細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)又稱單細(xì)胞分離培養(yǎng)技術(shù),即在體外將一個細(xì)胞從細(xì)胞群中分離出來,使其能夠復(fù)制成一個新的細(xì)胞群培養(yǎng)體系。由單個細(xì)胞形成的細(xì)胞群稱為克隆,純化后的細(xì)胞群稱為細(xì)胞系,即細(xì)胞培養(yǎng)。
各細(xì)胞的遺傳和生物學(xué)特性非常相似和一致,有利于不同細(xì)胞群形態(tài)和功能的比較研究。
菌落(克隆)計數(shù):在倒置顯微鏡下觀察、計數(shù)直徑大于75μm或含有50個以上細(xì)胞的克隆。
血細(xì)胞計數(shù)板細(xì)胞數(shù)/ml=4個大正方形細(xì)胞總數(shù)/4×104
細(xì)胞計數(shù)器/細(xì)胞分析儀(凱西,德國)
細(xì)胞活力0.4%臺盼藍(lán)染色
MTT法可用于評價細(xì)胞的相對數(shù)量和活性
細(xì)胞的冷凍保存和復(fù)蘇:
低溫保存:4℃緩慢冷凍60分鐘(可延長)
-20℃下40-60分鐘(不能太長,可以跳過*)
-80℃(半年內(nèi)轉(zhuǎn)液氮/過夜)程控冷卻儀表1-3℃/min轉(zhuǎn)液氮
復(fù)蘇:38℃溶解,注意水面不能接觸凍存管蓋邊
上清液以低速(500轉(zhuǎn)/分)離心除去,加入相同的培養(yǎng)基,輕輕吹掃上清液,接種于適當(dāng)大小的培養(yǎng)瓶中。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。