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梅里埃API細(xì)菌鑒定試劑盒使用操作方法

來源:上海華微泰達(dá)生物科技有限公司   2022年02月14日 10:56  

梅里埃API試劑盒細(xì)菌鑒定試劑盒種類如下:

(注):每種試劑盒都需要相關(guān)配套試劑才能使用。

編號(hào)產(chǎn)品名稱(鑒定范圍)包裝
10100腸桿菌科和其它非苛養(yǎng)革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒(比色法)50測試/盒
10300李斯特氏菌屬鑒定試劑盒(比色法)10條/盒
10400奈瑟氏球菌和嗜血桿菌鑒定試劑盒(比色法)10條/盒
10500酵母菌鑒定試劑盒(比色法)10條/盒
20050非苛養(yǎng)非腸道革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒(比色法)25條/盒
20100腸桿菌和其他非苛養(yǎng)革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒(比色法)25條/盒
20160腸桿菌和其他非苛養(yǎng)革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒(比色法)100條/盒
20210酵母菌鑒定試劑盒(比色法)25條/盒
20300厭氧菌鑒定試劑盒(比色法)25條/盒
20500葡萄球菌、微球菌和相關(guān)菌屬鑒定試劑盒(比色法)25條/盒
20600鏈球菌及相關(guān)微生物鑒定試劑盒(比色法)25條/盒
20701腸桿菌科鑒定試劑盒(比色法)25條/盒
20800彎曲桿菌鑒定試劑盒(比色法)12條/盒
20900棒狀桿菌鑒定試劑盒(比色法)12條/盒
50300碳水化合物鑒定試劑條(API50CH)10條/盒
5041050 CHL(用于乳酸桿菌)10×10mL
5043050 CHB(用于芽胞桿菌)10×10mL
25200酶活性試劑條

25條/盒

梅里埃API細(xì)菌鑒定試劑盒使用操作方法:

例:腸桿菌和其他非苛養(yǎng)革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒(比色法)


【預(yù)期用途】
該產(chǎn)品用于腸桿菌和其它非苛養(yǎng)革蘭氏陰性桿菌的鑒定。
該產(chǎn)品用于可導(dǎo)致腹瀉、血流感染、尿路感染等的腸桿菌和其它非苛養(yǎng)革蘭氏陰性桿菌的鑒定,臨床常見樣本來源有糞便、直腸拭子、尿、血等。
【檢驗(yàn)原理】
API 20 E 試條由 20 個(gè)含干燥底物的微量小管組成。將菌懸液接種到管內(nèi),使小管內(nèi)底物溶解。孵育過程中,所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物通過自發(fā)反應(yīng)或加入附加試劑后而變色。鑒定結(jié)果可根據(jù)說明書的判讀表進(jìn)行讀出,也可參照生化譜檢索手冊或鑒定軟件,得到鑒定結(jié)果。
【主要組成成分】
試劑盒組成(用于 25 個(gè)敏感性測試)
- 25 個(gè) API 20 E 試條
- 25 個(gè)孵育盒
- 25 張結(jié)果報(bào)告單
- 1 個(gè)封口夾
試劑盒組成(用于 100 個(gè)敏感性測試)
- 100 個(gè) API 20 E 試條(4x25 試條)
- 100 個(gè)孵育盒
- 100 張結(jié)果報(bào)告單
- 1 個(gè)封口夾
試劑條成分

API 20 E 試條的成分請(qǐng)參閱說明書后的結(jié)果判讀表。

【檢驗(yàn)方法】
氧化酶試驗(yàn):
必須按照制造商的使用說明進(jìn)行氧化酶試驗(yàn)。由于它是最終圖譜的組成部分,請(qǐng)將其結(jié)果記錄于報(bào)告單上(第二十一個(gè)試驗(yàn))。
試條的準(zhǔn)備:
1.準(zhǔn)備一個(gè)培養(yǎng)盒(盤和蓋子),倒入約 5mL 蒸餾水或軟化水【或其它不含添加劑或不含有能產(chǎn)生揮發(fā)性氣體(如 Cl2, CO2,等)的化學(xué)物質(zhì)的水】于盤的蜂窩小凹中,造成一個(gè)濕室。
2.在盤的長邊寫上菌株號(hào)(不要寫在蓋上,因?yàn)椴僮鬟^程中很容易將蓋子放到其它試條上)
3.從包裝中取出試條。

