激光共聚焦顯微鏡由顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)、激光光源、掃描器及檢測(cè)及處理系統(tǒng)4部分組成,采用相干性較好的激光作為光源,在傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)上采用共軛聚焦原理和裝置,并利用計(jì)算機(jī)對(duì)圖象進(jìn)行處理的一套觀察、分析和輸出系統(tǒng)。
顯微鏡的應(yīng)用廣泛,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可靠,分析處理軟件功能豐富。在細(xì)胞及分子生物學(xué)、藥物篩選、大腦和神經(jīng)科學(xué)、免疫學(xué)、形態(tài)學(xué)、食品衛(wèi)生、發(fā)酵、遺傳學(xué)、藥理學(xué)等領(lǐng)域具有不可替代的作用。
一、細(xì)胞物理會(huì)生物化學(xué)測(cè)定:
激光共聚焦顯微鏡可進(jìn)行低光探測(cè)、活細(xì)胞定量分析和重復(fù)的熒光定量分析,從而能對(duì)單細(xì)胞或細(xì)胞群的溶酶體、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、細(xì)胞骨架、結(jié)構(gòu)性蛋白質(zhì)、DNA、RNA、酶和受體分子等細(xì)胞特異結(jié)構(gòu)的含量、組份及分布進(jìn)行定性、定量、定時(shí)及定位測(cè)定;同時(shí)還可測(cè)定分子擴(kuò)散、膜電位、氧化-還原狀態(tài)和配體結(jié)合等生化反應(yīng)變化程度。
二、圖像重建:
顯微鏡通過(guò)薄層光學(xué)切片功能,可獲得三維數(shù)據(jù),經(jīng)過(guò)計(jì)算機(jī)圖像處理及三維重建軟件,沿X、Y和Z軸或其它任意角度來(lái)觀察標(biāo)本的外形及剖面,并得到三維的立體結(jié)構(gòu),從而能十分靈活、直觀地進(jìn)行形態(tài)觀察,并揭示亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的空間關(guān)系。
三、熒光的定量、定位分析:
顯微鏡可對(duì)單標(biāo)記或雙標(biāo)記細(xì)胞及組織標(biāo)本的共聚焦熒光進(jìn)行定量分析,并顯示熒光沿Z軸的強(qiáng)度變化;同時(shí)還可自動(dòng)將熒光圖像與象差圖像重疊以顯示熒光在形態(tài)結(jié)構(gòu)上的精確定位。
激光共聚焦顯微鏡還可測(cè)量標(biāo)本深層的熒光分布。也適用于高靈敏度的快速熒光測(cè)定,準(zhǔn)確地監(jiān)測(cè)抗原表達(dá)、熒光原位雜交斑點(diǎn)及細(xì)胞結(jié)合的形態(tài)學(xué)特性,并作定量分析。
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