組織細(xì)胞RNA提取試劑盒如何提取

來(lái)源：北京眾仁鑫商貿(mào)有限公司 2023年02月23日 10:49

組織細(xì)胞RNA提取試劑盒可用于RT-PCR、Real Time PCR、Northern blot、Dot blot、poly A篩選、體外翻譯、構(gòu)建cDNA文庫(kù)等各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

特點(diǎn)：

無(wú)污染：整套試劑盒采用RNase-Free處理。

特殊性：適用于提取動(dòng)物組織和培養(yǎng)細(xì)胞總RNA。

易操作：操作簡(jiǎn)便，提取過(guò)程僅需30分鐘左右。

安全性：無(wú)需使用苯酚、氯仿等有機(jī)試劑。

吸附柱：含有特異性吸附柱。通過(guò)漂洗－離心－洗脫的步驟提取。

高質(zhì)量：有效保證RNA的完整性，回收RNA效率高，純度高，沒(méi)有蛋白和其他雜質(zhì)污染。OD260/OD280的比值可達(dá)1.9~2.2，可用于各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

提取步驟：

1.將處理后的樣品在室溫靜置5~10分鐘，13000rpm離心3分鐘，會(huì)有雜質(zhì)沉淀。

2.將上清液轉(zhuǎn)入套有基因組DNA清除柱的離心管中。不要吸取、沉淀物和漂浮物。漂浮物可能會(huì)黏附在槍頭的外壁，注意不能將其帶入離心管中。）

3.13000rpm離心60秒，保留濾過(guò)液（RNA在濾過(guò)液中）。

4.估計(jì)濾過(guò)液體積，加入等體積的70%乙醇（請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇）立即吹打混勻。

5.將混合溶液（每次小于700μl）滴入套有吸附柱RA的離心管中，13000rpm離心30秒，棄掉廢液。

6.加700μl去蛋白液RW1，室溫放置1分鐘，12000rpm離心30秒，棄掉廢液。

7.加500μl漂洗液RW（請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇），12000rpm離心30秒，棄掉廢液。

8.重復(fù)步驟7一次。

9.將吸附柱RA放回收集管中，13000rpm離心2分鐘，盡量除去漂洗液，以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)。

10.取出吸附柱RA（避免吸附柱RA的底部碰到收集管里面的廢液），放入新的RNase-free離心管中，在吸附膜的中間部位加30-50μl RNase-free H2O室溫放置1分鐘，12000rpm離心1分鐘。洗脫后的RNA可立即使用或保存在－80°C。

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