多色流式實驗的意義

流式多色實驗幫助研究者得到更精細的細胞分群和更精準(zhǔn)的細胞特性分析。鑒于多色流式在科研中應(yīng)用越來越廣泛，多色流式實驗結(jié)果和機器的直接相關(guān)性和緊密性，我們必須充分了解流式細胞儀，根據(jù)流式細胞儀的性能參數(shù)，試劑特性，抗原表達特點，來設(shè)計符合實驗?zāi)康牡?流式實驗方案，提高流式數(shù)據(jù)可靠性與準(zhǔn)確性。

BD流式細胞儀

BD FACSCanto™ 3激光10色		BD LSR Fortessa™ X-20 5激光18色
BD FACSVerse™ 3激光8色		三角和八角檢測器

1、機器試劑一站式解決方案第一步：充分了解流式細胞儀

流式細胞儀的狀態(tài)（Cytometer Performance）直接關(guān)系多色流式的結(jié)果，所以機器的日常維護和質(zhì)控是非常重要的。

Initial Setup of a Cytometer

Daily Workflow

讓我們先從解讀機器質(zhì)控報告 Cytometer Setup & Tracking（CST）Report 開始了解機器。

  • rSDEN：Robust standard deviation of electronic noise ；
  • Qr：Relative detection efficiency for each detector；
  • Br：Relative optical background；
  • rCV：Robust coefficient of variation for each setup bead；

Cytometer Performance-CS&T

2. 機器試劑一站式解決方案第二步：不能不了解的參數(shù)

分辨率（Resolution）：衡量流式細胞儀區(qū)分弱染色信號和未染色信號程度的參數(shù)

染色指數(shù)（Stain Index）：不同熒光標(biāo)記抗體在特定機器上分辨率的度量標(biāo)準(zhǔn)

3. 機器試劑一站式解決方案第三步：設(shè)計panel，優(yōu)化panel

人外周血8色T細胞Panel設(shè)計

   流式細胞儀：BD canto II 4 Blue-2 Red-2 Violet
   檢測指標(biāo)： CD3 CD4 CD8 CD25 CD127 CD45RA CD27 CCR7

Panel優(yōu)化前后對比：

BD HorizonTM 新熒光

BD HorizonTM Brilliant Blue 515:
點亮您的藍激光，F(xiàn)ITC 通道的最佳替代染料
亮度約是FITC 的7 倍，和PE 通道有更小的溢漏

BD HorizonTM PE-CF594:
以亮度上的絕對優(yōu)勢，可替代PE-Texas Red® /ECD/PE-Alexa Fluor® 610

BD HorizonTM Brilliant Violet 家族:
讓您的紫激光充分運行起來
BV421 BV510 BV605 BV650 BV711 BV786 BV421
比PE 更亮，弱表達抗原的第一選擇，可替代BD HorizonTM V450, eFluor450,Pacific BlueTM

BD HorizonTM Brilliant UltraViolet :
355 激光管的新選擇
BUV395 BUV496 BUV661 BUV737 BUV805