圖 1:穩(wěn)定 假設(shè)的膜蛋白在合成納米盤中的示意圖。在圖例中,是使用 SMA 作為穩(wěn)定聚合物,但DIBMA也能起到這樣的作用。
合成納米盤是納米盤領(lǐng)域的第二大選擇。它們?cè)谀承╆P(guān)鍵點(diǎn)與 MSP納米盤不同,但也存在某些相似之處。
合成納米盤的制備
與MSP納米盤的三種制備方式(微信公眾號(hào)“德國(guó)庫(kù)柏生物”查閱系列文章:什么是納米盤Nanodisc?)相比,合成納米盤只能直接從完整細(xì)胞中提取。在此過(guò)程中,使用的合成聚合物具備雙重功能。首先,它溶解細(xì)胞膜,類似于去污劑。然后,使用天然細(xì)胞磷脂在膜蛋白周圍形成納米盤結(jié)構(gòu)。這一過(guò)程可類比成曲奇成型刀,即通過(guò)沖壓加工,將曲奇與面團(tuán)分離。
尺寸
合成納米盤的尺寸是可變的。決定合成納米盤直徑的主要因素是納米盤包圍和穩(wěn)定的膜蛋白復(fù)合物的尺寸。因此,對(duì)于合成納米盤,無(wú)法給出確定的尺寸。但是,合成納米盤的尺寸范圍包含在MSP納米盤的尺寸范圍之中(表 2)。這適用于迄今為止所有已確定的聚合物。若合成納米盤復(fù)合物需要均勻的納米盤尺寸,則必須采用諸如Rho1D4-tag等類似的親和層析法對(duì)穩(wěn)定后的目標(biāo)膜蛋白進(jìn)行純化,然后再采用排阻層析(SEC)法對(duì)納米盤尺寸進(jìn)行處理。
采用哪種聚合物?
有越來(lái)越多的聚合物可用于合成納米盤。每種聚合物都有其自身的優(yōu)缺點(diǎn)。例如,DIBMA可以吸收波長(zhǎng)為280 nm的光,與蛋白質(zhì)類似。同時(shí),AASTY與其他聚合物相比,具有相當(dāng)固定的納米盤直徑范圍。
圖2:DIBMA 與 SMA 看起來(lái)似乎可以互換,但實(shí)際上還是存在一些差異的。
選擇膜支架蛋白(MSP)還是合成納米盤?
那么,最后的問(wèn)題仍然是哪種類型的納米盤適合您的項(xiàng)目?MSP 及合成納米盤都旨在通過(guò)模擬細(xì)胞膜環(huán)境來(lái)實(shí)現(xiàn)膜蛋白的增溶和穩(wěn)定。但是,如前所述,二者之間存在著一些關(guān)鍵性差異。表 1 列出了所有差異及其各自的優(yōu)缺點(diǎn)。
表 1:MSP 與合成納米之間的直接比較。
德國(guó)Cube Biotech合成納米盤 訂購(gòu)推薦
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。