4.將試條置于培養(yǎng)盒中。
注意:API 20 E 只能用于腸道細(xì)菌和或非苛養(yǎng)的革蘭陰性桿菌??琉B(yǎng)菌由于對(duì)營養(yǎng)有特殊要求并且需要合適的防護(hù)措施(例如布魯氏菌屬 Brucella 和法朗西絲菌屬 Francisella),這些菌沒有包括在 API 20 E 數(shù)據(jù)庫中。 必須采用其它方法,來排除或確認(rèn)這些菌的存在。
接種物的準(zhǔn)備
 根據(jù)“警告及注意”一欄所列方法打開一安瓿 API 0.85% NaCl 培養(yǎng)基(5mL)或一安瓿 API 懸浮培養(yǎng)(5mL), 或用含 5mL 0.85 NaCl 鹽水或不含添加劑的無菌蒸餾水。
 用吸管或 PSIpette 從分離平板上挑取單個(gè)分純菌落至懸浮基物中。建議使用新鮮培養(yǎng)物(18-24時(shí))。 仔細(xì)研勻以達(dá)到均一的細(xì)菌懸液。
制備好的菌懸液必須立即使用。
注意:大多數(shù)弧菌(Vibrio)均嗜鹽,如懷疑菌株為弧菌,請(qǐng)使用 0.85% NaCl (5mL)培養(yǎng)基。
試條的接種
 用同一根吸管,將菌懸液加入到試條的小管內(nèi)。為避免在小管的基底部形成氣泡,請(qǐng)將試條輕微向前
傾斜并把吸管或者 PSI 管緊靠小杯邊緣加入菌液):
- CIT、VP 和 GEL 小管,菌液需充滿的管部和杯部。
- 其它管僅充滿管部(不是杯部)。
- 在試驗(yàn) ADH, LDC, ODC, H2S 和 URE 小杯內(nèi)加入礦物油以形成厭氧環(huán)境。
 蓋上培養(yǎng)盒。于 36℃±2℃孵育 18~24 小時(shí)。
【陽性判斷值】
請(qǐng)參考本說明書后的“反應(yīng)鑒定表”,表中列出了各種生化反應(yīng)預(yù)期結(jié)果范圍。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
試條的判讀
 孵育后,根據(jù)判讀表表判讀各反應(yīng)結(jié)果。
 如果 3 個(gè)或 3 個(gè)以上測定(GLU 試驗(yàn)+或-)為陽性結(jié)果,記錄所有自發(fā)反應(yīng)于結(jié)果報(bào)告單上并觀察需

附加試劑的試驗(yàn)的結(jié)果:
- TDA 試驗(yàn):加 1 滴 TDA 試劑。深褐色為陽性反應(yīng),記錄于報(bào)告單上。
- IND 試驗(yàn):加 1 滴 JAMES 試劑。整個(gè)反應(yīng)管出現(xiàn)粉紅色者為陽性,記錄于報(bào)告單上。
- VP 試驗(yàn):加 1 滴 VP 1 和 1 滴 VP 2 試劑。至少等待 10 分鐘,出現(xiàn)粉紅或紅色者表明為陽性結(jié)果,記錄于報(bào)告單上。如淺粉紅色在 10 至 12 分鐘內(nèi)出現(xiàn),判斷結(jié)果為陰性。
注意:吲哚產(chǎn)生試驗(yàn)必須最后進(jìn)行,因?yàn)樵摲磻?yīng)釋放的氣體產(chǎn)物會(huì)千擾試條的其他試驗(yàn)。在加入附加試劑后,請(qǐng)小心勿調(diào)換培養(yǎng)盒蓋。
 如果加入附加試劑前陽性結(jié)果(包括 GLU 試驗(yàn))的數(shù)量少于 3 個(gè):
- 重新培養(yǎng) 24 小時(shí)(土 2 小時(shí)),且不要加任何試劑。
- 重新進(jìn)行需要加入附加試劑的試驗(yàn)(如前說明)。
- 為了完成鑒定,可能需要進(jìn)行補(bǔ)充試驗(yàn)(參考有關(guān)鑒定的段落)。



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