高速逆流色譜儀與其它色譜技術不同的是它不需任何固態(tài)載體,因此能避免固相載體表面與樣品發(fā)生反應而導致樣品的污染、失活、變性和不可逆吸附等不良影響,同時它也具有適用范圍廣、快速、進樣量大、費用低、回收率高等優(yōu)點,在天然產物活性成分的分離純化領域倍受重視。
高速逆流色譜儀工作原理的具體表現(xiàn)為一根100多米長的螺旋空管,注入互不相溶的兩相溶劑中的一相作為固定相,然后作行星運動;同時不斷注入另一相,由于行星運動產生的離心力場使得固定相保留在螺旋管內,流動相則不斷穿透固定相;這樣兩相溶劑在螺旋管中實現(xiàn)的接觸、混合、分配和傳遞。由于樣品中各組分在兩相中的分配比不同,因而能使樣品中各組分得到分離。
下面咱們來詳細介紹下高速逆流色譜儀具備的優(yōu)點:
1、操作簡便,容易掌握。分離過程中對樣品的前處理要求低,僅需一般的粗提物即可進行HSCCC的制備分離或分析。
2、回收率高。由于沒有固體載體,不存在吸附、降解和污染,理論上樣品的回收率可達100%。在實驗中只要調整好分離條件,一般都有很高的回收率。
3、重現(xiàn)性好。如果樣品不具有較強的表面活性作用,酸堿性也不強,那么多次進樣,其分離過程穩(wěn)定性都保持很好、峰的保留相對標準偏差也小于2%,重現(xiàn)性相當好。
4、應用范圍廣,適應性好。由于溶劑系統(tǒng)的組成與配比可以是無限多的,因而從理論上講HSCCC適用于任何極性范圍的樣品的分離,所以在分離天然化合物方面具有其獨到之處。并因不需固體載體,而消除了氣液色譜中由于使用載體而帶來的吸附現(xiàn)象,特別適用于分離極性物質和其它具有生物活性的物質。
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