凝膠是由膠體粒子構(gòu)成的立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。網(wǎng)眼里吸滿水后凝膠膨脹呈柔軟而富于彈性的半固體狀態(tài)。人工合成的凝膠網(wǎng)眼較均勻地分布在凝膠顆粒上有如篩眼,小于篩眼的物質(zhì)分子均可通過,大于篩眼的物質(zhì)分子則不能,故稱為“分子篩”。
凝膠之所以能將不同分子的物質(zhì)分開是因?yàn)楫?dāng)被分離物質(zhì)的各成分通過凝膠時(shí),小于篩眼的分子將滲入凝膠網(wǎng)眼,并隨著流動(dòng)相的移動(dòng)沿凝膠網(wǎng)眼孔道移動(dòng),從一個(gè)顆粒的網(wǎng)眼流出,又進(jìn)入另一顆粒的網(wǎng)眼,如此連續(xù)下去,直到流過整個(gè)凝膠柱為止,因而流程長(zhǎng)、阻力大、流速慢;大于篩眼的分子則被篩眼排阻而不能進(jìn)入凝膠網(wǎng)眼,只能隨流動(dòng)相沿凝膠顆粒的間隙流動(dòng),其流程短、阻力小、流速快,比小分子先流出層析柱;小分子流出。分子大小介于排阻不能進(jìn)入或滲入凝膠篩眼之間的物質(zhì)分子,則居中流出。這樣被分離物質(zhì)即被按分子的大小分開。
BD促凝膠管367955的操作模式特別適于分離蛋白質(zhì)、核酸片段等生物大分子,具有分離能力強(qiáng)、速度快等特點(diǎn)。將板上的凝膠移到毛細(xì)管中作支持物進(jìn)行的電泳。凝膠具有多孔性,起類似分子篩的作用,溶質(zhì)按分子大小逐一分離。凝膠粘度大,能減少溶質(zhì)的擴(kuò)散,所得峰形尖銳,能達(dá)到柱效。常用聚丙烯酞胺在毛細(xì)管內(nèi)交聯(lián)制成凝膠柱,可分離測(cè)定蛋白質(zhì)和的分子量或堿基數(shù),但其制備麻煩,使用壽命短。如采用粘度低的線性聚合物如甲基纖維素代替聚丙烯酞胺,可形成無凝膠但有篩分作用的無膠篩分介質(zhì),它能避免空泡形成,比凝膠柱制備簡(jiǎn)單,壽命長(zhǎng),但分離能力比凝膠柱略差。
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