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高速逆流色譜儀是近30年發(fā)展起來的一種具有高靈敏度、高選擇性的高效快速分離分析技術(shù)。它既能用于微量組分的分析測(cè)定，又能用于大量的制備分離，靈活多樣，其應(yīng)用范圍已超過其他各種分離方法，尤其在中藥樣品的分析分離方面更充分發(fā)揮它的特長，為推動(dòng)該領(lǐng)域的進(jìn)步和發(fā)展作出了巨大貢獻(xiàn)。
高速逆流色譜儀是利用試樣中各組分在色譜柱中的淋洗液和固定相間的分配系數(shù)不.同，當(dāng)試樣隨著流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱中后，組分就在其中的兩相間進(jìn)行反復(fù)多次的分配（吸附一脫附一放出）由于固定相對(duì)各種組分的吸附能力不同（即保存作用不同），因此各組份在色譜柱中的運(yùn)行速度就不同，經(jīng)過一定的柱長后，便彼此分離，順序離開色譜柱進(jìn)入檢測(cè)器，產(chǎn)生的離子流信號(hào)經(jīng)放大后，在記錄器上描繪出各組分的色譜峰。
目前，高速逆流色譜儀主要用于以下領(lǐng)域：
1、天然藥物化學(xué)、中藥化學(xué)。這是國內(nèi)目前*泛的使用方法，為了弄清楚植物中的微量有效成分，開放手工色譜柱早已不夠用了，幾乎每個(gè)搞天然藥化的實(shí)驗(yàn)室都至少有一臺(tái)液相。
2、藥物雜質(zhì)純化。由于合成工藝并不能做到*產(chǎn)率，往往伴有副產(chǎn)品，如何獲得微量的雜質(zhì)并確定結(jié)構(gòu)和含量，這就得靠液相色譜。
3、蛋白純化。相對(duì)于前者，蛋白純化的起步要稍微晚一點(diǎn)，但是發(fā)展很迅速。同時(shí)，由于外國儀器廠家在這個(gè)領(lǐng)域的優(yōu)勢(shì)不算太大，目前國內(nèi)也在這個(gè)領(lǐng)域加快發(fā)展，搶占地盤。
高壓泵的一般壓強(qiáng)為l.47～4.4X10Pa，流速可調(diào)且穩(wěn)定，當(dāng)高壓流動(dòng)相通過層析柱時(shí)，可降低樣品在柱中的擴(kuò)散效應(yīng)，可加快其在柱中的移動(dòng)速度，這對(duì)提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動(dòng)相貯存器和梯度儀，可使流動(dòng)相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變，包括改變洗脫液的極性、離子強(qiáng)度、PH值，或改用競爭性抑制劑或變性劑等。這就可使各種物質(zhì)都能獲得有效分離。
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