細(xì)胞凍存時(shí),培養(yǎng)基、血清、DMSO按什么比例配制?
DMSO是目前常用的細(xì)胞凍存保護(hù)劑,一般使用時(shí)終濃度控制在5~10%,最佳濃度取決于細(xì)胞類型。
一般來(lái)說(shuō),存活率比較高的細(xì)胞系,培養(yǎng)基、血清、DMSO按照7:2:1的比例新鮮配制使用。
細(xì)胞計(jì)數(shù)后,用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞,至5×10^6 ~ 1×10^7 cells/mL,然后1~1.5mL/管分裝凍存。
對(duì)于存活率較低的細(xì)胞系,或者需要長(zhǎng)時(shí)間保存的細(xì)胞系,可以增加凍存液中的血清濃度,血清和DMSO按9:1的比例配制。
另外,還有商品化的無(wú)血清凍存液可以選擇,不需要預(yù)先配制。一般會(huì)含有多種保護(hù)劑成分,適用于特別珍貴的細(xì)胞的保存,例如干細(xì)胞、分離后的免疫細(xì)胞等等。
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