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培養(yǎng)基瓊脂粉出現(xiàn)不凝固現(xiàn)象的因素
培養(yǎng)基瓊脂粉一般為白色、淡黃色或淡灰色粉末狀，在冷水中不溶解，加熱煮沸或高壓滅菌可使瓊脂溶解，冷卻后可凝成固態(tài)，反復(fù)加熱和冷卻雖然可以使瓊脂在液態(tài)和固態(tài)多次轉(zhuǎn)換，但瓊脂的凝膠強(qiáng)度會(huì)越來(lái)越低。外觀白而沒(méi)有光澤，雜質(zhì)含量高,透明度很差(濃度的水溶液溶解后,可發(fā)現(xiàn)大量的水中不溶物)。如果用冷水或溫水浸泡30分鐘左右，它很快就吸水膨脹復(fù)原，而真瓊脂沒(méi)有這種現(xiàn)象。
培養(yǎng)基瓊脂粉的使用注意事項(xiàng)：
1、溶解干粉時(shí)，建議水溫在40℃以下，最高不超過(guò)60℃。瓊脂在遇到熱水時(shí)，表面易吸水變硬，結(jié)成硬塊，不利于分散溶解。因此在進(jìn)行干粉溶解時(shí)，宜用冷水，并不停攪拌至分散均勻無(wú)團(tuán)塊，再進(jìn)行加熱處理；
2、滅菌前需進(jìn)行加熱煮沸使瓊脂*溶解，分散均勻，方可進(jìn)行分裝試管或錐形瓶，否則分裝后可能出現(xiàn)瓊脂分布不均，凝固性不一；滅菌前的加熱煮沸溶解同時(shí)有助于加快高壓滅菌過(guò)程的熱穿透，提高滅菌效果，降低滅菌失敗的幾率；
3、已凝固的培養(yǎng)基不可以再次高溫高壓滅菌。若培養(yǎng)基內(nèi)成分較穩(wěn)定，可重新沸水浴溶化一次使用；
4、需添加抗生素或其他不穩(wěn)定成分的培養(yǎng)基，需在臨用前，待培養(yǎng)基冷卻至50-55℃時(shí)加入，過(guò)早或過(guò)熱時(shí)加入這些成分，易導(dǎo)致不穩(wěn)定成分分解，降低培養(yǎng)基使用效果；
5、已凝固的培養(yǎng)基不可反復(fù)多次加熱溶化使用。反復(fù)加熱易使培養(yǎng)基內(nèi)營(yíng)養(yǎng)成分分解，瓊脂的凝膠強(qiáng)度下降，一般成分較穩(wěn)定的培養(yǎng)基允許溶化一次使用。
6、已凝固的培養(yǎng)基，不可在結(jié)冰條件下保存。培養(yǎng)基結(jié)冰會(huì)使瓊脂內(nèi)部結(jié)構(gòu)破壞，導(dǎo)致失水或凝固性變差，瓊脂變性。
培養(yǎng)基瓊脂粉不凝固的因素：
1、培養(yǎng)基PH值過(guò)低，偏酸，水解。
2、所加瓊脂量不夠，增加用量。攪拌不均勻，倒板前沒(méi)有充分搖勻，凝固不均勻。
3、瓊脂質(zhì)量不過(guò)關(guān)，瓊脂條在使用時(shí)添加量要稍微高一點(diǎn)，瓊脂粉是不是新買(mǎi)的。
4、滅菌溫度過(guò)高，加熱時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。PH改變或破壞了瓊脂的凝固度。
5、培養(yǎng)基沒(méi)有加熱溶解夠不夠，就沒(méi)有凝固。是不是瓊脂加錯(cuò)了，營(yíng)養(yǎng)瓊脂不會(huì)凝固。
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