(yàn)菌17號(hào),將混有菌的培養(yǎng)基5ml加到已凝固的培養(yǎng)基上待凝固(上層)。
以無菌操作在培養(yǎng)基表面直接垂直放上牛津杯(內(nèi)徑6mm、外徑8mm、高10 mm的圓形小管,管的兩端要光滑,也可用玻璃管、瓷管),輕輕加壓,使其與培養(yǎng)基接觸無空隙,在杯中加入待檢樣品(發(fā)酵液),杯子一般可以裝240微 升,勿使其外溢。加滿后置37℃培養(yǎng)16-18小時(shí),觀察結(jié)果,抑菌圈用尺直接量就可以。在培養(yǎng)中,一方面試驗(yàn)菌開始生長,另一方面抗生素呈球面擴(kuò)散,離杯越近,抗生素濃度越大,離杯越遠(yuǎn)抗生素濃度越小。隨著抗生素濃度減小,有一條抑菌濃度帶,在帶范圍內(nèi),菌不能生長,而呈透明的圓圈,這就叫“抑菌圈”。抗生素濃度越高,抑菌圈越大。
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