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高速逆流色譜屬于逆流色譜的范疇，它的主要分離原理是利用樣品在固定相和流動相之間的差異也就是分配比不同而進(jìn)行分離的，值得注意的是逆流色譜的固定相和流動相都是液體，其主要優(yōu)點(diǎn)是沒有傳統(tǒng)色譜的死吸附，樣品的回收率高等特點(diǎn)。
逆流色譜源于逆流分溶法，也就是用實(shí)驗室經(jīng)常使用的分液漏斗進(jìn)行連續(xù)的液液萃取，根據(jù)樣品在兩種互不相溶的溶劑中分配比不同而進(jìn)行分離。
高速逆流色譜(high speed countercurrentchromatography，簡稱HSCCC)是一種液-液色譜分離技術(shù)，它的固定相和流動相都是液體，沒有不可逆吸附，具有樣品無損失、無污染、高效、快速和大制備量分離等優(yōu)點(diǎn)。由于HSCCC與傳統(tǒng)的分離純化方法相比具有明顯的優(yōu)點(diǎn)，因此此項技術(shù)己被廣泛應(yīng)用于中藥成分分離、保健食品、生物化學(xué)、生物工程、天然產(chǎn)物化學(xué)、有機(jī)合成、環(huán)境分析等領(lǐng)域。
高速逆流色譜作為一種分離方法，影響因素主要有溶劑體系的選擇，旋轉(zhuǎn)速度，流動相的流速，溫度等影響。
溶劑體系選擇即條件的摸索，相當(dāng)于傳統(tǒng)色譜摸流動相的條件，不同的是高速逆流色譜條件的摸索主要是指樣品在固定相和流動相兩者之間的分配的比值，待分離的樣品的K值*好在0.6～1.5范圍之內(nèi)，樣品才會有一個好分離效果。
轉(zhuǎn)速主要體現(xiàn)在固定相的保留率上，一般轉(zhuǎn)速越高固定相保留率也比較高，分離效果也相對的好一些。流速要適中，太大會降低固定相保留率，太低會容易拖尾。溫度是一個非常重要的參數(shù)，溫度恒定對體系的重復(fù)性有著決定性的影響，比如說冬天，夏天可能同一個溶劑體系就會有著不同的分離效果。
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