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ODS填料的粒度主要影響填充柱的兩個(gè)參數(shù)，即柱效和背壓。粒度越小，其表面積越大，填充柱的柱效超高；然而粒度越小，柱壓越大，柱壓的增加限制了粒度小于3pm的ODS填料應(yīng)用。在相同選擇性條件下，提高柱效可提高分離度，但不是因素。
如果固定相選擇是正確，但是分離度不夠，那么選用更小粒度的ODS填料是很有用的。3umODS填料填充柱的柱效比相同條件下的5pmODS填料的柱效提高近30%；然而，3um的色譜柱的背壓卻是5um的2倍。與此同時(shí)，柱效提高意味著在相同條件下可以選用更短的色譜柱，即相同的塔板數(shù)或分離能力，但是柱長(zhǎng)更短，以縮短分析時(shí)間。另外，可以采用低粘度的溶劑做流動(dòng)相或增加色譜柱的使用溫度，比如用乙睛代替甲醇，以降低色譜柱的壓力。
ODS填料操作要點(diǎn)
1.首先對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行過濾，根據(jù)需要選擇不同的濾膜，一般為有機(jī)系和水系，常用的孔徑為0.20um和0.45um。
2.對(duì)抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
3.正常情況下，儀器首先用甲醇沖洗10-20分鐘，然后再進(jìn)入測(cè)試用流動(dòng)相(如流動(dòng)相為緩沖試劑，則要二次重蒸水沖洗10-20分鐘，直至色譜柱中有機(jī)相沖凈為止)。
4.一般情況下，流動(dòng)相沖洗20-30分鐘后，儀器方可穩(wěn)定，重要的是儀器基線走后，方可進(jìn)樣測(cè)試。
5.同時(shí)進(jìn)兩針標(biāo)樣，將其結(jié)果相比較，其結(jié)果的比值在0.98-1.02之間后，就可以正式進(jìn)行樣品的測(cè)試了。
6.樣品測(cè)試結(jié)束后，就要進(jìn)行色譜儀及色譜柱的清洗和維護(hù)。如流動(dòng)相為緩沖試劑，同樣也要用重蒸水清洗10-20分鐘，方可用有機(jī)相進(jìn)行保護(hù)，否則，有損色譜柱。
7.關(guān)機(jī)時(shí)，先關(guān)計(jì)算機(jī)，再關(guān)液相色譜。
8.填寫登記本，由負(fù)責(zé)人簽字。
ODS填料注意事項(xiàng)
1.流動(dòng)相均需色譜純度，水用20M的去離子水。脫氣后的流動(dòng)相要小心振動(dòng)盡量不引起氣泡。
2.柱子是非常脆弱的，次做的方法，先不要讓液體過柱子。
3.所有過柱子的液體均需嚴(yán)格的過濾。
4.壓力不能太大，不要超過150kgf/cm2。
5.因?yàn)榫彌_試劑遇有機(jī)溶劑，會(huì)結(jié)晶，有損色譜柱，所以，每次由有機(jī)相變流動(dòng)相或流動(dòng)相變有機(jī)相均需用蒸餾水清洗。
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